Эта работа опубликована в сборнике научных трудов «Естествознание и гуманизм» (2006 год, Том 3, выпуск 2), под редакцией проф., д.б.н. Ильинских Н.Н. Посмотреть титульный лист сборника

Стремительное развитие экспериментальной и клинической иммунологии, углубление знаний о патогенезе иммунных нарушений при различных заболеваниях определили необходимость разработки методов иммунокоррекции. В результате, сформировалась особая наука - иммунофармакология, основной задачей которой является разработка фармакологической регуляции нарушенных функций иммунной системы с применением иммуноактивных (иммунотропных) средств. Дейст-вие этих средств направлено на нормализацию функций клеток, участвующих в иммунном ответе. Таким образом, главная цель иммунотерапии - направленное воздействие на способность больного организма к иммунному ответу.
Известно, что уровень иммунологической защиты у животных обеспечивается гуморальными факторами естественной резистентности (комплемент, лизоцим, бета-лизины) и клеточными ферментами. Реактивность иммунитета зависит не только от условий содержания, кормления, но и от эпизоотического благополучия хозяйства.
Необходимость стимулирования иммунной системы возникает при развитии вторичных иммунодефицитов, то есть при снижении функции эффекторных клеток иммунной системы, вызванном опухолевым процессом, инфекционными, ревматическими, бронхолегочными заболеваниями, пиелонефритом, что в итоге приво-дит к хронизации заболевания, развитию толерантной инфекции с резистентностью к антибактериальному лечению.
Перед нами стояла задача, изучить способность иммуномодуляторов восстанавливать или частично корректировать защитные силы организма норок при алеут-ской болезни. В частности, влияние этих лекарственных средств на концентрацию некоторых классов иммуноглобулинов сыворотки крови норок, больных алеут-ской болезнью.
Нами были выбраны тимоген (Тhymogenum) - синтетический аналог препарата из вилочковой железы КРС, относящийся к иммуномодуляторам 2 поколения и представляющий собой аминокислоты - L-глютамил-L-триптофан, и полиоксидоний (Polyoxidonium)-(сополимер N-окиси 1,4 этиленпиперазина и (N-карбоксиэтил)-1,4-этиленпиперазин бромида). Данных о концентрации иммуноглобулинов в крови норок, в норме, при заразных болезнях, а также после иммуно-терапии этими препаратами, в доступной отечественной и зарубежной литературе нами не найдено.
Опыт проводили на норках 9-14 месячного возраста, положительно и отрицательно реагирующих по ИФА на алеутскую болезнь (АБН), принадлежащих ЗАО «Лесные ключи» Ставропольского края. Полиоксидоний применяли больным (положительно по ИФА на АБН) норкам по 0,1-0,15мг/кг на физиологическом рас-творе, а тимоген в виде 0, 01 % продажного раствора, по 0,1-0,15мл, оба препарата вводили внутримышечно. Курс иммунотерапии составил всего 3 инъекции на одну норку, вводили препараты через каждые 3дня.
Отбирали кровь и получали сыворотку на 5,10,15 сутки после последней инъекции препарата, которую исследовали при помощи набора реагентов для опреде-ления концентрации суммарных (общих) иммуноглобулинов А, М, G, Е в сыворотке крови и других биологических жидкостях человека, «ИФА-Бест-стрип» ЗАО «Вектор-Бест» по методике Манчини. Результаты отобразили в таблицах 1 и 2.

Таблица 1

Концентрация иммуноглобулинов А, М, G, Е в сыворотке крови норок положительно и отрицательно реагирующих по ИФА на алеутскую болезнь

Таблица 2

Динамика концентрации иммуноглобулинов А, М, G, Е в сыворотке крови норок

положительно реагирующих по ИФА на АБН, после применения препаратов

тимоген и полиоксидоний

Согласно литературным данным, антитела класса IgA защищают слизистые оболочки (секреторный IgA), нейтрализуют вирусы и бактериальные токсины, сти-мулируют фагоцитоз, обеспечивая тем самым местную резистентность к инфекции. Секреторный IgA преобладает в слюне, слезах, секретах желудка, желчи, во влагалищном секрете и в амниотической жидкости, в содержимом легких, бронхов, мочеполовых путей.
Исследования показали, что у ИФА–позитивных норок концентрация IgA в сыворотке крови была значительно ниже, чем у ИФА- негативных (на 54,2%) и со-ставляла 0,22±0,13 мг/мл, против 0,48±0,15 мг/мл. Мы считаем, что вероятнее всего это повлияет на снижение фагоцитарной и бактерицидной активности лейкоцитов сыворотки крови больных алеутской болезнью норок.
Антитела класса IgМ относятся к «ранним», представляют собой основную массу антител, продуцируемых организмом при инфицировании и вакцинации, об-ладают высокой авидностью, активируют комплемент по классическому пути, защищают организм от вирусов и бактерий, не проходят через плаценту. На каждый «новый» для организма антиген образуются антитела класса IgМ. К 4-6 дню после иммунизации у человека биосинтез антител переключается на IgG.
Иммуноглобулины класса G, в отличие от Ig других классов, способны проникать через плаценту, защищая организм новорожденного от инфекции в первые месяцы жизни. Основная биологическая задача этих полифункциональных белков – защита организма от возбудителей инфекции и продуктов их жизнедеятельно-сти за счет активации комплемента, опсонизации и фагоцитоза.
У положительно реагирующих норок концентрация IgM почти на 40% выше, чем у здоровых. По нашему мнению, это обусловлено тем, что по мере снижения продукции IgG и уменьшение его титра (таблица 1), резко возрастает синтез малоспецифичных IgM, который регулируется только уровнем соответствующего ему по специфичности IgG.
Согласно нашим исследованиям концентрация IgG у норок, отрицательно реагирующих по ИФА, значительно выше (на 65,5%). Мы связываем это с тем, что IgG вырабатывается лишь при обязательном участии Т-лимфоцитов, которые при плазмацитозе норок поражаются и обусловливают патогенез заболевания.
Иммуноглобулин Е не связывает комплемент, не проходит через плаценту; быстро и прочно связывается с тканевыми базофилами и другими «клетками воспа-ления». Доказано, что IgE принимает участие в связывании антигенов на слизистой оболочке.
По нашим данным титр данного иммуноглобулина у больных норок ниже на 21,5%, чем у ИФА-позитивных. Можно предположить, что такие изменения могут вызвать снижение резистентности слизистых оболочек организма. Этот иммуноглобулин действительно участвует в развитии ряда аллергических реакций, но и вместе с тем представляет одну из главных линий защиты именно слизистых оболочек, контактирующих с окружающей средой,- верхних и нижних отделов дыха-тельных путей и кишечника.
Результаты эксперимента, по изучению влияния тимогена и полиоксидония на концентрацию исследуемых иммуноглобулинов, отобразили в таблице 2.
 Из данных таблицы 2 видно, что на 5 сутки после иммунотерапии тимогеном, концентрация IgA увеличилась на 38,8% (0,36±0,11 мг/мл), к 10 суткам была вы-ше на 72,8% (0,81±0,17 мг/мл), чем показатели у ИФА положительных норок до применения препарата, на 15 сутки концентрация IgA незначительно снизилась на 6,7% (0,65±0,19 мг/мл).
На 5 сутки после последней инъекции полиоксидония, концентрация IgA увеличилась на 21,4% (0,28±0,14 мг/мл). На 10 и 15 сутки опыта титр антител был выше, чем у ИФА-позитивных до применения полиоксидония на 29% (0,31±0,07 мг/мл) и 50%(0,44±0,1 мг/мл) соответственно. В результате оказалось, что к 15 суткам у норок, обработанных тимогеном концентрация IgA выше на 16%, чем в группе полиоксидония. Мы считаем, это связано с тем, что тимоген преимущест-венно влияет на реакции клеточного иммунитета, а полиоксидоний оказал положительный эффект и является активным в отношении активации антител IgA.
После применения тимогена концентрация IgM, по сравнению с данными ИФА-позитивных норок, не получавших иммуномодулятор, снизилась на 12,5% (0,41±0,2-0,4±0,19 мг/мл) и оставалась не изменой.
В группе полиоксидония, препарат вызвал снижение концентрации антител класса IgM лишь к 15 суткам опыта на 31,1% (0,31±0,09 мг/мл) в отличие от боль-ных норок, не получавших иммунотропных средств.
Исследования показали, что в группе применения полиоксидония синтез малоспецифичных антител IgM по сравнению с группой тимогена был ниже на 18,6%.
Согласно нашим исследованиям в группе норок, где испытывался тимоген, уровень антител IgG к 5 суткам опыта, увеличился на 34% (0,47±0,1 мг/мл). К 10 суткам был вдвое больше (66% 0,92±0,21), а к 15 суткам превышал на 68%(1,03±0,15 мг/мл) этот показатель у ИФА-позитивных норок, не получавших тимоген.
После применения полиоксидония ИФА-позитивным норкам, произошло увеличение концентрации IgG к 5 и 15 суткам на 3,1%(0,32±0,12 мг/мл) и 31,1% (0,45±0,085 мг/мл) соответственно, но уровень был меньше, чем у ИФА негативных на 50% (таблица1), и ниже на 53,6% этого показателей группы норок, полу-чавших тимоген. По нашему мнению это связанно с тем, что концентрация IgG зависит от активности и уровня специфичности Т-клеток, а тимоген усиливает процессы дифференцировки лимфоидных клеток, индуцируя экспрессию дифференцировочных генов на лимфоцитах, нормализует количество T-хелперов, T-супрессоров и их соотношение.
По данным эксперимента титр IgE в группе норок с применением тимогена на 5 сутки резко увеличился на 70% (1,34±0,23КЕ/л), к 10 суткам на 74% (1,54±0,28 КЕ/л). К 15 суткам опыта концентрация данных антител снизилась, но осталась выше (68% 1,25±0,24КЕ/л).
Иммунокоррекция полиоксидонием стимулировала постепенное увеличение концентрации IgE на 5 (13% 0,46±0,1КЕ/л), 10 (26%0,54±0,19 КЕ/л) и на 15 сутки опыта на 68% (1,25±0,24 КЕ/л).
В ходе проведения эксперимента в хозяйстве наблюдали гибель норок положительно реагирующих на алеутскую болезнь, падежа в контрольных группах и им-муностимулированных не было.
Можно сделать вывод, что оба модулятора обладают выраженным иммунокорректирующим действием, увеличивают резистентность норок при алеутской бо-лезни, снижают смертность среди больных животных. Проведенные исследования показали, что тимоген по сравнению с полиоксидонием, оказался более актив-ным препаратом в отношении концентрации иммуноглобулинов класса А, М, G, Е.
Рекомендуем применять тимоген и полиоксидоний отдельно, в качестве иммуномодуляторов и в сочетании с комплексной антибактериальной терапией