Эта работа опубликована в сборнике статей с материалами трудов 2-ой международной телеконференции "Проблемы и перспективы современной медицины, биологии и экологии". Название сборника "Фундаментальные науки и практика Том 1, №2"

Посмотреть обложку сборника

Скачать информацию о сборнике (в архиве: обложка, тит. лист, оглавление, список авторов)

Скачать сборник целиком или по частям можно ЗДЕСЬ

 

Ферганский филиал Ташкентской Медицинской Академии (г. Фергана. Узбекистан)

В настоящее время в клинической хирургии часто имеют место различные объёмы резекции толстой кишки. Они проводятся по поводу неспецифического язвенного и гранулематозного колита, болезни Крона, различных видах непроходимости кишки, её опухолевых поражениях, некрозах, обусловленных различными причинами и, в первую очередь тромбозом мезентериальных сосудов и в других патологических состояниях толстой кишки [В.В.Федотов,1991; А.А. Юсупбеков, 2002; М. Matikainen, Р. Aitola, K.M.Hiltunen, 2000].
В настоящее время рассматривать компенсаторно-приспособительные процессы в пищеварительном тракте, особенно в желудке, без учёта ульцерогенной микрофлоры (и фауны), а также соотношение факторов защиты и агрессии, не целесообразно. 
Тотальная резекция толстой кишки приводит к сложной анатомо-гистологической и физиологической перестройке в организме. После полного удаления толстой кишки происходит постепенное приспособление, адаптация функций отдельных органов и систем организма к новым условиям существования. К сожалению, имеющиеся литературные данные о структурно-функциональной перестройке желудка после тотальной резекции толстой кишки малочисленны и имеют в основном клинико-физиологическую направленность, их результаты часто разноречивы. Нами, в доступной литературе, не обнаружены сообщения,  раскрывающие характер приспособительных сдвигов в микрофлоре содержимого желудка после тотальной резекции толстой кишки, что позволяет разработать патогенетические способы коррекции наблюдаемых после операции дисбактериозов. Раскрытие механизмов, происходящих в желудке адаптационно-приспособительных изменений имеет определенное практическое значение, тем более, что функциональные взаимосвязи, общность происхождения, кровоснабжения, иннервации и взаимоотношения отдельных представителей микрофлоры желудка и толстой кишки  обуславливают реакцию одного из названных органов на удаление другого.
Материалы и методы. Эксперименты проведены на 50 взрослых белых беспородных крысах–самцах с исходной массой тела 150–220г., содержавшихся в одинаковых условиях виварии. У подопытных животных произведено тотальная резекция толстой кишки по методу Ayletta [S.O.Aylett, 1964] и контрольных животных (10) вскрывали брюшную полость и после ревизии внутренних органов зашивали как у подопытных животных. Забой опытных и контрольных животных производили на 7, 15, 30, 60, 90 сутки в утренние часы натощак под легким эфирным наркозом и брали содержимого желудка для бактериологического исследования в стерильных условиях в фосфатный буферный раствор в соотношении 1:10, затем материал разводили в 10 раз.
С целью выделения и идентификации чистых культур аэробных микроорганизмов исследуемый материал засевали на дифференциально – диагностические питательные среды: Эндо и Левина (подсчёт группы кишечных бактерий – Escherichia, Proteus), среду Калины (энтерококков), кровяной агар (количественной учёт аэробных бактерий), желточно – солевой агар (подсчет стафилококков), среду Сабуро (Candida и других грибов).
Аспорогенные анаэробные микроорганизмы (бифидобактерии, бактероиды) выделяли капельным методом с использованием часовых стекол, описанным Лизько и соавт. [Н.Н. Лизько, В.Т. Шилов, 1979] и применением специальных элективных питательных сред. Для подсчета и выделения молочнокислых бактерий (лакобациллы) применяли среду МРС– 4.
Идентификацию бифидобактерий, бактероидов, лактобацилл и энтерококков проводили по культуральным, морфологическим и тинкториальным свойствам.
Полученные результаты выражали в десятичных логарифмах на 1 мл содержимого желудка.
Для трансмиссионной электронной микроскопии (ТЭМ) образцы ткани фиксировали 2,5% раствором глютарового альдегида на фосфатном или какодилатном буфере, после обезвоживания в спирте-ацетоне заливали эпоно-аралдитовой смесью. Ультратонкие срезы, полученные на ультратоме «Ultracut», контрастировали в аппарате «Ultrostainer»  и просматривали в электронном микроскопе Hitachi H-600.
Результаты и обсуждение. Анализ полученных данных показал (табл.), что в норме в содержимом желудка лактобациллы и аспорогенная анаэробная микрофлора доминируют над аэробной аутофлорой.
При электронномикроскопическом исследовании у контрольных крыс единичные микроорганизмы встречаются в просветах желёз на всех уровнях, в том числе и в нижней трети, где сосредоточены главные клетки (рис.1). При тотальной резекции толстой кишки на 7 – 15 – 30-й дни развивается дисбактериоз, проявляющийся в уменьшении общего количества лактобацилл и аспорогенной анаэробной микрофлоры и преобладании аэробной аутофлоры.
Электронномикроскопические исследования фундального отдела желудка желёз через 30-60 дней после тотальной резекции толстой кишки выявляют существенное увеличение числа так называемых пристеночных микроорганизмов, то есть микробов, располагающихся в непосредственной близости от плазматической мембраны или непосредственно на её поверхности. При этом апикальные части клеток, при непосредственном контакте с микроорганизмами, подвергаются выраженной альтерации. Их поверхность становится неровной. Отмечается выступы и углубления (рис.2).

 

Рис.1. Нижняя треть фундальной железы. Главные клетки. Единичные микроорганизмы в просвете. Контроль. ТЭМ х 7500.
ЗЭС – зернистая эндоплазматическая сеть
МО – микроорганизм
Пр – просвет
СГ – секреторная гранула 

Рис.2. Микроорганизмы в просвете и на поверхности мукоцитов через 30 дней после тотальной резекции толстой кишки. ТЭМ х 7500.
МО – микроорганизм
Пр – просвет
СГ – секреторная гранула

             

 

Рис. 3. Микроорганизмы (грибы типа Кандида) на поверхности мукоцитов. Через 60 дней после тотальной резекции толстой кишки.    ТЭМ х 7500.
МО – микроорганизм
СГ – секреторная гранула

Таблица

Количественный состав микрофлоры содержимого желудка в норме

и при тотальной резекции толстой кишки     (М±m; lg/мл)

Обнаружен-ные микрофлоры	Контроль (Норма) n-10	С Р О К И  П О С Л Е  О П Е Р А Ц И И
		7 дней n-8	15 дней n-8	30 дней n-8	60 дней n-8	90 дней n- 8
Бифидобак-терии	4,30±0,17	-	-	1,84±0,25	2,18±0,32	3,0±0,46
Лактобацил-лы	4,90±0,12	-	1,48±0,36	2,08±0,42	2,78±0,54	3,0±0,15
Кишечная палочка (E. coli)	2,26±0,28	4,81±0,18*	5,62±0,12*	6,49±0,32*	5,20±0,42*	3,63±0,26*
Энтерокок-ки	3,16±0,32	5,37±0,11*	6,35±0,24*	6,84±0,53*	6,05±0,38*	5,18±0,11
Стафилокок-ки	3,48±0,22	6,20±0,25*	6,93±0,14*	4,46±0,14	4,0±0,54	4,71±0,32
Грибы рода Candida	3,19±0,21	5,90±0,48*	6,16±1,02*	5,20±0,83*	4,53±0,36*	4,0±0,26
Бактероиды	3,20±0,41	4,86±0,27*	5,68±0,12*	5,60±0,44*	4,51±0,14	3,32±0,54
Proteus	2,46±0,30	3,48±0,18*	4,40±0,52*	4,36±0,12*	4,83±0,29*	3,16±0,18*

Примечание:  * - Абсолютное число микроорганизмов в 10⁶; n - Количество животных.

Дисбактериоз сохраняется на 30 – 60-й дни, а процесс восстановления количественного состава микрофлоры содержимого желудка начинается на 90  день после тотальной резекции толстой кишки.
Результаты сравнительного исследования количественных соотношений лактобацилл, бифидобактерий и бактероидов показали, что в норме почти преобладают молочнокислые бактерии. В ранние сроки после тотальной резекции толстой кишки (7 – 15 – 30-й дни) бифидобактерии и лактобациллы оказались более чувствительными, чем бактероиды (табл.).
По нашим наблюдениям, количество бифидобактерии начинается восстанавливается к 30-му дню после тотальной резекции толстой кишки, a на 60 – 90-й дни их количество увеличивается, что, видимо, объясняется наличием более совершенного адаптационного механизма.
В ранних сроках (7 – 15 – 30-й дни) наблюдения в содержимом желудка отмечается относительный дисбактериоз, характеризующийся повышенным количеством грибы рода Сandida и бактероидов на фоне невосстановленного количества лактобацилл и бифидобактерий. 
Результаты проведенных исследований показали, что в норме в содержимом желудка интактных крыс кокковая группа бактерий преобладает над кишечной, а энтерококки и кишечные палочки доминируют над стафилококками и протеем. Проникновение кокковых бактерий с пищей из полости рта, их устойчивость к кислой среде объясняют их преобладание в желудке.
В содержимом желудка интактных крыс грибы рода Сandida и другие занимают в количественном отношении промежуточное положение между кокковой и кишечной группами. В ранние сроки (7 – 15 – 30-й дни) после тотальной резекции толстой кишки количество всех видов аэробной микрофлоры увеличивает на 2 раза с преобладанием кокковой группы над кишечной. К концу срока после тотальной резекции толстой кишки (90-й день) повышенное количество аэробных микробов сохраняется.
Отмечается увеличение количества грибов рода Candida и другие во все сроки наблюдения по сравнению с контролем.     
В последние годы сообщалось о роли грибов рода Candida и бактероидов в развитии патологических процессов при хронических и хирургических заболеваниях.
При тотальной резекции толстой кишки на 15-30-й дни наблюдения отмечается быстрое увеличение количества бактероидов в содержимом желудка, а в последующие сроки их количество постепенно уменьшается.
Таким образом, во всех сроках после операции, отмечалось резкое изменение состава микрофлоры содержимого желудка. Эти изменения –характеризовались значительным уменьшением анаэробных бесспоровых палочек, молочнокислых бактерий и стафилококков и повышением дрожжевых и дрожжеподобных грибков рода Candida, патогенных энтерококков, кишечных палочек и палочек протея.

 

ВЫВОДЫ
1. В содержимом желудка интактных крыс лактобациллы, бифидобактерии и бактероиды преобладают над аэробной микрофлорой.
2. В адаптивной перестройке микрофлоры желудка после тотальной резекции толстой кишки прослеживается отчетливая стадийность, где можно выделить две периода:
-    период ранних после операционных изменений (7-30 суток)
-    период адаптации (60-90 суток)
3. При тотальной резекции толстой кишки в ранние сроки развивается дисбактериоз, характеризующийся уменьшением количества лактобацилл, аспорогенных анаэробов и увеличением количества всех исследованных видов аэробных микроорганизмов, к концу срока наблюдения грибов рода Candida и бактероидов в содержимом желудка сохраняется повышенное содержание аэробной аутофлоры.