|
Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, Новосибирск
Участие бинуклеарных и многоядерных макрофагов в патологических процессах, детерминирующих развитие ряда заболеваний, определяет актуальность исследования данных производных [1]. Не вызывает сомнения тот факт, что успешное изучение этих клеточных форм невозможно без рассмотрения многих аспектов реализации функциональной активности макрофагов.
К одним из основных видов активности макрофагов относится их способность к адгезии и амитотическому делению ядер [1]. Известно, что процесс амитоза играет ведущую роль в формировании бинуклеарных [1] и многоядерных клеток [1, 3; 4]. Амитоз, отмеченный в клетках различного происхождения [2; 4], включая перитонеальные макрофаги [2], имеет генотипическую обусловленность интенсивности его протекания [1].
Поскольку показано влияние концентрации посадки клеток в культурах на реализацию внутриклеточных реакций [1], то не исключено, что количественный состав культуры, зависящий от способности клеток к адгезии [1], детерминирует характер функционирования ее элементов, определяющий, в том числе, напряженность процессов образования многоядерных и бинуклеарных производных.
Цель исследования состояла в изучении активности формирования би- и полинуклеарных макрофагов в культурах генотипически различных перитонеальных клеток в зависимости от изначальной способности макрофагов к адгезии, определяющей количественный состав клеточных культур.
Использовали первичные культуры перитонеальных клеток, выделенных от мышей линии BALB/c и CBF. После посадки клеток в культуры первоначальное время их инкубации, требующееся для осаждения и адгезии макрофагов, составляло 20 минут. Затем проводили удаление культуральной среды, содержащей не успевшие адгезироваться клетки, с целью их последующей посадки в культуры, из которых были сформированы экспериментальные группы. Контрольные группы составляли культуры клеток адгезированных в течение их предварительной инкубации. В таких культурах удаленная среда была заменена на свежую. После того как контрольные и экспериментальные группы культур клеток, выделенных от животных обеих линий, были сформированы, общее время их инкубации составило 24 часа.
Определяли суммарную частоту встречаемости двуядерных и полинуклеарных макрофагов (разнящихся по классу ядерности) и относительное количество клеток с признаками амитотического деления ядер. Проводили оценку численности макрофагов, приходящейся на единицу площади подложки.
Согласно результатам исследования численность макрофагов, приходящаяся на единицу площади подложки, в культурах обеих экспериментальных групп снижалась в среднем в 7,9 раза по сравнению с контролем. Суммарная частота встречаемости би- и полинуклеарных макрофагов в культурах экспериментальных групп BALB/c и CBF снижалась соответственно в 1,8 и в 3,9 раза по сравнению с контролем. Причем в культурах экспериментальной группы CBF макрофаги, содержащие три и более ядер, практически не встречались, однако в культурах экспериментальной группы BALB/c численность таких клеток составляла 26,8 %. Амитотическая активность в культурах обеих экспериментальных групп снижалась в среднем на 38,7 % по сравнению с контролем.
Таким образом, снижение уровня амитотической активности детерминировало уменьшение частоты встречаемости би- и полинуклеаров в культурах обеих экспериментальных групп. При этом процесс амитотического деления ядер следует считать основным механизмом образования указанных форм макрофагов, поскольку клеточная фузия не играла заметной роли в данных реакциях, так как слиянию подвергались лишь единичные макрофаги в культурах всех используемых групп. Уменьшение численности клеток с признаками амитотического деления ядер в культурах с низким содержанием макрофагов, возможно, обусловлено изначальным уровнем адгезивной активности клеток, что может быть сопряжено со степенью их способности к амитотическому делению ядер.
Список литературы:
1. Ильин Д.А. Многоядерные макрофаги. - Новосибирск: Наука, 2011. - 56 с.
2. Gotzos V. In vitro culture of human peritoneal fluid cells // Acta. Anat. (Basel). - 1977. - V. 98. - № 3. - P. 281-294.
3. Walen K.H. Spontaneous cell transformation: karyoplasts derived from multinucleated cells produce new cell growth in senescent human epithelial cell cultures // In Vitro Cell. Dev. Biol. Anim. - 2004. - V. 40. - № 5-6. - P. 150-158.
4. Walen K.H. Budded karyoplasts from multinucleated fibroblast cells contain centrosomes and change their morphology to mitotic cells // Cell. Biol. Int. - 2005. - V. 29. - № 12. - P.1057-1065.
|
