Томский государственный университет, Сибирский государственный медицинский университет (г. Томск)

Эта работа опубликована в сборнике научных трудов «Актуальные проблемы биологии, медицины и экологии» (2004 год, выпуск 1), под редакцией проф., д.м.н. Ильинских Н.Н. Посмотреть титульный лист сборника

Среди методов исследования выявляющих изменения, происходящие в ответ на действие факторов различной природы, особое место занимает гистологический метод. Его использование в комплексе с экологическими исследованиями популяций животных позволяет получить более полное представление о жизнедеятельности популяций и путях адаптации живых организмов [3]. Исследовалось морфофункциональное состояние селезенки красной полевки (Clethrionomys rutilus), на участках, расположенных на территории или испытывающих воздействие [2] со стороны Северного промышленного узла (СПУ): подфакельная зона Томского нефтехимического комбината (ТНХК), участок “РАД” в санитарной зоне Сибирского химического комбината (СХК) и ТНХК, окрестности дд. Георгиевка (Томский р-н), Семеновка (Зырянский р-н), Филимоновка (Асиновский р-н). В качестве контроля рассматривался участок на удалении от крупных промышленных объектов (с. Киреевск Кожевниковский р-н). Селезенки (общее количество исследованных особей – 260) фиксировали в 10% нейтральном формалине. Срезы толщиной 6-8 мкм окрашивали гематоксилином Карачи и эозином по стандартной методике. В основу морфологической оценки был положен гистометрический подход [1]. Изучение проводилось с учетом вида, пола и возраста животных, а также сезона исследования. Для оценки информативности изученных показателей проведен дискриминантный анализ гистологических характеристик селезенки полевок с участков испытывающих разную степень техногенного влияния, показавший в большинстве случаев полное (100%) разделение анализируемых данных (α<0,05) в зависимости от конкретного места обитания с учетом сезона исследования.
Несомненно, наибольшую ценность представляет изучение всего комплекса гистологических показателей, однако более информативными и значимыми оказались показатели, характеризующие толщину капсулы, долю белой пульпы, количество лимфоидных фолликулов и герминативных центров на единицу площади среза, клеточность и количество конгломератов лимфоидных фолликулов, суммарную площадь герминативных центров и процент фолликулов с герминативным центром. Обращает внимание, что два последних показателя несут разную информацию и по своей выраженности могут существенно отличаться, дополняя друг друга.
Сравнительная оценка гистологических показателей селезенки полевок, обитающих на разных участках в зоне техногенного воздействия, показала, что основные отличия между участками отражают неодинаковую степень активации иммунного ответа в организме животных. Количество лимфоидных фолликулов у самцов красной полевки с участка ТНХК было большим, чем у особей из окрестностей д.д. Георгиевка и Филимоновка (t=2,4; α<0,05; t=2,9; α<0,02 соответственно). Также у самцов с участка ТНХК и окрестностей д. Георгиевка, по сравнению с животными из окрестностей д. Филимоновка, наблюдалось увеличение процента лимфоидных фолликулов с герминативными центрами (t=2,9; α<0,01; t=3,3; α<0,01 соответственно). У самок красной полевки (д. Семеновка) доля площади герминативных центров от суммарной площади лимфоидных фолликулов (t=3,5; α<0,003; t=2,9; α<0,01 соответственно), диаметр герминативных центров (t=2,2; α<0,05), количество герминативных центров на единицу площади (t=3,4; α<0,006) и процент фолликулов, имеющих герминативный центр (t=4,3; α=0,004), были больше, чем у полевок из окрестностей д.д. Филимоновка и Георгиевка. Выявленные у самок и самцов красной полевки (дд. Георгиевка и Филимоновка) изменения показателей белой пульпы, в целом, характеризовали подавление иммунных процессов в организме. По сравнению с животными с этих участков более высокие значения показателей, отражающих состояние белой пульпы (особенно герминативных центров) наблюдаемые у полевок особенно в окрестностях д. Семеновка, характеризовали наличие разной степени напряжения компенсаторно-приспособительных процессов.
Возрастные изменения гистологической структуры селезенки у красной полевки на техногенной территории были более выражены. У неполовозрелых самцов красной полевки участка “РАД”, в отличие от контроля, для большинства лимфоидных фолликулов, несмотря на меньшие размеры (t=2,1; α<0,05), было характерно наличие герминативных центров (t=2,1; α<0,05), отмечалось увеличение количества герминативных центров на единицу площади среза (t=2,1; α<0,05) и доли площади герминативных центров от суммарной площади лимфоидных фолликулов (t=2,1; α<0,05). У животных данной группы было обнаружено и большее, чем в контроле, количество мегакариоцитов на единицу площади (t=2,1; α<0,05), выявлена (t=2,1; α<0,05) высокая, не характерная для интактных животных этого возраста, степень «огрубления» стромального компонента (2,2 балла), а у взрослых самцов обнаружено значительное, по сравнению с интактными животными того же возраста, разрежение белой пульпы (0,8% от площади среза), характеризующееся не только меньшим количеством лимфоидных фолликулов на единицу площади среза (t=3,0; α<0,03), но и существенным уменьшением размеров фолликулов (t=2,4; α<0,03). Конгломераты лимфоидных фолликулов у самцов красной полевки с участка “РАД” в отличие от контроля, полностью отсутствовали. У самок данного возраста с участков “РАД”, Георгиевка и ТНХК в селезенках выявлялись лимфоидные фолликулы с герминативными центрами, которые у интактных самок той же возрастной группы не определялись. Также как и у неполовозрелых животных, у взрослых животных обоего пола, обитающих на техногенной территории, наблюдалась более высокая, чем в контроле, степень выраженности стромального компонента селезенки (1,5-2,4 балла).
В целом, обнаруженные изменения отражают наличие разной степени напряжения компенсаторно-приспособительных процессов и наличие интенсивных возрастных перестроек структуры органа, свидетельствующих о преждевременном старении животных на техногенной территории. Приведенные гистологические показатели дают возможность достоверно оценить степень изменчивости морфофункциональных характеристик селезенки в ответ на воздействие внешних факторов. Обнаруженные структурные изменения селезенки у полевок исследуемого вида позволяют расценивать функциональное состояние животных, обитающих на территориях, испытывающих техногенную нагрузку, как неблагоприятное.

Литература
1. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия – М: Медицина, 1990. –384 с.
2. Ильинских Н.Н., Новицкий В.В., Адам А.М., Ильинских Е.Н., и др. Радиационная экогенетика Томской области. – Томск: Изд-во Госкомитета экологии и природных ресурсов Томской области, 1995. – 80 с.
3. Маслова К.И. О роли гистологического метода при проведении радиоэкологических исследований //Методы радиоэкологических исследований/ Под ред. И.Н. Верховской. – М.: Атомиздат, 1971.– С. 155-161