Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт
Эта работа опубликована в сборнике научных трудов «Естествознание и гуманизм» (2006 год, Том 3, выпуск 1), под редакцией проф., д.б.н. Ильинских Н.Н. Посмотреть титульный лист сборника
Важным противоэпидемическим звеном в борьбе с сибирской язвой принадлежит иммунопрофилактике, для которой на территории России применяют живые вакцины, в частности для иммунизации людей - вакцину СТИ. При существенном осложнении эпизоотолого-эпидемиологической ситуации по данному заболеванию или при возможном использовании спор сибиреязвенного микроба в качестве агента биотерроризма оптимальной схемой является экстренная профилактика антибиотиками в сочетании с вакциной. Однако к важным недостаткам живых вакцин относится невозможность их одновременного введения с антибиотиками. Это послужило основанием к разработке в Ставропольском научно-исследовательском противочумном институте вакцины СТИ-ПР с устойчивостью к β-лактамным антибиотикам и рифампицину (Буравцева Н.П. с соавт., 1987).
Целью настоящего исследования явилось изучение стабильности сохранения устойчивости вакцины СТИ-ПР к антибиотикам после длительного хранения.
Чувствительность сибиреязвенного микроба к антибиотикам определяли методом серийных разведений препаратов на плотной питательной среде (Навашин С.М., Фомина И.П., 1971) и диско-диффузионным методом (ДДМ). В первом случае использовали агар Хоттингера (рН 7,2-7,4), в который добавляли соответствующие антибиотики. В качестве посевного материала служила споровая взвесь вакцины СТИ-ПР, которую наносили на агар с помощью репликатора. Минимальную ингибирующую концентрацию антибиотиков учитывали после инкубации культур при 37 ºС в течение 18-20 ч. При исследовании ДДМ применяли коммерческие диски, выпускаемые НИЦФ (г. Санкт-Петербург). После посева чашки с дисками антибиотиков выдерживали 30 мин при комнатной температуре, а затем их помещали в термостат при температуре 37 0С на 20 ч. Учет результатов реакции проводили по таблицам, приведённым в “Инструкции по определению чувствительности возбудителей опасных инфекционных заболеваний к антибиотикам и химиопрепаратам” (1990), и содержащим пограничные значения диаметров зон задержки роста для чувствительных, умеренно устойчивых и для устойчивых к антибиотику штаммов.
Нами была проверена 21 серия вакцины СТИ-ПР после длительного хранения (более 20 лет). В результате исследований ДДМ установлено, что все изученные серии вакцины СТИ-ПР сохранили устойчивость к антибиотикам пенициллинового ряда (бензилпенициллину, ампициллину, оксациллину, карбенициллину, азлоциллину) и рифампицину. Дополнительно к этому была выявлена устойчивость к антибиотикам цефалоспоринового ряда (цефоклораму, цефазолину, цефалотину). Вакцина была умеренно устойчива к цефалексину, эритромицину, олеандомицину, линкомицину, левомицетину и ванкомицину. Чувствительность была выявлена к цефокситиму, гентамицину, канамицину, неомицину, тобрамицину, сизомицину, амикацину, тетрациклину, доксициклину, ципрофлоксацину, офлоксацину.
При изучении устойчивости вакцины СТИ-ПР методом серийных разведений установлено, что к бензилпенициллину она сохранилась на высоком уровне и колебалась в пределах 20000 ед/мл – 2500 ед/мл. Высокая устойчивость сохранилась и к другим антибиотикам: ампициллину оксациллину, метициллину (10000-2500 мкг/мл) и рифампицину (1000-250 мкг/мл). В схему исследований дополнительно введен карбенициллин, к которому ранее устойчивость не проверялась. Все серии вакцины оказались высоко устойчивыми к этому препарату (10000- 2500 мкг/мл.)
Таким образом, впервые выявлена устойчивость данной вакцины к карбенициллину. При изучении чувствительности антибиотикоустойчивой сибиреязвенной вакцины СТИ-ПР экспериментально подтверждено, что ее устойчивость к бензилпенициллину, ампициллину оксациллину, метициллину и рифампицину в процессе длительного хранения (более 20 лет) не изменилась, что обусловлено хромосомной детерминацией данного признака.