Новосибирский государственный медицинский университет, г. Новосибирск
Кафедра фармакогнозии с курсом ботаники
Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам Международной 67-й научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г.Томск, 2008 год) под редакцией проф. Новицкого В.В. и д.м.н. Огородовой Л.М.
Посмотреть титульный лист сборника
Скачать сборник целиком (1,2 мб)
Среди растений, применяемых в народной медицине
в качестве средств для лечения и профилактики железодефицитной анемии большой
интерес представляют растения – источники микроэлементов и Р-активных
флавоноидов, а так же содержащие биологически-активные вещества с
гормоноподобной активностью. Одним из таких растений, содержащих
гормоноподобное соединение с эстрагенным действием – формононетин [3], является
клевер луговой Trifolium pratense L.
В народной медицине к. луговой применяется при устранении симптомов климактерического
периода, лечении малокровия, легочных, почечных и кожных заболеваний [2].
Помимо T. pratense широко
распространены и другие виды: к. гибридный T.
hybridum, к. посевной T. sativum,
к. люпиновый T. lupinaster, к.
ползучий T. repens и к. горный T. montana.
Целью данной работы является проведение
сравнительного фармакогностического анализа указанных видов рода Trifolium, а так же проведение оценки
фармакологической активности экстракта из надземной части T. pratense.
В качестве объектов исследования были выбраны
трава к. лугового, к. ползучего, к. гибридного, к. посевного, к. люпинового и
к. горного, собранные в окрестностях пос. Горный (Новосибирская обл.), г.
Алейска (Алтайский край), г. Ангарска (Иркутская обл.) в фазе цветения в
2006-2007г.
Определение флавоноидного состава проводилось с
помощью методов тонкослойной хроматографии на пластинах «Силуфол» 10х15см.
Использовались две системы растворителей:
1)Этилацетат: муравьиная кислота: уксусная
кислота: вода (100:11:11:27),
2) Толуол: этилацетат: муравьиная кислота
(70:30:1).
Суммарные извлечения были получены путем
экстракции 70% этанолом в соотношении сырье:экстрагент 1:50. Полученные
извлечения наносились на пластины «Силуфол» и проводилось восходящее
хроматографирование в указанных системах растворителей.
Количественное содержание суммы флавоноидов в
пересчете на рутин определялось спектрофотометрически на спектрофотометре СФ-56
по поглощению УФ-света при λ=410нм по методике [1].
Анализ микроэлементного состава выполнялся
методом масс-спектроскопии с индуктивно связанной плазмой на приборе «ELAN».
Фармакологические исследования проводились на
крысах линии Vistor, у которых вызывалась железодефицитная анемия путем
периодического забора крови из хвостовой вены. ЖДА диагностировалась по уровню
гемоглобина, цветовому показателю и внешним клиническим проявлениям. Подопытные
животные случайным образом разделялись на группы. Контрольная группа лечению не
подвергалась, группе сравнения вводился синтетический препарат – Мальтофер в
форме сиропа, опытной группе – экстракт к. лугового в виде водного раствора.
Экстракт был получен из высушенных соцветий к. лугового путем экстракции 70%
спиртом этиловым, далее суммарное извлечение лиофилизировалось при температуре
30-50 оС.
В результате проведения хроматографического
исследования экстрактов клеверов в системе 1 установлено наличие рутина по
характерному желтому свечению в УФ-свете и УФ-спектру в сравнении со
стандартным образцом рутина. Количественное содержание флавоноидов в пересчете
на рутин варьировало у исследуемых растений незначительно и составило от 3,2±0,3
% для к. ползучего и до 5,2±0,4 % для к. люпинового.
В результате анализа хроматограмм полученных в
системе 2 в извлечении из к. лугового и к. посевного был обнаружен формононетин
(Rf=0,3) по наличию характерного сине-голубого свечения в УФ-свете, при
обработке парами аммиака переходящего в фиолетовое. УФ-спектры элюатов, полученных
из идентифицируемых пятен хроматограмм содержат характерные для формононетина
максимумы поглощения при λ=250 и 305нм. Наличие формононетина в извлечениях из
других исследуемых растений установлено не было.
Таблица. Содержание
некоторых микроэлементов в надземной части клеверов в мкг/г (в пересчете на
абсолютно сухое сырье).
Растение
Элемент
|
T. pratense
|
T. sativum
|
T. hybridum
|
T. repens
|
T. lupinaster
|
T. montana
|
Cr
|
2,1±0,2
|
1,2±0,1
|
2,4±0,2
|
1,6±0.2
|
2,4±0,2
|
2,1±0,1
|
Mn
|
47,0±3,3
|
63,0±4,4
|
182,0±12,7
|
147,0±10,3
|
136,0±10,0
|
94±6,6
|
Fe
|
266,0±13,3
|
172,0±8,6
|
246,0±12,3
|
292,0±14,6
|
223,0±11,2
|
284,0±14,2
|
Co
|
1,0±0,15
|
0,4±0,06
|
1,1±0,17
|
1,1±0,17
|
0,77±0,12
|
0,45±0,07
|
Ni
|
2,0±0,2
|
1,1±0,1
|
3,5±0,4
|
2,0±0,2
|
2,8±0,3
|
5,6±0,6
|
Cu
|
13,0±0,9
|
9,0±0,6
|
9,7±0,7
|
6,3±0,4
|
5,1±0,4
|
12,0±0,8
|
Из приведенной таблицы видно, что
микроэлементный состав данных растений отличается не существенно, за
исключением, более низкого содержания Mn для T. pratense и T. sativum.
В результате фармакологических испытаний было
установлено, что восстановление уровня гемоглобина в опыте можно описать
линейной зависимостью. Скорость восстановления гемоглобина (в г/л в день)
составила 2,5 и 6,7 для контрольной группы и группы сравнения соответственно. У
животных опытной группы показатель составил 5,2.
Полученный результат свидетельствует о том,
что экстракт к.лугового обладает выраженной
противоанемической активностью лишь немного уступающей активности лучшего
лекарственного препарата синтетической природы.
По результатам проделанной работы можно сделать
следующие выводы:
1. Установлено, что
к.луговой обладает противоанемической активностью и препараты к.лугового могут
быть рекомендованы к применению в составе комплексной терапии ЖДА;
2. Показано, что к.луговой
и к.посевной обладают близким химическим составом и можно предположить их
сходную фармакологическую активность;
3. Установлено, что к.
гибридный, к.люпиновый, к.ползучий, к.горный существенно отличаются по
химическому составу от к.лугового и их следует рассматривать как примеси к
к.луговому.
Список литературы:
1. Государственная
фармакопея СССР: Вып.2 Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье/
МЗ СССР. – 11 изд. – М. : Медицина, 1989. – 400 с.
2. Кьосев, П. А. Полный
справочник лекарственных растений / П. А.Кьосев. – М. : ЭКСМО – Пресс, 2000. –
992 с.
3. Харборн, Дж. Б. Введение
в экологическую биохимию // Дж. Б. Харборн; пер. с англ. под ред Б. М.
Граевской. - М. : Мир, 1985. - 311 с.
|