Ульяновский государственный университет (г.Ульяновск)

Острая кровопотеря остается одной из сложных и актуальных проблем. Продолжаются дискуссии, как о патогенезе симптомокомплекса кровопотери, так и о методах ее лечения.
Первичной реакцией на потерю крови является спазм мелких артерий и артериол, возникающий рефлекторно вследствие раздражения рецепторных зон и повышения тонуса симпатико-адреналовой системы. В результате перераспределения органного кровотока кровоснабжение, в частности, печени по ее микроваскулярному руслу ограничивается, в том числе за счет артериоло-венулярного шунтирования. В результате чего в органе развивается вторичная тканевая гипоксия, приводящая к разнообразным расстройствам функций печени, что находит отражение в трансаминазной активности сыворотки крови.
Одним из ведущих патогенетических механизмов развития поражений печени при острой кровопотере является активация процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) [Матвеев С.Б., 1992]. В ингибировании данных процессов важным фактором является необходимость поддерживать ионы металлов (Fe2+, Cu2+ и др.) встроенные в структуру оксигеназ и гидроксилаз в восстановленном состоянии, обеспечивающем нормальную функцию ферментов, инактивирующих процессы ПОЛ. Единственным веществом, способным восстанавливать ионы металлов в подобного рода структурах, является аскорбиновая кислота. Работами Генинг Т.П. с соавт. [1985, 1996] показана возможность направленного транспорта лекарственных препаратов в гомологичных эритроцитах в печень с целью адресной доставки и пролонгирования действия препаратов. Эндотелий синусоидов печени обладает способностью к фагоцитированию эритроцитов.
Целью работы явилась оценка трансаминазной активности сыворотки крови крыс в условиях гипоксии, инициированной кровопотерей и в условиях коррекции ее направленным транспортом аскорбиновой кислоты (АК) в печень.
Материал и методы
Работа выполнена на белых беспородных крысах массой 240-280г. Гипоксию вызывали кровопусканием через катетер [Sapirstein R.A., 1960]. Объем кровопотери составил 2% массы животного. Животные были разделены на следующие группы: 1 группа – интактные животные, 2 группа – крысы с кровопотерей (материал для исследования брали через 6 и 24ч после кровопотери), 3 группа – животные с кровопотерей, получавшие АК путем направленного транспорта. Эритроцитарные контейнеры с АК вводили внутривенно в дозах 25мг/кг, 50мг/кг и 100мг/кг однократно через 10 мин после кровопотери. Для оценки функционального состояния печени определяли активность аспартатаминотрансферазы (АСТ) и аланинаминострансферазы (АЛТ) в сыворотке крови экспериментальных животных [Меньшиков В.М., 1987]. Экспериментальные исследования проводились с соблюдением биоэтических правил.

Результаты

Таблица 1

Влияние направленного транспорта АК на функции печени в условиях кровопотери (М±m, n=9-12)

Примечание: * –р<0,05 по сравнению с интактными животными; •  –  р<0,05 по сравнению с животными с кровопотерей

Обсуждение
При изучении нами активности трансаминаз в динамике кровопотери было установлено, что спустя 6ч после кровопотери активность энзимов достоверно снизилась: активность АСТ на 11,77% (с 229,33±31,26 ммоль/л до 202,33±20,47 ммоль/л) по сравнению с интактными животными, активность АЛТ достоверно понизилась более существенно – на 31,97% (со 107,42±22,71моль/л до 73,08±13,39 ммоль/л). Через 24ч наблюдалось существенное достоверное увеличение активности АСТ на 17,66% (с 229,33±31,26 ммоль/л до 269,83±44,58 ммоль/л) относительно активности интактных животных, что согласуется с данными других исследователей [Довганский А.П. с соавт., 1989]. Активность АЛТ продолжала снижаться и через 24ч после кровопотери снизилась на 39,80% (со 107,42±22,71 ммоль/л до 64,67±9,31 ммоль/л) по сравнению с интактными животными.
Полученные нами данные об угнетении активности трансаминаз в крови на фоне кровопотери, вероятно, можно объяснить изменениями в конформации их молекул, возникшими в результате перестройки метаболизма аминокислот под влиянием кровопотери. Хочачка П. и Сомеро Дж. [1977] считают, что реакция угнетения трансаминаз направлена на предотвращение поступления массивного потока аминокислот в лимоннокислый цикл.
В то же время достоверное возрастание активности трансаминаз в крови после кровопотери дает основание связать эти сдвиги с более существенными нарушениями азотистого обмена и нарушением регуляции функций гипоксией и, вероятно, выходом ферментов в кровь в результате повышенной проницаемости мембран гепатоцитов. Необходимо также учитывать и возможность непосредственной активации трансаминаз в крови кортикостероидами [Кулагин В.К., 1978].
Таким образом, есть основания полагать, что активность трансаминаз в крови при кровопотере претерпевает фазные изменения, обусловленные, по-видимому, в определенной мере нарушениями соотношения аминокислот – субстратов реакций. Последнее может сопровождаться снижением активности энзимов в крови.
Результаты исследования,  представленные в таблице 1, свидетельствуют о том, что использование направленного транспорта АК в печень наиболее эффективным оказалось в дозе 25мг/кг. Возможными биохимическими механизмами антиоксидантного действия АК является: обезвреживание активированных кислородных метаболитов и разрушение перекисей; повышение пула эндогенной антиоксидантной защиты, в частности, восстановление токоферильных радикалов до витамина Е.
 

Библиографический список
1.    Генинг Т.П., Елисеева А.П., Потатуркина-Нестерова Н.И. О возможности использования замкнутых теней аутологичных эритроцитов для направленного транспорта антибиотиков / Т.П. Генинг, А.П. Елисеева, Н.И.  Потатуркина-Нестерова // Антибиотики.- 1985. -№2.- С.101-102.
2.    Генинг Т.П. Эритроциты млекопитающих в направленном транспорте биологически активных веществ / Т.П. Генинг.- Ульяновск, 1996. -224 с.
3.    Довганский А.П. Печень при экстремальных состояниях / А.П. Довганский, Б.М. Курцер, Т.А.  Зорькина.- Кишинев: Штиинца, 1989.- 136 с.
4.    Кулагин В.К. Патологическая физиология травмы и шока / В.К.Кулагин.- Л.: Медицина, 1978.- 296с.
5.    Матвеев С.Б. Влияние α-токоферола на перекисное окисление липидов в печени при острой кровопотере /С.Б.Матвеев, В.В.Марченко, П.П.Голиков //Вопросы медицинской химии.-1992.-Том 38, выпуск 1.-С.18-20.
6.    Меньшиков В.М. Лабораторные методы исследования в клинике /В.М.Меньшиков.- М.: Медицина, 1987.- 271с.
7.    Хочачка П. Стратегия биохимической адаптации /П.Хочачка, Дж.Сомеро /Пер. с англ.- М.: Мир, 1977.
8.    Sapirstein R.A. Effect of hemorrhage on the cardiac output and its distribution in the rat. /R.A.Sapirstein, E.H.Sapirstein, A.Bredemeyer //Circ. Res.- 1960.- Vol.8.- P. 135-147.