|
ГОУ ВПО СибГМУ Росздрава (г. Томск)
Эта работа опубликована в сборнике "Науки о человеке": материалы Х конгресса молодых ученых и специалистов / Под ред. Л.М.
Огородовой, Л.В. Капилевича. – Томск: СибГМУ. – 2009. – 166 с.
Скачать сборник целиком
В соответствии с современными представлениями о патогенезе туберкулеза процессы внутриклеточного метаболизма, митохондриальные, тиоловые и кальций-зависимые механизмы участвуют в реакциях апоптоза, приводящих к развитию остропрогрессирующих форм микобактериальной инфекции. При воспалении, вызванном микобактериями туберкулеза (МБТ), апоптоз может усиливать и (или) ослаблять воспалительные реакции, а также способствовать внутриклеточной персистенции МБТ [2]. В комплексе методов современной терапии туберкулеза ведущее положение занимает комбинированная этиотропная химиотерапия, при этом рифампицин является одним из основных и наиболее эффективным лекарственным средством [3]. Однако, антибиотики, избирательно поражая M. tuberculosis, способны оказывать в той или иной степени выраженное иммуносупрессорное действие, которое ограничивает возможности организма в борьбе с инфекцией [1].
Цель исследования: оценить влияние рифампицина на уровень апоптоза лимфоцитов периферической крови у больных туберкулезом легких и у здоровых доноров.
Материалы и методы. В ходе работы было обследовано 10 больных с впервые выявленным лекарственно-чувствительным инфильтративным туберкулезом легких (ЛЧТЛ) в возрасте от 18 до 55 лет. Диагноз туберкулеза легких устанавливали на основании данных микроскопии мокроты и рентгенологического исследования легких. Обследование проводили до начала лечения. Контрольную группу составили 10 практически здоровых доноров с сопоставимыми характеристиками по полу и возрасту.
Материалом для исследования служила венозная кровь, взятая из локтевой вены в объеме 10 мл утром до приема пищи. Выделение лимфоцитов из цельной крови осуществляли методом градиентного центрифугирования (р=1,077). Изучение влияния рифампицина на апоптоз лимфоцитов периферической крови осуществляли путем добавления препарата в дозе 10 мкг/мл в питательную среду. Культивирование лимфоцитов в полной среде RPMI-1640 (спонтанный апоптоз) и в присутствии ри-фампицина (индуцированный апоптоз) проводили в течение 20 ч. Уровень апоптоза лимфоцитов оценивали по количеству CD95 -и аннексин-презентирующих клеток. Статистическая обработка результатов проводилась с использованием непараметрических критериев Вилкоксона и Манна-Уитни в программе Statistica 6.0.
Результаты и обсуждение. В ходе проведенного исследования спонтанный уровень CD95+-лимфоцитов у больных инфильтративным туберкулезом значимо не отличался от такового у здоровых доноров (табл.1). При этом исходное количество апоптозных лимфоцитов у больных ЛЧТЛ в 2 раза превышало спонтанный уровень в группе сравнения. После инкубации с рифампицином среднее количество CD95 - и annexin V-презентирующих лимфоцитов увеличилось в 2,0 и 1,6 раза соответственно относительно исходного уровня в обеих группах обследованных. Однако у больных ЛЧТЛ количество клеток, вступивших в апоптоз при действии рифампицина было в 2,2 раза больше, чем у здоровых доноров (табл.1). Это свидетельствует о большей чувствительности лимфоцитов больных туберкулезом легких к экзогенным воздействиям, и, возможно, является одним из механизмов формирования вторичной иммунной недостаточности, опосредованной лекарственным воздействием. При этом индукция апоптоза, вероятно, происходит в том числе за счет стимуляции образования активных форм кислорода под влиянием рифампицина.
|
Таблица 1
Относительное количество CD95+ и апоптозных лимфоцитов в периферической
крови у здоровых доноров
и у больных туберкулезом легких, Х±m
|
| Группы обследованных |
CD 95+-лимфоциты,
% |
Количество annexin V-презентирующих лимфоцитов,
% |
| Спонтанный
уровень |
Индуцирован -ный рифампицином |
Спонтан-ный уровень |
Индуцирован-ный рифампици-ном |
| Здоровые доноры |
25,93±5,25 |
52,84±8,3 р1<0,05 |
8,85±1,09 |
14,40±1,02 р1<0,05 |
| Больные
туберкулезом легких |
33,05±4,04 |
57,95±6,21 р1<0,05 |
17,60±4,82 р2<0,05 |
31,46±7,02 р1<0,05 р2<0,05 |
Примечание: р1- уровень статистической значимости различий по сравнению со спонтанными показателями,
р2 - по сравнению со здоровыми донорами
Заключение. Таким образом, на основании результатов исследования можно утверждать, что ри-фампицин является индуктором апоптоза лимфоцитов, что подтверждается увеличением количества клеток, предуготовленных к апоптозу (CD95+), и вступивших в раннюю фазу клеточной гибели (annexin V+).
Список литературы:
1. Александрова, А.Е. Иммунотропная активность противомикробных средств, используемых во фтизиатрии / А.Е. Александрова, Т.И. Виноградова // Клиническая фарм. и терапия - 1998. - №4. - С. 43-45.
2. Лазаренко, Л. Цитофлавин - препарат патогенетической терапии туберкулеза легких / Л. Ла-заренко, В. Шкурупий, А. Коваленко и др. // Врач. - 2007, №10. - С. 43-46
3. Мишин, В. Ю. Химиотерапия туберкулеза легких / В. Ю. Мишин // Пульмонология. - 2008, №3. - С. 5-14.
|
