Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск
Кафедра фармацевтической химии, кафедра фармакогнозии с курсами ботаники и экологии.
Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам Международной 68-й научной итоговой студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г.Томск, 20-22 апреля, 2009 год); под реакцией академика РАМН В.В. Новицкого, член. корр. РАМН Л.М. Огородовой
Посмотреть титульный лист сборника
Скачать сборник целиком (1,5 мб)
Род «Василек» (Centaurea) насчитывает около 500 видов. Однако на сегодняшний день представители этого рода практически не изучены. Между тем существуют перспективы использования некоторых видов рода в медицине в качестве средств для лечения болезней почек, желудочно-кишечного тракта, сердечно-сосудистой и нервной систем, при новообразованиях, грибковых, паразитарных заболеваниях.
Предметом наших исследований стал василек ложнопятнистый – степной европейский вид, вероятнее всего занесенный в Томскую область из Казахстана. Здесь растение хорошо акклиматизировалось и теперь встречается совместно с типичным представителем флоры Сибири – васильком шероховатым. Оба вида проявляют в эксперименте выраженную противоописторхозную активность.
Для выявления диагностических признаков василька ложнопятнистого проведено исследование его анатомического строения в сравнении с васильком шероховатым. Для исследования были взяты стебли, листья, листочки обертки, лепестки венчика. Приготовление и просветление препаратов проводили в соответствии с общепринятыми методиками [1]. Изучение проводилось с помощью светового микроскопа Carl Ziess. В результате проведенных исследований установлено, что общими анатомическими признаками для василька ложнопятнистого и василька шероховатого является наличие трех типов волосков – крупных простых многоклеточных, головчатых изогнутых и сосочковидных с многоклеточным основанием. Для василька ложнопятнистого выявлены следующие отличительные диагностические особенности:
1. В эпидермисе, верхнем и нижнем, многочисленные широко-раскрытые глубокопогруженные устьица. Тип устьичного аппарата аномоцитный (4-6 клеток эпидермиса). Выражена радиальная складчатость кутикулы.
2. В большом количестве и на нижнем, и на верхнем эпидермисе встречаются шарообразные образования, предположительно железки.
3. Наличие булавовидных железистых волосков в эпидерме лепестков венчиков, не упоминающихся в описаниях других растений рода (в том числе и в C. сyanus).
Нами проведен обзорный сравнительный анализ выхода экстрактивных веществ различными растворителями (водой, 20, 40, 70, 96% этиловым спиртом, ацетоном, 50% ацетоном, метанолом и хлороформом) после настаивания при комнатной температуре (2сут), затем после экстракции в течение одного часа при температуре кипения растворителя.
В результате в качестве экстрагентов, способствующих наиболее полному извлечению экстрактивных веществ, можно считать воду очищенную, 20, 40, 70 % этанол и 50% ацетон.
Исследование качественного химического состава надземной части василька ложнопятнистого проводили с использованием общепринятых методик фитохимического анализа, методов хроматографии на бумаге и в тонком слое сорбента, метода ВЭЖХ, ИК-спектроскопии. При этом были обнаружены следующие группы биологически активных веществ (БАВ): флавоноиды (апигенин, рутин, кверцетин), кумарины (умбелиферон), дубильные вещества, фенолкарбоновые кислоты (кофейная, феруловая), полисахариды, сесквитерпеновые лактоны (гроссгемин, цинаропикрин, кницин), сапонины, каротиноиды и экдистероиды, не обнаружены алкалоиды и иридоиды.
Для изучения полисахаридов (ПС) использовали методику фракционного выделения, с помощью которой полисахаридные комплексы были разделены на фракции, содержащие водорастворимые полисахариды, извлекаемые последовательно экстракцией холодной и горячей водой (ВРПС1 и ВРПС), выход фракций составил 1,45% и 3,27% от воздушно-сухого сырья соответственно, пектиновые вещества (ПВ – 3,46%), гемицеллюлозы А и Б (ГМ А – 2,35% и ГМ Б – 8,01%). Соотношение выходов фракций составляет: ВРПС1: ВРПС2: ПВ: ГМ А: ГЦ Б=1:2,3:2,4:1,6:5,5.
Количественное определение ВРПС и ПВ проводили гравиметрическим [2] и спектрофотометрическим методом, основанным на измерении оптической плотности продуктов реакции ПС с антронсерным реактивом [3]. Для выбора стандарта были сняты 2 спектра поглощения продуктов реакции глюкозы и ПС василька ложнопятнистого с антронсерным реактивом в одних и тех же условиях: оба спектра имеют выраженные максимумы поглощения при длине волны 620 нм. Вычисление процентного содержания ВРПС проводили по градуировочному графику (4,9±0,4%). Количественное содержание ВРПС и ПВ, определённое гравиметрическим методом, составляет 3,3±0,5% и 15,0±0,4% соответственно.
Кроме этого нами было проведено количественное определение дубильных веществ и флавоноидов. Количественное содержание суммы дубильных веществ определяли методом перманганатометрии по Лёвенталю [2]. Содержание дубильных веществ составило 2,8±0,8% в пересчёте на танин. Определение количественного содержания флавоноидов проводили спектрофотометрическим методом с использованием ГСО рутина и комплексообразующей реакции с алюминия хлоридом [2]. Содержание флавоноидов в 40% и 70%-ных водно-спиртовых экстрактах в пересчёте на рутин составило 5,5±% и 6,6±0,4% соответственно.
Выводы:
1. Проведён микроскопический анализ надземной части василька ложнопятнистого и выявлены диагностические признаки.
2. Впервые проведено качественное и количественное исследования полисахаридного комплекса. Фракционный анализ показал наличие значительных количеств всех фракций ПС.
3. Проведено качественное и количественное исследование некоторых групп фенольных соединений (флавоноидов, дубильных веществ).
Список литературы:
1. Государственная фармакопея СССР: Вып. 1. Общие методы анализа / МЗ СССР. – 11-е изд. – М. : Медицина, 1987. – 337 с.
2. Государственная Фармакопея СССР. Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье / МЗ СССР. – 11 - е изд., доп. – М. : Медицина, 1990. – 400 с.
3. Сафонов, М. Ю. Спектрофотометрический метод определения содержания полисахаридов в слоевищах Cetraria islandica (L.) ACH / М. Ю. Сафонов, Е. И. Саканян, Е. Е. Лесиовская // Раст. ресурсы. – 1999. – Т. 35, № 2. – С. 101-105.
