Калининградская научно-исследовательская ветеринарная станция (Россия)
Эта статья опубликована в сборнике по материалы первой Международной юбилейной конференции «Актуальные проблемы инфектологии и паразитологии», посвященной 110-летию со дня открытия проф. К.Н.Виноградовым сибирской двуустки у человека (2-5 апреля 2001, г. Томск)
Посмотреть содержание сборника
Скачать сборник целиком
Анаплазмоз крупного рогатого скота – распространенное во всем мире трансмиссивное кровепаразитарное заболевание жвачных животных, вызываемое риккетсиями. Анаплазмоз наносит значительный экономический ущерб животноводству. Полностью освободить животных от паразитов при лечении невозможно, и поэтому остро стоит вопрос разработки средств активной иммунопрофилактики. Несмотря на нестерильный характер иммунитета при естественном переболевании животных, оказалось возможным иммунизировать животных неживым антигеном из анаплазм.
В 2000 году нами был выделен местный вирулентный штамм Anaplasma marginale, обладающий необходимыми иммуногенными свойствами для получения вакцины.
Профилактическая ценность вакцины зависит от иммуногенных свойств исходного штамма. Поэтому оценку пригодности выделяемого штамма необходимо проводить, сравнивая титры антител в сыворотке крови животных из различных хозяйств. Наличие острой клинической формы заболевания имеет вторичное значение и больше влияет на успех заражения опытных животных.
Для получения высокой паразитемии необходимо проводить пассирование возбудителя через организм восприимчивых животных. Обязательна спленэктомия здорового животного и заражение его не позднее 2-х дней после операции в дозе
14 . 1010 анаплазм на животное. Заражающая доза рассчитывается исходя из уровня паразитемии в крови и количества эритроцитов в миллилитре крови. Ориентировочно необходимо вводить около 150 мл крови при паразитемии более 70%.
Таким образом, процесс получения вакцины против анаплазмоза схематично можно представить следующим образом:
| Донор |
->
|
Реципиент |
-> |
Спленэктомированное
животное |
-> |
Сырье для вакцины |
-> |
Создание
вакцины
|
По достижении у спленэктомированного животного паразитемии свыше 60%, кровь пригодна для получения сырья (реально получить паразитемию до 90%). Подсчет паразитемии проводится по формуле:
А · 100
Х = __________ , где
B · C
Х – паразитемия, %,
А - количество пораженных эритроцитов,
В - количество эритроцитов в одном поле зрения,
С - количество просмотренных полей зрения.
Животное обескровливают. От телки весом 200 кг можно получить около семи литров крови. Кровь стабилизируется 20% раствором цитрата натрия 3-х замещенного из расчета 50 мл на два литра крови, с добавлением по одному млн единиц пенициллина и стрептомицина на один литр крови. Отбор производят в стерильную посуду. Желательно в день взятия крови плазму отделить центрифугированием, а эритроциты трижды отмыть 0,9% раствором хлористого натрия (pH 7,2-7,4) до полного осветления (при 3000 оборотах - 15 минут или при 1500 оборотах - 30 минут). Отмытые эритроциты следует хранить замороженными.
Для поддержания вирулентного штамма Anaplasma marginale необходимо сразу же заразить следующее животное.
По литературным данным, в стабилизированной крови риккетсия сохраняет вирулентные свойства до 86 дней, но вероятность заражения снижается при увеличении срока хранения.
Однако нам удалось заразить опытных животных кровью консервированной препаратом «Гемакон» после 120 суток хранения при температуре 40 С.
Способ является предварительным этапом создания вакцины против анаплазмоза, позволяет выделить высоковирулентный, иммуногенный штамм Anaplasma marginale и получить эритроцитарную массу для выработки вакцины.
|
