Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск
Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам 70-й Юбилейной итоговой научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г. Томск, 16-18 мая 2011 г.), под ред. В. В. Новицкого, Л. М. Огородовой. − Томск: Сибирский государственный медицинский университет, 2011. − 430 с.
Актуальность: мать-и-мачеха (TussilagofarfaraL.) широко распространена в Сибири, Европейской части России, в Горах Алтая, Восточных и Западных Саян. Препараты мать-и-мачехи оказывают отхаркивающее, противовоспалительное, мягчительное и дезинфицирующее действие [3]. В ранее проведенных нами исследованиях была выявлена иммунотропная активность водорастворимых полисахаридов (ВРПС) из листьев T. farfara [1], также было установлено выраженное влияние данных ВРПС на рост и метастазирование опухоли в условиях лечения циклофосфаном на модели карциномы легких Льюис у мышей при химиотерапии [2].
Известно, что химическая структура полисахаридов природного происхождения тесно связана с их биологическими свойствами. Начальным этапом изучения структуры ВРПС является установление их мономерного состава. Поэтому целью настоящей работы явилось изучение мономерного состава комплекса водорастворимых полисахаридов из листьев T. farfara.
Материалы и методы: извлечение водорастворимых полисахаридов осуществляли методом двукратной экстракции (1:100 мл экстрагента+0,5% р-р HCl; нагревание 1 час; отстаивание 24 часа; далее нагревание 1 час) и последующим диализом через полупроницаемую мембрану. Содержание уроновых кислот (УК) в ВРПС и во фракциях определяли карбазол-серным методом [4], общее содержание белка – методом Лоури [5]. Разделение ВРПС на фракции проводили на DEAE-целлюлозе (Cl- форма). Мономерный состав изучали методом ГЖХ-хроматомасс после кислотного гидролиза в 2 М кислоте трифторуксусной в течение 5 ч и дальнейшего триметилсилилирования.
Результаты: выход полученных ВРПС из листьев T. farfara составил 1,83%. Содержание УК в ВРПС – 26,35±0,19%; общее содержание белка – 2,04±0,01%.
При разделении ВРПС на DEAE-целлюлозе было получено 6 основных фракций, содержащихся в наибольшем количестве (PSU-1, PSU-2, PSU-3, PSU-4, PSU-5, PSU-6). Характеристика фракций представлена в таблице.
|
Таблица
Характеристика фракции водорастворимых полисахаридов из листьев T. farfara
|
|
№
п/п
|
Фракция
ВРПС
|
Выход,
% от массы ВРПС
|
Характеристика
фракций ВРПС |
| Содержание УК, % |
Содержание белка, % |
| 1 |
PSU-1 |
18,34±1,36 |
1,13 |
0,91 |
| 2 |
PSU-2 |
13,29±0,23 |
2,6 |
0,95 |
| 3 |
PSU-3 |
17,29±2,17 |
1,02 |
1,21 |
| 4 |
PSU-4 |
31,83±1,07 |
57,69 |
0,9 |
| 5 |
PSU-5 |
8,05±0,25 |
3,14 |
0,81 |
| 6 |
PSU-6 |
8,78±1,85 |
4,4 |
0,47 |
Из таблицы видно, что фракции PSU-1, PSU-2, PSU-3, PSU-5, PSU-6 содержат небольшое количество УК (от 1,13 до 4,4%) и представлены в основном нейтральными сахарами. Фракция PSU-4 является доминирующей (выход около 32%) и отличается высоким содержанием УК (57,69%). Все фракции содержат небольшое количество белка (0,47-1,21%), который может находиться как в связанной с полисахаридными молекулами форме, так и в виде свободной примеси.
После кислотного гидролиза и триметилсилилирования изучен мономерный состав этих фракций. Установлено, что основными мономерными звеньями PSU-1 являются глюкоза и галактоза в соотношении 2:1, а манноза, ксилоза и рамноза присутствуют в минорных количествах. Основными структурными звеньями PSU-2 являются галактоза, рамноза, арабиноза и глюкоза в соотношении 3,5:2,6:2,2;1. Основными мономерными звеньями PSU-3 являются галактоза, рамноза, арабиноза и глюкоза в соотношении 10,3: 5:2,7:1 соответственно. Основными мономерными звеньями PSU-4 являются D-галактуроновая кислота, галактоза, глюкоза, ксилоза, рамноза и манноза в соотношении 23,3: 11,3:5,7:3,1:2,7:1 соответственно. PSU-5 состоит из галактозы, рамнозы и глюкозы (3:1,3:1) Полисахарид PSU-6 состоит преимущественно из остатков рамнозы.
Выводы: таким образом, изучен мономерный состав водорастворимых полисахаридов из листьев мать-и-мачехи. Установлено, что ВРПС состоят из 6 основных компонентов (PSU-1, PSU-2, PSU-3, PSU-4, PSU-5, PSU-6). PSU-1, вероятно является глюкогалактаном; PSU-2, PSU-3 и PSU-5 – глюкорамногалактаном; PSU-4 – рамногалактуронаном. Доминирующими компонентами ВРПС листьев мать-и-мачехи являются нейтральные полисахариды (около 66%).
Список литературы:
1. Данилец, М.Г. Влияние растительных полисахаридов на NO-синтетазу и аргиназу макрофагов мыши / М.Г. Данилец, А.М. Гурьев, Н.В. Бельская, М.В. Белоусов и др. // Вестник Уральской медицинской академической науки. – 2009. – №2 (25). – С. 49-50.
2. Водорастворимые полисахариды растений Сибири совместно с циклофосфаном в комплексной терапии перевиваемой опухоли Льюса у мышей / К.А. Лопатина Т.Г Разина, Е.П. Зуева и др. // Растительные ресурсы. – 2008. – вып. 2. – 115 с.
3. Турова, А.Д. Лекарственные растения СССР и их применение. Изд. 2-е/ А.Д. Турова.− М.: Медицина, 1974. − 425 с.
4. Bitter, T. A modified uronic acid carbazolereacti., / Т. Bitter, Muir H. // Anal. Biochem.– 1962. – Vol. 4. – P. 330–334.
5. Lowry O., Protein measurement with the Folin reagent/ О. Lowry, N. Rosenbrogh, А. Farr and al. // I. Biol.Chem. – 1951. – Vol. 1. – P. 265–275.
|
