Гипертрофия миокарда - неспецифический адаптивный ответ сердца на действие многих стимулов (перегрузку давлением или объемом, патологию клапанов, мутации в генах сократительных белков и т.д.). В тоже время гипертрофия миокарда левого желудочка (ГЛЖ) является независимым фактором риска сердечно¬сосудистых осложнений и смертности. Степень ГЛЖ не всегда зависит мощности действующего стимула (тяжести гипертонии), а во многом определяется генетической предрасположенностью (~45%). Наследственно обусловленный дисбаланс в функционировании нейрогуморальных систем организма (в том числе ренин-ангиотензиновой) может вызывать неадекватное увеличение массы миокарда.
Гены компонентов ренин-ангиотензиновой системы подверглись наиболее тщательному исследованию в отношении связи с сердечно-сосудистыми заболеваниями. Предпосылкой к этому послужило открытие в начале 90-х полиморфного A/u-элемента, тесно связанного с уровнями циркулирующего ангиотензин I-превращающего фермента, что обеспечило появление удобного генетического маркера. В результате многочисленных исследований для I/D полиморфизма гена ACE была показана ассоциация со многими фенотипами сердечно-сосудистого континуума. Тем не менее, существует множество работ, где был получен отрицательный результат, а крупные мета-исследования, выполненные в последние годы, не смогли убедительно доказать взаимосвязи I/D полиморфизма с давлением крови, риском инфаркта миокарда, ишемической болезнью сердца [1]. Противоречивые данные могут быть связаны с тем, что этот полиморфизм не обладает сам по себе функциональной значимостью, но находится в неравновесии по сцеплению с другими важными вариантами гена. Активно проводятся исследования по поиску таких полиморфизмов. Несколько исследований [2, 3] одновременно пришли к выводу о наличии, по меньшей мере, двух функциональных полиморфизмов - в 3' и 5' областях гена.
В задачи исследования входило изучение ассоциации полиморфизмов A-240T в промоторе и A2350G в 17 экзоне гена ангиотензин I-превращающего фермента (АСЕ) (нумерация по Villard E. et al, 1996, [2]) c фактом наличия ГЛЖ при эссенциальной гипертонии (ЭГ) и эхокардиографическими характеристиками гипертрофии ЛЖ у больных с ЭГ и гипертрофической кардиомиопатией (ГКМП).
Материалы и методы
Исследование проведено на 128 пациентах с ЭГ, 31 - с ГКМП, контрольная группа состояла из 122 здоровых в отношении сердечно-сосудистой системы индивидов. Пациенты с ЭГ и ГКМП были обследованы на базе НИИ кардиологии ТНЦ СО РАМН и до проведения обследования не принимали кардиотропных препаратов. Эхокардиографическое исследование проводили на ультразвуковом сканере "Acuson" 128/ХР10 (США). Массу миокарда левого желудочка (ММЛЖ, г) определяли по критериям PENN и формуле Devereux с соавт. [4]; индекс массы миокарда левого желудочка (ИММЛЖ, г/м2) рассчитывали как отношение ММЛЖ к площади тела пациента. Индекс гипертрофии миокарда левого желудочка (индекс ремоделирования левого желудочка) ИГЛЖ рассчитывался по формуле: сумма толщины межжелудочковой перегородки и задней стенке левого желудочка разделенные на значение конечно-диастолического размера. Факт наличия или отсутствия ГЛЖ оценивали на основании ИММЛЖ >134 г/м2 у мужчин и >110 г/м2 у женщин.
ДНК выделяли из лейкоцитов периферической крови стандартным методом. Амплифицировали посредством ПЦР интересующие фрагменты гена АСЕ с использованием праймеров, описанных [1], определение генотипов по исследуемым полиморфизмам осуществляли посредством рестрикционного анализа (Xba I - полиморфизм А-240Т и BstFN I - A2350G, производства НПО "СибЭнзим", г. Новосибирск). Электрофоретическое разделение продуктов гидролиза проводили в 8% полиакриламидном геле. Статистическая обработка включала тест на равновесие Харди-Вайнберга, сравнение частот генотипов и аллелей у больных с наличием и отсутствием ГЛЖ при ЭГ, линейно-регрессионный и корреляционный анализ зависимости ЭхоКГ показателей от пола, возраста индивидов, индекса массы тела и др., однофакторный дисперсионный анализ, тест Манна-Уитни.
Результаты и обсуждение
Во всех обследованных группах распределение генотипов изученных локусов соответствовало ожидаемому при равновесии Харди-Вайнберга. Частоты аллелей полиморфизма в 17 экзоне составили 0,459/0,541 (А и G, соответственно) в группе контроля; 0,407/0,593 - у больных с ГЛЖ при ЭГ; 0,564/0,436 - у пациентов с ЭГ без ГЛЖ; 0,483/0,527 - у больных с ГКМП. Частоты аллелей А и Т полиморфизма А-240Т были в изученных выборках следующими: 0,623/0,377 - в контрольной группе; 0,538/0,462 - у больных с ГЛЖ при ЭГ; 0,689/0,311 - у больных с ЭГ без ГЛЖ и 0,625/0,375 - у пациентов с ГКМП. Частоты аллелей 2350G и -240Т были достоверно выше в подвыборке больных с ГЛЖ при эссенциальной гипертонии, по сравнению с больными без ГЛЖ (p<0,05).
Однофакторный дисперсионный анализ выявил ассоциацию полиморфизма А-240Т в промоторе гена с такими показателями гипертрофии миокарда ЛЖ, как масса миокарда левого желудочка (ММЛЖ, г), индекс ММЛЖ (ИММЛЖ, г/м2) и индекс гипертрофии ЛЖ (ИГЛЖ) (см. табл. 1), а также толщиной стенок (данные не приведены). Пациенты с генотипом ТТ характеризовались значительно большими значениями индекса ММЛЖ (и других ЭхоКГ характеристик), чем гомозиготы АА, а гетерозиготы имели промежуточные величины показателей.
В отношении полиморфизма А2350G, также выявлено отличие средних значений таких показателей, как ИММЛЖ и ММЛЖ в подгруппах пациентов с ЭГ, в зависимости от генопа по данному локусу: GG>AG>AA. Полученные данные свидетельствуют о том, что оба изученных полиморфизма вносят вклад в формирование ГЛЖ при эссенциальной гипертонии.