|
Эта работа опубликована в сборнике статей с материалами трудов 1-ой
международной телеконференции "Проблемы и перспективы современной
медицины, биологии и экологии". Название сборника "Фундаментальные
науки и практика Том 1, №1"
Посмотреть обложку сборника
Скачать информацию о сборнике (в архиве: обложка, тит. лист, оглавление, список авторов)
ФГОУ ВПО
«Пермская ГСХА»
Анизакидоз, вызванный личинками
нематод семейства Anisakidae, является опасным для здоровья человека заболеванием
[1;2]. В целях профилактики заражения в замороженной рыбе и других
гидробионтах допускается наличие только нежизнеспособных паразитов [5]. В настоящее время
установлено цитопатическое и кариопатическое действие соматических и
метаболических продуктов многих паразитов на клетки хозяина [3;4;7;8]. Установлено, что соматический экстракт из личинок Anisakis
simplex также способен вызывать патологию деления клеток красного
костного мозга лабораторных мышей при внутрибрюшинном введении [6]. Целью
работы стало установить влияние данного экстракта на состояние мегакариоцитов
костного мозга.
Материалы и методы.
Материалом для эксперимента служили нежизнеспособные личинки A. simplex,
выделенные из замороженной путассу. Извлеченных личинок многократно промывали и
обрабатывали растворами антибиотиков (пенициллин, стрептомицин и нистатин) для
предотвращения роста микрофлоры. После многократного замораживания и оттаивания личинок измельчали
ножницами, гомогенизировали, заливали стерильным забуференным физиологическим
раствором (рН 7,2) и экстрагировали при температуре +4ОС в течение
18 часов.
Проводили однократное внутрибрюшинное введение приготовленного
белкового экстракта самцам белых лабораторных мышей массой 18-22г в дозе 100
мкг белка на животное. Контрольной группе вводили 0,1мл стерильного физиологического
раствора. Убой мышей проводили через 4; 12; 24; 48 и 72 часа после введения
биоматериала. Готовили мазки-отпечатки красного костного мозга из грудины,
которые фиксировали раствором Май-Грюнвальда. Окрашивание мазков проводили
азур-эозином по-Романовскому. При микроскопировании определяли митотический
индекс (%), учитывали форму, размеры и окраску ядер. Отмечали состояние
мегакариоцитов в опытных и контрольных группах животных.
Результаты. Общее состояние контрольных и
опытных животных оставалось удовлетворительным на протяжении всего периода
эксперимента. Увеличение митотического индекса в костном мозге отмечали уже с 4
часа (таблица). Через 12 часов этот показатель снижался, но к 48 часам достигал
максимального значения, после чего к 72 часам этот показатель снизился в два
раза, однако оставался в 7 раз выше
контрольного значения. Наиболее часто отмечали такую форму патологии как
многополюсный митоз.
Таблица
Частота
кариопатических последствий в костном мозге мышей
после
введения антигена-экстракта личинок анизакид
|
Показатель
|
Контроль
|
Группы
мышей после введения антигена, ч
|
|
4
|
12
|
24
|
48
|
72
|
|
Митотический индекс (%)
|
0,12
|
0,40
|
0,20
|
0,50
|
1,71
|
0,70
|
|
Патологии митоза (%)
|
0
|
0,20
|
0,66
|
0,84
|
1,0
|
0,40
|
|
Соотношение фаз ПМ/АТ
|
-
|
0,33
|
5,0
|
0,63
|
4,0
|
0,2
|
|
Мегакариоциты (%)
|
0,13
|
0,20
|
0,50
|
0,25
|
0,20
|
0,20
|
Примечание: %
- от общего количества клеток; Р ≤ 0,01
Наибольшее количество делящихся многоядерных
мегакариоцитов (рис.) отмечали в группах мышей через 12 и 24 часа.
Рис. Мегакариоцит. Окраска
азур-эозином. Увел. 10Х40.
Таким образом, белковый экстракт из
нежизнеспособных личинок анизакид оказывает выраженное антимитотическое
действие на клетки красного костного мозга мышей, в том числе и его
тромбоцитарного ростка. Следовательно, продукты метаболизма A.simplex потенциально могут повышать свертываемость крови
лабораторных животных.
Литература.
1. Горохов, В.В. Анизакиоз –
сложная экологическая проблема/ В.В. Горохов //Ветеринария. – 1999.- №5. –
С.7-14.
2. Довгалев, А.С. Рыбы как
переносчики болезней человека и животных./ А.С. Довгалев, В.П. Сергиев, И.М.
Коваленко и др. //Рыб. Хоз-во. Сер.:Аквакультура: Информпакет. – 1999. – Вып.1.
– С.14-33.
3. Ильинских И.Н., Новицкий В.В.,
Ильинских Е.Н., Ильинских Н.Н., Ткаченко С.Б. Инфекционная кариопатология/ Под
ред. Н.Н. Ильинских.- Томск: Изд-во Том. ун-та, 2005.-168с.: ил.
4. Калинин Л.В. Влияние трихинеллезной
инвазии и метаболитов трихинелл на хромосомный аппарат соматических клеток
хозяина// Автореф. дисс. канд. мед. наук. - Витебск.-1995. - 19с.
5. Поздняковский, В.М. Экспертиза
рыбы, рыбопродуктов и нерыбных объектов водного промысла. Качество и безопасность./
В.М. Поздняковский, О.А. Рязанова, Т.К. Каленик, В.М. Дацун. - Сибирское
университетское издательство. – Новосибирск. – 2005. – 309с.
6.
Сивкова Т.Н.
Кариопатическое действие соматического экстракта из личинок анизакид на клетки
красного костного мозга мышей. / Т.Н.Сивкова // Труды VI Международной научно-практической
конференции «Паразитарные болезни человека, животных и растений». - Витебск. –
2008. - С.220-222.
7. Herrera L.A., Ramirez T., Rodriguez U. et al. Possible association
between Taenia solium cysticercosis and cancer: increased frequency of DNA
damage in peripheral lymphocytes from neurocysticercosis
patients//Trans.R.Soc.Trop.Med.Hyg. – 2000. – Vol.94, N1. – P. 61 – 65.
8. Hirai M., Omoto K., Tanaka H. et al.
Chromosome aberrations in leykocytes of filarial – infected indigenous
inhabitants in the Philippinеs//Jpn.J.Exp.Med. – 1986. – Vol. 56, N6. –
P.285 – 291.
|
