Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск

Кафедра патофизиологии

Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам 71-й итоговой научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г. Томск, 14-16 мая 2012 г.), под ред. В. В. Новицкого, Н.В. Рязанцевой. − Томск: Сибирский государственный медицинский университет, 2012. − 335 с. 

Скачать сборник (MS Word, 1 мб)

Скачать программу конференции 

Актуальность. Течение генитального эндометриоза практически в каждом случае связано со спаечным процессом, многие исследователи обнаруживали эндометриоидные образования в основании спаек при рассечении брюшины. Хирургическое лечение эндометриоза также может сопровождаться образованием послеоперационных спаек различной локализации и плотности. Трансформирующий фактор роста-бетта (TGF-β) является ключевым медиатором фиброгенеза, с чем связывают возможную роль данного цитокина в патогенезе эндометриоза и сопутствующего ему спаечного процесса.

Цель. Провести анализ распределения аллельных вариантов гена TGFB и обнаружить их ассоциацию с уровнем продукции соответствующего цитокина (TGF-β) в патогенезе эндометриоза и спаечного процесса.

Материал и методы. В программу исследования были включены 135 пациенток репродуктивного возраста от 19 до 43 лет (средний возраст 30,6+1,2 года). Основную группу составили 92 женщины с генитальным эндометриозом. В группу сравнения вошли 43 женщины, у которых при проведении эндоскопического исследования был исключен генитальный эндометриоз. У Выделение ДНК из периферической крови проводили сорбентным методом ('ДНК-сорб-В', 'ИнтерЛабСервис', Россия). Исследование полиморфного участка С-509Т гена TGFВ (rs1800469) проводили с использованием аллель-специфической полимеразной цепной реакции (ПЦР). Амплификацию осуществляли согласно инструкции, прилагаемой к коммерческому набору 'АмплиСенс-200-1' ('ИнтерЛабСервис', Россия). После проведения ПЦР 8 мкл амплификата разделяли в 2% агарозном геле. В качестве маркера размера ДНК использовали плазмиду pUC19, расщепленную рестриктазой MspI ('Сибэнзим', Россия). Содержание TGF-β в сыворотке крови оценивали с помощью твердофазного иммуноферментного анализа ('Cytimmune', США). Для проверки нормальности распределения показателей использовали критерий Колмогорова-Смирнова; равенство выборочных средних проверяли по U-критерию Манна-Уитни. Для анализа ассоциации маркеров исследуемого гена с эндометриозом сравнивали частоты аллелей и генотипов в группах женщин, используя критерий χ2 с поправкой Йетса на непрерывность. Об ассоциации разных генотипов и аллелей с заболеванием судили по величине отношения шансов (oddsratio (OR)) с расчетом для него 95% доверительного интервала.

Результаты. У пациенток с генитальным эндометриозом содержание TGF-β в крови (7120 пг/мл) значимо превышало таковое у женщин без данной патологии (4087 пг/мл, p<0,05). Иммуногенетическое исследование показало, что среди пациенток с эндометриозом статистически значимо преобладали гомозиготы с генотипом ТТ полиморфизма C-509T гена TGFB (55% против 35% у женщин без эндометриоза), а реже встречались носительницы генотипа СС (33% против 49% у женщин без данной патологии). Анализ распределения аллелей позволил установить, что среди больных эндометриозом достоверно преобладал аллель Т (χ2=8,03, p<0,005) полиморфизма C-509T гена TGFB.

Генотипирование образцов ДНК по гену TGFBC-509T у больных эндометриозом показало, что частота встречаемости генотипа ТТ у пациенток с выраженным спаечным процессом III-IV степени (47%) статистически значимо превышала таковую у женщин со спаечным процессом органов малого таза I-II cтепени (28 %).

Установлено, что ген TGF индуцирует увеличение экспрессии мРНК для цепей коллагена в клетках человека. TGF-β может влиять на метаболизм белков матрикса как непосредственно, так и опосредованно, через синтез других регуляторных молекул. Таким образом, благодаря своей полифункциональности, TGF-β играет важную роль в фиброгенезе при генитальном эндометриозе.

Выводы.

1. Течение генитального эндометриоза сопровождается повышением содержания TGF-β в крови.

     2. Риск подверженности генитальному эндометриозу с выраженным спаечным процессом ассоциирован с аллелем Т и генотипом ТТ локуса C-509T гена TGFB.