Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания СО РАМН

Эта статья была опубликована в  сборнике научных трудов "Естествознание и гуманизм" с материалами Шестой Международной Телеконференции (24-29 октября 2011 года). Информационная страница сборника.   

РЕЗЮМЕ

В работе описывается состав ω-6 полиненасыщенных кислот в гомогенате плацент при герпес-вирусной инфекции. Установлено увеличение концентрации арахидоновой и снижение линолевой жирных кислот в плаценте рожениц, перенесших во время гестации обострение герпес-вирусной инфекции, способствующее образованию провоспалительных эйкозаноидов.

Ключевые слова: плацента, полиненасыщенные жирные кислоты, герпес-вирусная инфекция

N.A. Ishutina

LINOLEIC AND ARACHIDONIC ω-6 POLYUNSATURATED ADIPOSE ACIDS OF LIPIDS OF THE PLACENTA AT THE HERPES-VIRUS INFECTION CONTAMINATION

Far Eastern Research Center for Physiology and Respiratory Pathology of SB RAMS

(675000, Blagoveshchensk, Kalinin str. 22)

SUMMARY

In work the structure ω-6 polyunsaturated acids in a homogenate of placentas is described at a herpes-virus infection contamination. The augmentation of concentration of arachidonic and  decrease linoleic adipose acids in a placenta of the parturient women who have transferred during time gestation an exacerbation of a herpes-virus infection contamination, promoting formation{education} proinflammatory eicosanoic fixed.

Key words: placenta, polyunsaturated adipose acids, herpes-virus infection contamination

Согласно современных представлениям основным патогенетическим фактором многих заболеваний и патологических состояний, сопровождающих нарушения биологических барьеров клеточных мембран, является активация свободнорадикальных реакций, которые представляют собой каскад оксигенации деградации ненасыщенных кислот, входящих в состав фосфолипидов [2, 5, 8].

 Одной из важнейших функций полиненасыщенных жирных кислот (ПНЖК) является их участие в качестве субстратов в синтезе эйкозаноидов, которые принимают участие в регуляции иммунного статуса, сосудистого тонуса, состояний микроциркуляции, агрегации тромбоцитов и процессов гемокоагуляции [1]. Особая роль эйкозаноидов принадлежит в регуляции репродуктивной функции и родовом процессе [16]. Наиболее активным предшественником эйкозаноидов является входящая в состав фосфолипидов плазматических мембран арахидоновая кислота, которая метаболизируясь,  превращается в различные типы простагландинов, тромбоксонов и лейкотриенов [3].

Изучение жирно-кислотного состава плацентарных мембран  описано в ряде  работ иностранных авторов [11, 12, 14, 15], но эти данные получены у женщин с физиологическим течением беременности. Мы не нашли исследований жирно-кислотного состава плацент у женщин с осложнением беременности герпес-вирусной инфекцией (ГВИ). Поэтому цель работы состояла в изучении содержания ω-6 линолевой и арахидоновой кислот в гомогенате плацент рожениц, перенесших в различные периоды гестации обострение ГВИ.

Материал и методы исследования

Проведено исследование линолевой и арахидоновой ПНЖК 20 плацент, взятых на сроке 36-40 недель от беременных, перенесших обострение ГВИ до и во время гестации (титр антител Ig G к вирусу простого герпеса-1 (ВПГ-1) 1:12800) – основная группа. В группу контроля вошли 20 плацент от практически здоровых женщин на тех же сроках гестации.

Для получения гомогената плодовую часть плаценты (ворсинчатый хорион) срезалась скальпелем небольшими кусочками площадью до 2-3 см и толщиной 1 мм. Кусочки ткани помещали в химические стаканы, содержащие 200 мл физиологического раствора, отмывали от клеток крови, перемешивая на магнитной мешалке в течение 15 мин, и подсушивали на фильтровальной бумаге. Ткань растирали и гомогенизировали до однородной массы. Гомогенаты замораживали при -20⁰С в течение суток. Затем размораживали и проводили экстракцию мембранных липидов по Фолчу [13]. Жирные кислоты, входящие в состав липидов, после их метилирования [10], определяли методом газожидкостной хроматографии на хроматографе «Кристалл 2000 м» (Россия) с пламенно-ионизационным детектором. Обсчет и идентификацию пиков выполняли с помощью программно-аппаратного комплекса Хроматэк Аналитик 2,5 по временам удерживания с использованием стандартов фирмы «Supelco» (USA). Количественный расчет хроматограмм проводили методом внутренней нормализации путем определения площадей пиков анализируемых компонентов и их доли (в относительных %) в общей сумме площадей пиков метилированых продуктов высших жирных кислот.

Титр антител к ВПГ-1 определяли по динамике антител Ig G с помощью стандартных тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск) на микропланшетном ридере «Stat-Fax 2100» (USA). 

Все исследования были проведены с учетом требований Хельсинской декларации Всемирной ассоциации «Этические принципы проведения научных медицинских исследований с участием человека» с поправками 2000 г.  и «Правилами клинической практики в Российской Федерации», утвержденные Приказом Минздрава РФ  от 19.06.2003 г. № 226. Полученные данные обработаны методами вариационной статистики с использованием непарного t-критерия Стьюдента и Фишера.

Результаты исследования и их обсуждение

При изучении содержания ω-6 линолевой и арахидоновой жирных кислот мембран плаценты получены данные, представленные в таблице. Из таблицы видно, что активация ГВИ в период беременности, с тяжелым по агрессивности течением, сопровождалась изменением состава данных кислот. Так, если в период гестации женщина перенесла обострение ГВИ (при этом титр антител Ig G к ВПГ-1 увеличивался до 1:12800), то содержание арахидоновой кислоты достоверно увеличивалось, тогда как концентрация линолевой снижалась по сравнению с данными показателями рожениц с физиологическим течением беременности (табл.).

Таблица

Содержание линолевой и арахидоновой ω-6 ПНЖК в гомогенате плацент рожениц с обострением ГВИ (% от суммы)

Примечание: * - различия статистически значимы при р(t) <0,05, р(F) <0,05

По-видимому, в условиях ГВИ не происходит блокировка образования арахидоновой кислоты из линолевой в связи с низким ее содержанием в липидах гомогенатов плацент. С другой стороны, возможно, здесь срабатывает  механизм компенсации, так как арахидоновая кислота  субстрат синтеза циркулирующих вазоактивных факторов: простациклина и тромбоксана А₂, которые модулируют сосудистый тонус и активацию тромбоцитов, вовлекаются в механизм инициирования сокращения миометрия во время родов.

Под действием инфекционных агентов или других триггеров воспаления активизируется фермент фосфолипаза А₂, которая гидролизует ацильную цепь фосфолипида в sn-2 положении. Причем действие фосфолипазы А₂ направлено на окисленные формы фосфолипидов с образованием вторичных провоспалительных продуктов реакции – лизофосфатидилхолина и окисленных неэтерифицированных – арахидоновой, либо эйкозопентаеновой жирных кислот, из которых под действием циклооксигеназы и липоксигеназы образуются эйкозаноиды  [9].

Метаболизм арахидоновой кислоты идет двумя путями: циклооксигеназным и липоксигеназным [6]. Циклооксигеназный путь приводит к образованию простагландинов и тромбоксана А₂, липоксигеназный – к образованию лейкотриенов, которые играют активную роль в развитии воспалительного процесса. Из арахидоновой кислоты образуются лейкотриены серии 4, принадлежащие к наиболее активным медиаторам воспаления [7].

При достаточном поступлении ω-3 ПНЖК вытесняют арахидоновую кислоту и вступают в конкурентные замещения ее в фосфолипидах клеточных мембран в цикло- и липоксигеназном путях метаболизма, т.е синтезе эйкозаноидов из ω-6 и ω-3 ПНЖК. Функциональные свойства эйкозаноидов, синтезируемых из ω-6 и ω-3 – противоположны. Если из арахидоновой кислоты образуются медиаторы воспаления, то эйкозаноиды, синтезируемые из ω-3 ПНЖК, обладают противовоспалительным и антитромботическим действием, в противоположность метаболитам из арахидоновой кислоты [8].

Исходя из наших данных, в условиях ГВИ образование эйкозаноидов будет происходить из арахидоновой, а не из эйкозапентановой в связи с низким содержанием последней  [4]. Поэтому в данных условиях повышение содержания арахидоновой кислоты в тканях плаценты рожениц будет неблагоприятным фактором, так как из нее образуются биологически активные вещества, обладающие провоспалительными свойствами, в отличие от эйкозаноидов, синтезируемых из ω-3 эйкозапентаеновой кислоты.

Таким образом, результаты проведенного исследования свидетельствуют о влиянии ГВИ на липидную составляющую мембран плаценты. Осложнение беременности герпесом сопровождается гидролизом фосфолипидов с образованием ω-6 линолевой и арахидоновой кислот. Патологические изменения, происходящие в мембранах плацент беременных с герпесом в сторону  накопления арахидоновой кислоты, могут приводить к синтезу провоспалительных эйкозаноидов, глубоким нарушениям мембранных структур, менять нормальное течение беременности, стать причиной патологических отклонений в жизнедеятельности плода, внутриутробной гипоксии, а в последующем новорожденного ребенка. Поэтому лечение беременных данной патологии будет более успешным, если в комплекс медикаментозной терапии включать препараты, содержащие ω-3 ПНЖК, обладающие провоспалительными свойствами.

Литература

1.                           Афонина Г.Б., Куюн Л.А. Липиды, свободные радикалы, иммунный ответ. Изд-во НАН, Киев.- 2000.- 285 с.

2.                            Горожанская Э.Г. Свободнорадикальное окисление и механизмы антиоксидантной защиты в нормальной клетке и при опухолевых заболеваниях // Клин. лаб. диагностика. - 2010.- № 6.- С. 28 - 44.

3.                           Друккер Н.А., Погорелова Т.Н. Жирно-кислотный состав фосфолипидов мембран плаценты у женщин с гипофункцией яичников в анамнезе // Вопр. мед. химии. - 1996. - Т. 42, Вып. 1.- с. 54 - 58.

4.                           Ишутина Н.А. Взаимосвязь изменения ω-3 и ω-6 ПНЖК при беременности, осложненной ГВИ // Фунд. исследования. - 2010. - № 10. - С. 55 - 62.

5.                           Карлова Е.А., Брюзгина Т.С., Гирина О.Н. Жирно-кислотный состав липидов плазмы и эритроцитов у пациентов с метаболическим синдромом // Клин. лаб. диагностика. - 2009. - № 8.- С. 12 -15.

6.                           Конь И.Я., Шилина Н.М., Вольфсон С.Б. Омега-3 ПНЖК в профилактике  и лечении болезней детей и взрослых // Леч. врач. 2006. - № 4. - С. 55 - 59. 

7.                           Павлович С.В. Патогенетическое обоснование применения ω-3 ПНЖК при осложненном течении беременности  // Акуш. и гин. 1998. - № 1. - С. 48 - 52.

8.                           Сидельникова В.М. Применение ω-3 ПНЖК для профилактики и комплексного лечения тромбофилических нарушений при беременности // Рус. мед. журнал. - 2008. - Т. 16, № 6.- С. 1 - 6.

9.                           Титов В.Н. Диагностическое значение определения содержания фосфолипазы А₂  в липопротеидах плазмы крови и функциональные связи с С-реактивным белком // Клин. лаб. диагностика. - 2010. - № 8.- С. 3 -16.

10.                        Carren J.P., Dubacy J.P-J. Adaptation of a micro-seale metod to the micro-seale for fatty acid methyl trausestenif: cation of biological lipid extracts // Chromatography. -  1978. -  № 151. - P. 384 -390.

11.                        Dutta-Roy A.K. Transport mechanisms for long-chain polyunsaturated fatty acid in the human placenta // Am. J. Clin. Nutr. - 2000. - Vol. 71, № 1. - P. 315 - 322.

12.                        Dutta-Roy A.K. Fetal growth and development: roles of fatty acid transport proteins and nuclear transcription factors in human placenta // In. J. Exp Biology. - 2004. - Vol. 42, № 8. - P. 747 - 757.

13.                        Folch J., Lees M A simple metod for the isolation and purification of total lipids from animals tissues // Biol. Chem. - 1957. - № 226. - P. 497 -509.

14.                        Haggarty P. Placental regulation of fatty acid delivery and its effect on fetal growth: a review // Placenta. - 2002.  - № 23. - P. 28 - 38.

15.                        Haggarty P. Effect of placental function on fatty acid requirements during // Am. J. Clin. Nutr. - 2004. - Vol. 58. - P. 1559 - 1570.

16.     Effects of fish oil supplementation in the third trimester of pregnancy on prostacyclin and thromboxane production / J. D. Sorensen, S.F. Olsen, A.K. Pedersen [et al.] // J. Obstet. Gynecol. - 1993. - Vol. 168, P. 915 - 922.