Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, Новосибирск
Эта работа опубликована в сборнике научных трудов «Естествознание и гуманизм» (2007 год, Том 4, выпуск 3), под редакцией проф., д.б.н. Ильинских Н.Н.
Посмотреть титульный лист сборника
Скачать сборник целиком (13 мб)
Характер эпидемиологической ситуации в отношении воспалительных заболеваний, различной этиологии, определяет актуальность изучения особенностей формирования и функционирования многоядерных макрофагов, участвующих в образовании очагов хронического воспаления [2; 3; 4].
Выделение клеточных территорий в многоядерных макрофагах может рассматриваться как явление внутриклеточной дезинтеграции полинуклеара, направленное на отделение безъядерного или ядросодержащего фрагмента. В основе данного процесса лежит полимеризация и деполимеризация белков цитоскелета, в результате чего происходит изменение конфигурации цитоплазматической мембраны и наблюдается образование светлых щелей между плотными участками цитоплазмы, содержащими ядро и другие внутриклеточные органеллы [1]. Известно, что клеточная территория или ядерно-цитоплазматический участок может обособляться из многоядерной структуры, с образованием отдельных клеток [1]. Процессом, противоположным указанному, следует считать феномен интеграции внутриклеточных структур.
Целью исследования являлось уточнение роли процессов внутриклеточной интеграции и дезинтеграции в формировании многоядерных макрофагов в культурах генетически различных перитонеальных клеток. Задачи исследования состояли в определении численности полинуклеарных макрофагов с морфологическими признаками отмеченных процессов.
К признакам внутриклеточной дезинтеграции (выделения клеточных территорий) относили: оппозитное расположение ядра с участком эндоплазмы относительно других ядер и наличие между более темными участками эндоплазмы светлых промежутков, часто содержащих мелкие секреторные вакуоли. Морфологическим отражением внутриклеточной интеграции считали присутствие комплекса органелл, который визуализировался в виде более плотного участка цитоплазмы, имеющего центральную локализацию и наличие ядер расположенных по периферии клетки.
Клетки выделяли из брюшной полости мышей линий C57BL/6 и CBA. В соответствии с генетической принадлежностью клеток были сформированы две группы культур. Концентрация посадки составляла 1000 тыс. перитонеальных клеток в 1 мл взвеси. Результаты оценивали на 48, 72, 96 и 120 часов инкубации.
Было выделено три морфологических типа клеток: полинуклеарные макрофаги с признаками внутриклеточной интеграции (с ядрами локализующимися по периферии цитоплазмы и центрально расположенным плотным участком эндоплазмы), дезинтеграции (с выделением клеточных территорий) и не имеющие четких признаков, указывающих на эти процессы.
Единичные многоядерные макрофаги, в которых наблюдался начальный этап выделения клеточных территорий, появлялись на 96 и 120 часов инкубации в культурах клеток, полученных от животных линий C57BL/6 и CBA, при этом достоверные межгрупповые различия отсутствовали. Возможно, при увеличении времени экспозиции количество данных клеток имело бы тенденцию к возрастанию, что позволило бы определить достоверные различия между используемыми в эксперименте группами культур.
В культурах группы C57BL/6 не отмечали достоверных изменений показателя встречаемости клеток с признаками внутриклеточной интеграции в зависимости от сроков инкубации. В культурах группы СВА на поздних сроках экспозиции (через 96 и 120 часов) наблюдали тенденцию к уменьшению численности многоядерных макрофагов с морфологическими проявлениями процесса внутриклеточной интеграции. Было установлено, что количество полинуклеарных макрофагов, имевших указанные признаки, в культурах группы СВА было на 33,6 % и на 32,3 % больше, чем в культурах группы C57BL/6, соответственно на 48 и 72 часа инкубации. При увеличении времени экспозиции достоверных межгрупповых различий не наблюдали.
Таким образом, на ранних сроках инкубации процессы внутриклеточной интеграции в культурах группы СВА протекали активнее, чем в культурах группы C57BL/6. В культурах группы C57BL/6 активность внутриклеточной интеграции не зависела от сроков инкубации. При увеличении времени экспозиции встречались единичные многоядерные макрофаги с признаками внутриклеточной дезинтеграции в культурах перитонеальных клеток, полученных от животных обеих линий.
Биологический смысл выделения клеточных территорий может заключаться в удалении из клетки поврежденных структур, или в разделении крупного полинуклеара на несколько мелких, что позволяет оптимизировать течение внутриклеточных процессов. Объединение внутриклеточных структур свидетельствует о дифференцировки многоядерного макрофага. Несомненно, что каждый из этих феноменов является следствием протекания компенсаторно-приспособительных процессов, направленных на адекватное функционирования клеток в зависимости от конкретных условий их существования.
Список литературы:
1. Клишов А.А. Краткий цитологический словарь. - Медицина- 1968. - 118 с.
2. James S.J., Pogribna M., Miller B.J., Bolon B., Muskhelishvili L. Characterization of cellular response to silicone implants in rats: implications for foreign-body carcinogenesis // Biomaterials. - 1997. - V. 18. - № 9. - Р. 667-675.
3. Krayenbuhl B.H., Panizzon R.G. Silicone granuloma // Dermatology. - 2000. - V. 200. - № 4. - Р. 360-362.
4. Mustafa T., Bjune T.G., Jonsson R., Pando R.H., Nilsen R. Increased expression of fas ligand in human tuberculosis and leprosy lesions: a potential novel mechanism of immune evasion in mycobacterial infection // Scand. J. Immunol. - 2001. - V. 54. - № 6. - Р. 630-639.
|