Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам 70-й Юбилейной итоговой научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г. Томск, 16-18 мая 2011 г.), под ред. В. В. Новицкого, Л. М. Огородовой. − Томск: Сибирский государственный медицинский университет, 2011. − 430 с.

 

Скачать сборник (формат MS Word, 7,3 мб)

Посмотреть основную информацию о сборнике, обложку и т.д.

 

Актуальность: борьба с онкологической патологией является одной из наиболее актуаль-ных проблем медицины. Колоректальный рак занимает 3 место среди причин смерти от зло-качественных новообразований, причем прослеживается стойкая тенденция к росту частоты развития опухолей данной локализации. [1] Важную роль в процессах онкогенеза играют  протеасомы, осуществляющие деградацию белков в клетке. Выделяют 26 и  20 S пулы про-теасом. 26S пул осуществляет регуляцию основных процессов в клетке: пролиферацию, апоптоз и др. 20S  протеасомы расщепляют аномальные белки и биологически активные пептиды. [2]

Цель: изучение активности протеасом и их субъединичного состава при колоректальном раке.

Материалы и методы: в исследование были включены 15 больных колоректальным раком (средний возраст 58,0±11,9 лет), проходивших комбинированное лечение в НИИ онкологии СО РАМН (г.Томск). Материалом исследования являлась опухолевая ткань и визуально не-изменная ткань, находящаяся  на расстоянии не менее 2 см от границы опухолей. Тотальная активность протеасом определялась  по гидролизу флуорогенного олигопептида Suc-LLVY-AMC. [3] Разделение протеасом на пулы проводилось методом фракционирования в два этапа: добавлением сульфата аммония до 40% насыщения (26S-протеасом), до 70% насыщения (20S-протеасом).[4] Субъединичный состав протеасом исследовали методом Вестерн блоттинга. Плотность полос определяли с помощью стандартной компьютерной программы Im-age J. Результаты выражали в процентах от содержания субъединиц протеасом в неизмененной ткани. Статистическую обработку осуществляли с помощью пакета прикладных про-грамм SPSS Statistics 17.0.

Результаты: было установлено, что тотальная активность протеасом в опухолевой ткани была в 1,9 раза выше, чем в неизмененной ткани, а активность 26S и 20S  пулов выше соот-ветственно  в 1,5 и 2,0 раза. Полученные результаты указывают на факт увеличения активности протеасомной системы при развитии колоректального рака, что связано с усилением процессов деградации белков в онкогенезе. При исследовании субъединичного состава протеасом в опухолевой ткани установлено снижение содержания α1α2α3α5α6α7 субъединиц на 37%. Содержание иммунных субъединиц LMP2 повышалось на 133,4%, LMP7 - на 97,5%, PA28β - на 73,6%. Следовательно, в процессе онкогенеза происходит замена конститутивных протеасом на иммунные, что сопровождается изменением их ферментативной активности.

При проведении корреляционного анализа выявлено, что размер опухоли (T по классификации TNM) связан с тотальной активностью протеасом в неизмененной ткани (R=0,53, p=0,04). Эти данные можно объяснить тем, что под влиянием митогенных сигналов из опухоли окружающая ткань изменяет свои молекулярно-генетические характеристики. Была установлена обратная корреляционная зависимость между степенью дифференцировки опухолевых клеток и содержанием LMP7 субъединиц протеасом (R=-0,78, р=0,005).

Таким образом, в ходе исследования установлено увеличение активности протеасом и их пулов и изменение субъединичного состава протеасом при колоректальном раке. Обнаружена связь активности протеасом с размером опухоли, что имеет важное практическое значение и требует дальнейшего изучения.