Исследования последних лет показали, что высокоинтенсивный свет может служить фактором внешней среды ускоряющим дегенерацию сетчатой оболочки глаза человека и животных [1,2]. Целью настоящего исследования стало изучение характера и динамики изменений нейросенсорных клеток сетчатки при световом воздействии различной экспозиции.
Методика исследования. Эксперименты проведены на 35 беспородных половозрелых белых крысах обоего пола. Животных подвергали равномерному облучению в течение 2, 7, 14, 30 сут люминесцентными лампами ЛБ-40, имеющими максимум излучения в фиолетовой и зеленой областях спектра. Освещенность крыс составила 3500 лк. В качестве контроля использовали интактных крыс (n=10), содержавшихся в условиях искусственного светового режима 12 ч день, 12 ч ночь с интенсивностью дневного освещения 25 лк. Для световой микроскопии заднюю стенку глаза фиксировали в жидкости Карнуа. На поперечных срезах толщиной 5-7 мкм, окрашенных гематоксилином и эозином, с помощью окулярной измерительной сетки Автандилова определяли удельную площадь слоев сетчатки. Для этого вычисляли соотношение числа точек, приходящихся на каждый слой, к общему количеству точек, приходящихся на сетчатку в целом. Для ультраструктурного анализа центральные участки задней стенки глаза фиксировали в 2,5% глютаральдегиде на какодилатном буфере (рН - 7,4). Материал постфиксировали в 2% растворе четырехокиси осмия и заливали в эпон. На полутонких срезах, окрашенных толуидиновым синим, производили подсчет нейросенсорных клеток с деструкцией (пикноз, рексис, лизис) ядра на 1000 фоторецепторов с каждой сетчатки. Определяли число слоев и количество ядер в наружном ядерном слое. Для оценки достоверности различий при сравнении средних величин применяли критерий Манна-Уитни. Различия считались достоверными при р-уровне < 0,05.
Результаты исследования. После 48 часового светового воздействия в клетках пигментного эпителия наблюдали увеличение базальной складчатости, гипертрофию апикальных отростков. В фотосенсорном слое -пузырьковидную дегенерацию мембран наружных сегментов. Часть ядер нейросенсорных клеток подвергалась кариопикнозу, кариорексису или кариолизису. Содержание деструктивно измененных ядер фоторецепторов достигало 7,7±1,4% и оставалось на этом уровне через 7, 14 30 сут облучения.
После недели светового облучения наблюдается сужение, а местами отсутствие слоев образованных нейросенсорными клетками. Так на одних участках (50,11±7,32% длины срезов сетчатки), фотосенсорный слой отсутствовал, на других - был заполнен вакуолями с гомогенным содержимым, а его толщина уменьшалась в 1,5 раза по сравнению с контролем. По сравнению с контролем на 50% наблюдалось уменьшение удельной площади наружного ядерного слоя и на 75% популяции нейросенсорных клеток.
После 2-х недель облучения на подавляющем большинстве участков (90,32±7,63% длины срезов сетчатки) фотосенсорный слой отсутствовал, а ядра наружного ядерного слоя располагаются в 3,4±0,51 ряда (контроль 16±2,12). Его удельная площадь составила 7±0,032% (контроль 25±0,57%), а популяция нейросенсорных клеток уменьшилась более чем на 90% по сравнению с контролем. Нейроны внутреннего ядерного слоя вплотную приближены к наружному ядерному слою вследствие исчезновения наружного плексиморфного слоя.
После 1 мес. облучения слои, образованные нейросенсорными клетками практически отсутствовали, а единичные сохранившиеся ядра нейросенсорных клеток располагались в прослойках осмиофильной радиальной глии, содержащей миелинподобные и мультивезикулярные тельца. Обнаруживались участки сетчатки, на которых отсутствовал пигментный эпителий. Внутренний ядерный слой при этом контактировал с базальным комплексом.
Таким образом длительное световое облучение вызывало развитие выраженных деструктивных изменений в сетчатке глаза и выпадение слоев, образованных нейросенсорными клетками. Фотоповреждение приводит к необратимой прогрессирующей гибели фоторецепторов, о чем свидетельствовало снижение числа рядов, толщины и популяции ядер наружного ядерного слоя.