Модель гепатоканцерогенеза крыс и мышей получила широкое распространение для изучения ранних событий в канцерогенном процессе. Это связано с тем, что большинство химических соединений для проявления канцерогенного потенциала требует метаболической активации, которая эффективно происходит в печени благодаря высокому уровню ферментов метаболизма ксенобиотиков.
Ранее нами было показано, что ортоаминоазотолуол (ОАТ) вызывает остановку пролиферации гепатоцитов печени, стимулированной частичной гепатэктомией (ЧГЭ), у линий мышей, чувствительных к данному токсину [2], при введении его до операции. Поскольку у чувствительных к ОАТ линий мышей (A/He) наблюдалось подавление пролиферативной активности, было сделано предположение, что канцероген приводит к остановке пролиферации, вызванной ЧГЭ, в какой-то точке G1-периода.
Материалы и методы. ЧГЭ проводили по методике, описанной в [3]. Двухэтапную нециркуляционную энзиматическую перфузию печени проводили по методу Дудиной-Барковской и Миттельмана [1]. Включившуюся радиоактивность подсчитывали по стандартной методике в толуольном сцинтилляторе на счетчике «Бета-1».
Результаты и их обсуждение. Для проверки выдвинутого предположения канцероген вводили мышам в различное время до и после ЧГЭ. Было получено, что кратковременная экспозиция мышей линий A/He и Balb/c с ОАТ после ЧГЭ не приводит к подавлению пролиферативной активности гепатоцитов in vivo.
Введение мышам ОАТ через 30 мин и 2 ч после ЧГЭ приводило к наиболее выраженной стимуляции пролиферации, тогда как в более поздние сроки после ЧГЭ происходит снижение пролиферативной активности. При введении канцерогена за 1 ч до ЧГЭ наблюдалось снижение пролиферативной активности, что позволило предположить, что ОАТ влияет на события раннего 01-периода, вероятнее всего без активации цитохромами Р450, а через взаимодействие с короткоживущими регуляторными белками.
На следующем этапе по той же схеме были проведены эксперименты с использованием другого гепатотоксина - СС14, обладающего как токсическим, так и гепатотоканцерогенным воздействием на все линии мышей. Было получено, что СС14 не подавляет пролиферацию гепатоцитов, стимулированную ЧГЭ. При введении токсина за 1 ч до ЧГЭ наблюдалось значительное увеличение пролиферативного ответа, тогда как при введении СС14 за 24 ч до ЧГЭ происходило снижение включения 3Н-тимидина. Такая разница в уровнях пролиферативной активности связана прежде всего с наложением митогенного стимула на различные этапы клеточного цикла.
Таким образом, ОАТ и СС14 обладают разным влиянием на пролиферативную активность гепатоцитов, находящихся на различных этапах клеточного цикла. Остается неизученным, с какими факторами молекулярной природы взаимодействует ОАТ на ранних этапах 01-периода.