Ставропольский государственный университет

Эта работа опубликована в сборнике научных трудов «Естествознание и гуманизм» (2005 год, Том 2, выпуск 4), под редакцией проф., д.б.н. Ильинских Н.Н. Посмотреть титульный лист сборника

Процесс приобретения организмом повышенной чувствительности к тому или иному аллергену носит название сенсибилизации. В литературе имеются многочисленные разноречивые данные о методах и путях сенсибилизации. Так, одни считают, что в отличие от иммунизации сенсибилизацию можно получить при воздействии минимальных количеств сенсибилизирующего чужеродного белка. Другие для получения достаточно выраженной сенсибилизации применяют не минимальные, а значительно большие дозы аллергена. Дозы аллергена различны для разных животных, и их величина зависит от способа и пути сенсибилизации животного.
R. Weil (1917) комбинировал подкожный метод сенсибилизации с внутривенным. Подобным образом Н.Н. Сиротинин (1947) сенсибилизировал кошек, африканских хорьков, волков, медведей, лисиц. H. Zinsser (1931) сенсибилизировал обезьян многократными внутривенными введениями небольших количеств яичного белка. Сенсибилизацию собак проводили путем подкожного однократного или двукратного введения в количестве 0,2-0,5 мл на 1 кг массы животного (цит. по А.Д. Адо, 1978).
Особо стоит вопрос о способах сенсибилизации мышей и крыс. Долгое время считалось, что белые мыши и особенно крысы при любых способах сенсибилизации сравнительно устойчивы к развитию повышенной чувствительности. W.H. Manwaring (1921) рекомендовал сенсибилизировать крыс такими же методами, как и кроликов. O. Schiemann, H. Meyer (1926) сенсибилизировали крыс повторными внутривенными инъекциями лошадиной сыворотки по 0,3-0,5 мл. H. Ritz (1911), Д.Е. Зибицкер (1950) и другие авторы применяли пятикратное подкожное введение 0,3-0,5 мл лошадиной сыворотки с промежутками 3-5 дней. Т.Ф. Янченко (1950) сенсибилизировала мышей тремя внутривенными введениями 0,2 мл сыворотки с промежутками в 2 дня. Сенсибилизация крыс всеми указанными выше методами не давала хороших результатов. Разрабатывались методы введения сенсибилизирующих доз крысам вместе с проводником Фрейнда (парафиновое масло, убитые туберкулезные микобактерии и ланолин).
Сравнивалась и изучалась эффективность различных путей введения антигена при активной сенсибилизации. Н.Н. Сиротинин (1934) указывает следующие способы активной сенсибилизации: 1) подкожный, 2) внутрибрюшинный, 3) внутривенный, 4) внутрисердечный, 5) субдуральный, 6) в спинномозговой канал, 7) внутрикожный или накожный, 8) роговичный или внутриглазной, 9) вагинальный, 10) ингаляционный, 11) энтеральный – через рот или прямую кишку. Н.Н. Сиротинин показал, что первые пять способов дают одинаковые результаты. Внутрибрюшинный способ применяется при введении больших доз антигена для сенсибилизации мышей и крыс. К остальным методам прибегают лишь в специальных целях. А.Е. Вершигора считает, что для получения сенсибилизации замедленного типа наиболее эффективно внутрикожное введение антигена. Внутримышечное менее эффективно, а при внутривенном – реакции не возникают вовсе.
Учитывая такое множество противоречивых взглядов на данную проблему, мы не смогли остановиться ни на одном из предложенных в литературных источниках варианте. При формировании экспериментальной модели сенсибилизации в качестве антигена нами использовался амброзийный аллерген, так как среди разнообразных этиологических факторов, вызывающих поллинозы в Ставропольском крае, значительное место занимает пыльца амброзии и изучение данной проблемы очень актуально. Объектом исследования являлись крысы. В возникновении гиперчувствительности замедленного типа важную роль играют липопротеины кожи, что и обуславливает, по-видимому, большую эффективность подкожного введения антигена. Поэтому амброзийный аллерген животным мы вводили подкожно. Опираясь на данные, заимствованные у F. Gay (1935), по сенсибилизирующим дозам, числу введений и интервалам в днях были сформированы экспериментальные группы, представленные в таблице 1.
У 60% животных первой группы через 7-10 дней после последнего введения антигена появились ярко выраженные признаки проявления аллергической реакции у крыс: затрудненное дыхание, цианоз мордочки, покраснение и шелушение кожи ушей.

У 76% крыс шестой группы, которым вводился антиген вместе с адъювантом Фрейнда, наблюдалось нарушение общего состояния в виде снижения активности, покраснения, припухлости поверхности кожи, сопровождающееся выпадением шерстяного покрова. На наш взгляд, это обусловлено тем, что адъюванты способствуют получению высоких титров антител и интенсивной реакции гиперчувствительности замедленного типа.
Однако при последующем иммунологическом исследовании по выявлению специфического иммуноглобулина Е положительная реакция отмечена у 38% крыс первой группы и у 22,5% шестой. Лишь 2% первой и 1,5% шестой группы животных оказались не сенсибилизированы.
У животных остальных групп видимых изменений не наблюдалось.
Таким образом, клиническая картина проявления аллергической реакции наиболее выраженной была в первой и шестой группе. Подводя итоги, можно предположить, что для получения экспериментальной модели сенсибилизации в условиях конкретной лаборатории (влажность, температура, освещенность, питание) наиболее эффективны небольшие дозы антигена, получаемые организмом с небольшим интервалом времени при многочисленном введении. Подтверждена эффективность использования при формировании реакции гиперчувствительности замедленного типа адъюванта Фрейнда.