Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Эта работа опубликована в сборнике научных трудов «Актуальные проблемы биологии, медицины и экологии» (2004 год, выпуск 1), под редакцией проф., д.м.н. Ильинских Н.Н. Посмотреть титульный лист сборника Ряд авторов [1,2] указывали на лизирующее вещество неизвестной природы в организме блох, вызывающем бактерицидное действие на чумной микроб Yersinia pestis EV. К настоящему времени исследователи пришли к общему мнению о том, что таким веществом в организме блох является лизоцим [3]. Лизоцим обнаружили в организме имаго и личинок блох. Нами [4] показано, что виды блох различаются по степени активности бактерицидного действия на грамположительные бактерии. У одних видов (активных переносчиков чумы) она проявляется только при групповом исследовании имаго, у других – не переносчиков обнаруживается даже при исследовании отдельных особей. При этом установлена гетерогенность популяции блох по лизоцимной активности. А.Н.Алексеев и др., [5] считают, что наличие лизоцима в кишечнике у блох способствует их освобождению от чумного микроба. Целью настоящего исследования является изучение количественного содержания лизоцима в организме имаго блох грызунов. Материалы и методы В работе использованы 5-дневные непитавшиеся блохи 10 видов: Ctenophthalmus orientalis Wagn., 1898; Ct. wagneri Tiflov, 1927; Ct.secundus Wagn., 1916; Ct.golovi Ioff et Tifl., 1930; Frontopsylla luculenta J. et R., 1923; Nosopsyllus consimilis Wagn., 1898; N.mokrzeckyi Wagn., 1916; N. fasciatus Bosc, 1801; Citellophylus tesquorum Ioff, 1936; Xenopsylla cheopis Roths., 1903. На твердую питательную среду (агар Хоттингера) в чашках Петри, засеянных индикаторной культурой M.lysodeikticus 2665 после суточного роста, бактериальной петлей наносили эмульсию, приготовленную в капле физиологического раствора из 1 особи при индивидуальном исследовании и из 50 особей при групповом исследовании. Контролем служили посевы индикаторного штамма бактерий, на которые наносили петлей лизоцим куринного белка в разных разведениях. Учет результатов проводили через 24 часа после содержания посевов в термостате при температуре 370С на основе сравнительных показателей лизоцима. Результаты и обсуждения Установлено, что для блох характерным является разное количественное содержание лизоцима в организме в зависимости от их видовой принадлежности (табл.). У видов блох, являющихся активными переносчиками чумы, количественное содержание лизоцима удается выявить только при приготовлении эмульсии из 50, или 100 особей имаго блох. В расчете на одну блоху это составляет тысячные доли мкг. Мы склонны считать, что для таких видов характерно низкое содержание лизоцима, но очевидно есть особи в популяции с более высоким его содержанием. В то же время у видов блох, которые принято считать неспособными передавать чуму, среднии показатели количественного содержания лизоцима в организме одной особи блох на порядок выше. Основываясь на полученных нами результатах и на данных других авторов [3] о зависимости блокообразования и способности передавать чуму от количественного содержания эритроцитов, поглощаемые блохами при питании, мы считаем, что лизоцим является одним из активных факторов, определяющих особенности взаимоотношения блох с возбудителем чумы. На наш взгляд, этим определяется различие видов и популяций блох по их способности передавать чуму.
Таблица Количественные показатели содержания лизоцима у имаго блох грызунов Вид блох | При индивид. исследовании | При групповом исследовании | Всего исс-но блох | С положит. рез-татом | Среднее кол-во лизоцима в 1 блохе, в мкг | Всего исс-но блох | Всего проб | С положит. рез-татом | Среднее кол-во лизоцима в пробе, мкг | Ct.wagneri | 50 | 12 | 0,06 | Не исследовали | Ct.golovi | 50 | 6 | 0,08 | - // - | Ct.secundus | 50 | 1 | 0,07 | - // - | Ct.orientalis | 50 | отр. | - | 200х | 4 | 2 | 0,3 | N.consimilis | 50 | отр. | - | 200 | 4 | 4 | 0,35 | N.fasciatus | 50 | -//- | - | 200 | 4 | 4 | 0,25 | N.mokrzeckyi | 50 | -//- | - | 200хх | 2 | 1 | 0,5 | F.luculenta | 50 | -//- | - | 200 | 4 | 3 | 0,7 | C.tesquorum | 50 | -//- | - | 200хх | 2 | 2 | 0,5 | X.cheopis | 50 | -//- | - | 200 | 4 | 3 | 0,2 | | | | | | | | | | Примечание: х - в пробе из 50 особей блох, хх – в пробе из 100 особей. Литература: 1. Соколова Н.М. Выделение от эктопаразитов лизирующего вещества, симулирующего чумной бактериофаг// Труды института “Микроб”.-1959.-вып.3.-С.93-97. 2. Кондрашкина К.И., Кураев И.И., Захарова Г.А. Некоторые вопросы взаимоадаптации чумного микроба с организмом блох// Паразитология.-1968.-Т.2, №6.-С.543-547. 3. Козлов М.П., Савельев В.Н., Надеина В.П. О природе бактерицидных факторов у личинок и имаго блох// Проблемы особо опасных инфекций.-1977.-вып.2. – С.52-55. 4. Сахно Н.В., Чумакова И.В. Сравнительное изучение лизоцимной активности у блох разных видов как неспецифического иммунитета // Фауна Ставрополья.- 2003.-вып.11.-С.105-108. 5. Алексеев А.Н., Бибикова В.А., Хрусцелевская Н.М. Некоторые доказательства существования бактерицидного фактора в организме кровососов на примере блох-переносчиков чумы// Паразитология. – 1969.-Т.3, №3. – С.228-235.
|