Авторы: Тастанбеков Б.Д., Божбанбаева Н.С., Сулейменова И.Е.,Мустафазаде Т.Ш., Абдрахманова Г.Е., Есенова С.А.
Казахский Национальный медицинский университет  им. С.Д. Асфендиярова (г. Алматы)

Эта статья опубликована сборнике научных трудов "Фундаментальные науки и практика" с материалами Третьей Международной Телеконференции "Проблемы и перспективы современной медицины, биологии и экологии" - Том 1 - №4. - Томск - 2010.

 

В настоящее время разработана  технология Real-time PCR (ПЦР с детекцией продукта в режиме реального времени), которая позволяет проводить не только качественный ПЦР-анализ («FLASH»), но и количественное определение ДНК возбудителя [1, 2]. Метод ПЦР Real-time имеет практическое значение для определения вирусной нагрузки при терапии вирусных инфекций. Кроме того, установление количества вирусов в организме инфицированного ребенка позволило бы прогнозировать заболеваемость и исходы ВУИ. К сожалению, на сегодняшний день разработаны тест-системы определения количественной ПЦР лишь для цитомегаловирусной инфекции.
Целью  наших исследований явилось изучение прогноза заболеваемости у детей с врожденной цитомегаловирусной инфекцией.
        Для  определения вирусной нагрузки мы проводили исследование мочи, слюны, крови у 20 детей первых месяцев жизни с верифицированной в ИФА и ПЦР цитомегаловирусной инфекцией. У подавляющего большинства (18) пациентов диагностировано хроническое рецидивирующее течение, лишь в двух случаях отмечалось острое течение генерализованной формы ЦМВИ с последующим переходом в хроническое течение заболевания. При периодической реактивации вируса во всех случаях выявлялась неврологическая симптоматика в виде усиления симптомов гидроцефального синдрома, синдрома гипервозбудимости. В 50% случаев регистрировалось сочетание церебральной и соматической патологии.
В результате проведенных исследований методом количественной ПЦР, показатели вирусной нагрузки от 65 до 5000 копий ДНК в мл. определялись у 4-х (20%) пациентов, от 5000- 15000 копий ДНК выявлены в 6 (30%) случаях. Количество вирусов от 15000 до 100000 документировано у 8 (40%) детей. Самые высокие показатели вирусной нагрузки констатированы лишь у двух детей.
При динамическом наблюдении мы выявили, что к годовалому возрасту и тяжесть симптомов и исходы заболевания зависели от количества вирусов в организме инфицированного ребенка (таблица 1).

Таблица 1 - Прогнозирование заболеваемости у детей с внутриутробной ЦМВИ

Патологические состояния	от 65 - 5000 копий ДНК в мл.	от 5000- 15000	15000-100000	100000- 1 млн.
Внутричерепная гипертензия	+	+	+	+
Гидроцефальный синдром, задержка речевого развития, задержка психомоторного развития	-	+	+	+
Гидроцефальный синдром  + соматическая патология (поражение одного органа)	-	-	+	+
Задержка психомоторного развития, микроцефалия	-	-	-	+
Хронические формы соматической патологии (поражение трех органов)	-	-	-	+

Показатели вирусной нагрузки, определенные при помощи количественной ПЦР, были значительно более высокими (от 100000 до 1 млн.) у детей с грубой задержкой психомоторного  развития и микроцефалией, а также у детей с формированием в дальнейшем соматической полиорганной патологии. При вирусной нагрузке от 15000 до 100000 geg/ml наблюдались проявления компенсированного гидроцефального синдрома в сочетании с клиническими проявлениями патологии одной системы. Так, в двух случаях отмечались клинические проявления рецидивирующего бронхита. У трех детей выявлены симптомы поражения желудочно-кишечного тракта и гепатобилиарной системы. В остальных случаях определялись кардиальные нарушения. Диапазон значений вирусной нагрузки от 5000 до 15000 копий ДНК сопровождался осложнениями гидроцефального синдрома в виде задержки психомоторного развития у двух детей, речевого развития у одного ребенка и отставанием в моторном развитии у трех детей. При этом мы не обнаружили у них соматической патологии. Показатели вирусной нагрузки от 65 до 5000 копий ДНК  в мл. соответствовало лишь церебральной патологии в виде внутричерепной гипертензии.
Согласно четырехпольной таблице, чувствительность теста количественной ПЦР составила 87%, специфичность – 75%,  положительное прогностическое значение - 90%, отношение правдоподобия – 5,3. Таким образом, высокая вирусная нагрузка в крови, моче и слюне (Sp = 75,0; LR+ = 5,3) у детей с внутриутробной ЦМВИ является прогностическим маркером высокого риска развития осложнений с формированием церебральной  и соматической патологии.
Исходя из полученных данных, мы рекомендуем для диагностики внутриутробной инфекции вначале проводить качественный  ПЦР-анализ. В случае детекции ДНК возбудителя необходимо определить вирусную нагрузку (количественная ПЦР) хотя бы в одной из биологических сред (моча, слюна, кровь), которая позволит решить вопросы как прогнозирования исходов внутриутробной инфекции, так и оценки эффективности лечения.

Литература:
1     Marcello Lanari et al. Neonatal Cytomegalovirus Blood Load and Risk of Sequelae in Symptomatic and Asymptomatic Congenitally Infected Newborns // Pediatrics. – 2006. – № 117. -  Р.76- 83.
2           Долгих Т.И., Кадцына Т.В., Соклова Т.Ф. Герпесвирусные инфекции у беременных женщин и новорожденных детей: оптимизация диагностики и лечения. //Сборник трудов 5-ой Всероссийской научно-практической конференции. – М., 2004. – Т. 1. - С. 327-329.