|
Иркутский институт химии им. А.Е. Фаворского СО РАН Эта работа опубликована в сборнике научных трудов «Актуальные проблемы биологии, медицины и экологии» (2004 год, выпуск 1), под редакцией проф., д.м.н. Ильинских Н.Н. Посмотреть титульный лист сборника
Тромбоэмболии являются осложнениями многих заболеваний и хирургических вмешательств, нередко приводящих к летальному исходу. Их профилактика и лечение являются одной из важнейших проблем современной медицины. На сегодняшний день при данной патологии в практической медицине используется преимущественно гепарин и его производные. Однако производство гепарина является очень трудоемким и дорогостоящим. Кроме того, опасность кровотечений исключает широкое использование многочисленных положительных свойств этого препарата, сопутствующих антикоагулянтной активности (антитромботическое, противоаллергическое, активация липолиза и др.). Поэтому разработка препаратов узкого спектра терапевтического действия является актуальной проблемой фармацевтической науки. На сегодняшний день известно, что антикоагулянтными свойствами в большей или меньшей степени обладают различные сульфатированные полисахариды как природного (хондроитинсульфаты, другие сульфатированные гликозаминогликаны), так и синтетического (сульфаты декстрана, сульфаты хитозана и т.д.) происхождения [1].
В нашей работе по изучению антикоагулянтной активности (in vitro) использованы сульфатированные производные арабиногалактана (АГ), являющегося основной частью водорастворимых полисахаридов древесины лиственницы сибирской (Larix sibirica Ledeb.), где его содержание колеблется в пределах 10-15 % [2]. Эти производные получены при помощи разных сульфатирующих агентов в результате варьирования времени и температурных режимов реакции. Количественное содержание серы в исследуемых образцах составляет от 2.26 до 4.78 %.
Исследование антикоагулянтного действия сульфатированных производных АГ проводилось на бедной тромбоцитами человеческой донорской плазме при помощи методик изучения коагуляционного гемостаза [3, с.75-82]. При этом изучаемые производные были взяты в дозах 10 мг/мл. Именно в этой концентрации они проявили гепариноподобную активность, исследованную в опытах in vitro по реакции метахромазии с 0.02 % раствором толуидинового синего по методу MacIntosh [4]. Полученные экспериментальные данные по метахроматической и антикоагулянтной активности сульфатированных производных АГ были сопоставлены с данными, полученными для гепарина (5000 ЕД/мл, Московский эндокринный завод), использованного в концентрации 200 ЕД/мл. Результаты экспериментов обработаны методом вариационной статистики и приведены в таблице.
Таблица Антикоагулянтная активность сульфатированных производных арабиногалактана в опытах in vitro (M ±m) | Соединение | Метахро-матическая активность, % | Протромбиновое время, с. | Тромбиновое время, с. | Активированное парциальное тромбопластиновое время (АПТВ), с. | | Контроль | - | 16 ± 0.5 | 15 ± 0.8 | 40 ± 2.1 | | Гепарин | 100 | 45 ± 3.5 | -٭ | 132 ± 25.3 | | АГ с S=2.26 % | 57.13 | 17 ± 1.8 | 16 ± 1.1 | 48 ± 3.6 | | АГ с S=2.29 % | 63.27 | 19 ± 1.5 | 17 ± 1.5 | 49 ± 2.4 | | АГ с S=2.55 % | 72.39 | 20 ± 2.2 | 40 ± 0.1 | 61 ± 5.9 | | АГ с S=4.78 % | 100 | 25 ± 1.6 | -٭ | 180 ± 36.2 | Примечание: -* – отсутствие свертываемости более 5 мин.; различия между контролем и опытами статистически достоверны (Р ≤ 0.05). Как видно из данных таблицы, наибольший интерес представляет сульфатированное производное АГ с количественным содержанием серы 4.78 %. Оно достоверно проявляет выраженное антикоагулянтное действие по всем тестам, в то время как другие производные мало активны. Следовательно, данное соединение представляет большой практический интерес как перспективное антикоагулянтное средство, сопоставимое по активности с гепарином.
Таким образом, в результате проведенных экспериментов была изучена антикоагулянтная активность (in vitro) сульфатированных производных АГ с различной степенью замещения макромолекулы биополимера. Наиболее перспективным соединением для дальнейшего изучения является сульфатированное производное АГ с количественным содержанием серы 4.78 %.
ЛИТЕРАТУРА
1. Розкин М.Я., Левина М.Н., Ефимов В.С., Усов А.И. // Фармакол. и токсикол. 1988. № 4. С. 63-68.
2. Антонова Г.Ф., Тюкавкина Н.А. // Химия древесины. 1983. № 2. С.89-96.
3. Баркаган З.С., Момот А.П. Основы диагностики нарушений гемостаза. – М: Ньюдиамед-АО, 1999. - 224 стр.
4. MacIntosh F.C. // Biochem. J. 1941. Vol. 35. P. 776-782.
|
