|
ФГБОУ ВПО «Красноярский государственный аграрный университет»(г. Красноярск)
Ньюкаслская болезнь (НБ), псевдочума птиц – высококонтагиозная вирусная инфекция, главным образом куринных, характеризующаяся пневмонией, энцефалитом, множественными точечными кровоизлияниями и поражениями внутренних органов. Возбудителем является РНК-содержащий вирус семейства Paramyxoviridae.
Электронная микроскопия выявляет полиморфные вирионы в виде сферических (преобладающая форма), нитевидных, ракетковидных и палочковидных форм с диаметром 100-200нм внешняя липопротеиновая оболочка их содержит множество отростков длиной 8нм которые отвечают за гемагглютинирующую активность. Вирус агглютинируют эритроциты птиц, амфибий, рептилий, человека, крупного рогатого скота, свиней и лошадей. Вирус устойчив к воздействию неблагоприятных факторов окружающей среды. Низкие температуры его консервируют. В замороженных тушках он выживает до 6 месяцев, а при температуре -20 0С более года. При температуре 65-750С вирус погибает за 30 минут, а при 1000 С за несколько секунд. Дезинфицирующие растворы быстро убивают вирус.
Попав в организм птицы, вирус с током крови разносится ко всем органам и тканям. Стенки кровеносных сосудов делаются порозными, возникают воспалительно-некротические процессы, нарушается кровообращение. В процесс вовлекается сердце, селезенка, печень, почки, желудочно-кишечный тракт, легкие, центральная нервная система. У несушек нарушается секреторная функция яйцеводов (яйца с тонкой скорлупой или без нее). Вирус находится в фекалиях и яйцах.
Диагноз ставят на основании эпизоотологических данных, клинических признаков, патологоанатомических изменений и результатов лабораторных исследований.
Обнаружение вируса биопробой и выделения его проводят на 9-10 дневных куриных эмбрионах (КЭ). В аллантоисной жидкости обнаруживают вирус с помощью реакции гемагглютинации (РГА) с эритроцитами кур. При отсутствии признаков размножения вируса на КЭ проводят не менее трех пассажей. Через 48-72 часа эмбрионы гибнут. В некоторых случаях ставят пробу на неиммунных цыплятах.
Идентификацию вируса НБ и дифференциацию его от вируса гриппа кур, сходного по течению болезни, проводят с помощью реакции торможения гемагглютинации (РТГА).
Целью настоящего исследования явилось экспериментальное заражение куриных эмбрионов вакцинным штаммом вируса болезни Ньюкасла.
10 дневные куриные эмбрионы породы кур хайсекс браун заражали в аллантоисную полость по методу Николау вирусом штамма Ла-Сота (природно ослабленный штамм вируса НБ, который используют в качестве вакцинного). Вводили по 0,2 мл аллантоисной жидкости первого пассажа вируса с титром lg 4 ЭИД 50/мл. Зараженные КЭ инкубировали при температуре 37,5 0С и влажности 60-70%.
Индикацию вируса в зараженных КЭ проводили путем ежедневного овоскопирования (определение жизнеспособности) и в РГА. Титр вируса определяли в РГА выражали в гемагглютинирующих единицах (ГАЕ), а затем переводили в эмбриональные инфекционные дозы (ЭИД 50) из расчета 1 ГАЕ равна 105 ЭИД50/мл.
Зараженные и контрольные эмбрионы культивировали 72 часа и 120 часов, ежедневно проверяя их на жизнеспособность овоскопированием.
Результаты исследования показали, что гибели КЭ в первые трое суток культивирования не наблюдали, а на пятые сутки погибли 2 КЭ. Титр вируса в 5 КЭ с продолжительностью культивирования 72 часа в ЭИД 50/мл, составил: 1 (конроль) - ; 2 – lg 3,2; 3 – lg 3; 4 – lg 2,5; 5 – lg 4.
А титр вируса в пяти КЭ с продолжительностью культивирования 120 часов в ЭИД 50/мл, составил: 6 (контроль) - ; 7 – lg 4; 8 – lg 4,2; 9 – lg 4,3; 10 – lg 4.
Таким образом, максимальное накопление штамма Ла-Сота вируса болезни Ньюкасла при экспериментальном заражении КЭ в аллантоисную полость было отмечено через 120 часов культивирования и титр вируса при этом в среднем составил lg 4,2 ЭИД 50/мл.
|
