Известно, что 15-20% всех распознаваемых беременностей у человека сопровождаются гибелью эмбрионов в I триместре беременности. Среди причин, вызывающих эмбриональную летальность, важную роль играют генетические факторы - около половины спонтанных абортусов имеют аномалии хромосомного набора [3]. И все же приблизительно в 40% случаев причина эмбриональной гибели остается не установленной [1]. Вероятно, часть из них может определяться нарушениями импринтированных районов генома, и этот вопрос является в настоящее время предметом интенсивных исследований.
Геномный импринтинг (ГИ) - эпигенетический процесс, дифференциально маркирующий материнские и отцовские гомологичные хромосомы путем модификации ДНК, не затрагивающей ее первичную нуклеотидную последовательность. В результате это приводит к выключению экспрессии одного из двух родительских аллельных генов и к разному фенотипическому проявлению мутаций, унаследованных от матери или отца. У человека и мыши уже идентифицировано более 40 импринтированных генов, значительная часть которых играет важную роль не только в обеспечении нормального эмбрионального и постнатального развития, но и контролирует интеллектуальные, психические и поведенческие функции.
Одним из механизмов, приводящих к изменению эффекта ГИ, является однородительская дисомия (ОРД) - явление наследования пары гомологичных хромосом от одного из родителей. В ходе картирования геномов человека и мыши, а также при исследовании ОРД и их фенотипических эффектов у обоих объектов были обнаружены импринтированные гены с высокой степенью гомологии между ними. У человека на хромосоме 15 врайоне 15q11-q13 расположен ген SNRPN, сходный с ним ген Snrpn у мыши идентифицирован на хромосоме 7. Этот ген отвечает за синтез полипептида N малого ядерного рибонуклеопротеида и экспрессируется только с отцовского аллеля. Кроме того, в 5D - конце гена расположен центр импринтинга, осуществляющий контроль над кластером импринтированных генов в области 15q11-q13. В экспериментах на мышах было показано, что ОРД по некоторым хромосомам набора сопровождаются летальностью эмбрионов на ранних этапах развития. В частности, ОРД как материнского, так и отцовского происхождения по хромосоме 7 ассоциированы с гибелью зародышей на ранних сроках эмбриогенеза [2].
К другим механизмам изменения эффекта ГИ, не связанным с аномалиями сегрегации хромосом, относятся явления потери импринтинга (восстановление биаллельной экспрессии импринтированных генов) и гиперметилирование промоторных областей импринтированных генов. Подобные ситуации могут возникать и при ОРД, вовлекающей транскрипционно активные или неактивные гомологи хромосом, соответственно. Вклад изменений статуса метилирования импринтированных генов в этиологию ранней эмбриональной гибели человека в настоящее время не установлен, но, учитывая фенотипическое проявление ОРД в раннем эмбриогенезе млекопитающих, можно предположить, что подобные нарушения могут быть ассоциированы с аномальным течением эмбрионального развития.
В настоящее время проводится исследование, целью которого является анализ изменений статуса метилирования промоторного региона гена SNRPN, как одной из причин ранней эмбриональной гибели у человека. Сформированы выборки спонтанных (20 образцов) и медицинских (контрольная -6 образцов) абортусов человека с нормальным кариотипом и средним сроком прерывания беременности на 8,0±0,3 и 7,8±0,4 неделях, соответственно.
ДНК выделяли из цитотрофобласта хориона и экстраэмбриональной мезодермы с последующей обработкой бисульфитом натрия, амплификацией методом метил-специфической ПЦР [4] и визуализацией результатов в 3% агарозном геле в ультрафиолетовом свете.
При проведении данного исследования не обнаружено ни одного случая нарушения импринтинга гена SNRPN среди спонтанных абортусов, по сравнению с контролем. И, соответственно, не выявлено различий в статусе метилирования данного гена в производных различных зародышевых листков. Вероятно, данное явление не вносит заметного вклада в гибель кариотипически нормальных зародышей человека в период с 6 по 10 недели развития. Однако для решения вопроса о наличии внутриутробного отбора при нарушении ГИ у человека необходимо дальнейшее накопление материала на более значительных по объему выборках спонтанных абортусов.