Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам 70-й Юбилейной итоговой научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г. Томск, 16-18 мая 2011 г.), под ред. В. В. Новицкого, Л. М. Огородовой. − Томск: Сибирский государственный медицинский университет, 2011. − 430 с.

 

Скачать сборник (формат MS Word, 7,3 мб)

Посмотреть основную информацию о сборнике, обложку и т.д.

 

Актуальность: в основе ведущих метаболических процессов, протекающих в человеческом организме, лежат окислительно-восстановительные реакции, среди которых особую роль играют процессы свободнорадикального окисления. Основные радикалы, образующиеся в клетках – это радикалы кислорода (супероксид и гидроксильный радикал, перекись водорода, оксид азота (II)) [1, 2]. Чрезмерная активация свободнорадикальных процессов влечет за собой каскад негативных реакций и патологических процессов, лежащих в основе ряда заболеваний, таких как атеросклероз, ишемическая болезнь сердца, артериальная гипертония  [1, 3]. В связи с этим, актуальным является поиск соединений, обладающих антирадикальной активностью.

Объектом данного исследования являлся оксим пиностробина – оксимированное производное флавоноида пиностробина, выделенного из тополя бальзамического (Populus balsamifera L.). Ранее в экспериментах in vivo показан гепатопротективный эффект оксима пиностробина, который, возможно, обусловлен антирадикальной активностью данного соединения.

Цель: изучение способности оксим пиностробина взаимодействовать с одной из активных форм кислорода – супероксидным анион-радикалом.

Материалы и методы. Взаимодействие оксим пиностробина с супероксидом исследовали в модельной системе, в которой генерация радикала осуществлялась неферментативным способом. При этом электроны с НАДН+Н+  через феназинметасульфат (ФМС) переносятся на молекулярный кислород с образованием супероксида, который восстанавливает нитросиний тетразолий (НСТ) до фармазана, имеющего максимум поглощения при 560 нм [4].

Инкубационная смесь общим объёмом 1 мл содержала 20 мМ КН2РО4 – КОН буфера (рН 7,4), 6 мкМ ФМС, 75 мкМ НАДН, 50 мкМ НСТ. Оксим пиностробина вводили в модельную систему в виде растворов в диметилсульфоксиде в концентрациях 0,36; 0,5; 1,25 2,15 и 2,5 мг/мл. Контрольная проба содержала то же количество ДМСО, что и опытные пробы оксим пиностробина.

В качестве раствора сравнения использовали этанольные растворы кверцетина, конечные концентрации которого  составили 5, 10, 20, 50 мкг/мл. Контрольным раствором служила система с тем же количеством 96% спирта этилового, что и пробы кверцетина.

Антирадикальную активность оценивали по показателю IC50  - концентрации испытуемого вещества, при которой скорость реакции восстановления НСТ уменьшается в два раза [3] .

Результаты. В результате проведенного исследования было показано, что оксим пиностробина способен ингибировать образование супероксид анион-радикала (рис.1).

Рис. 1. Влияние оксим пиностробина и кверцетина на восстановление супероксидным анион-радикалом кислорода НСТ до формазана.

Максимальное ингибирование у оксим пиностробина наблюдали в концентрации 2,5 мг/мл, что соответствует 38,2±0,5%. Ингибирование на 38% супероксид-анион радикала под влиянием кверцетина наблюдали при концентрации 0,013 мг/мл.

Таким образом, антирадикальная активность оксим пиностробина при неферментативной генерации супероксидного анион-радикала примерно в 190 раз уступает активности препарата сравнения – кверцетина.

Выводы: полученные результаты подтвердили способность оксим пиностробина ингибировать супероксидный анион-радикал, что обуславливает один из возможных механизмов  его гепатопротективного действия.