|
НИИ кардиологии ТНЦ СО РАМН, Сибирский государственный медицинский университет (г. Томск)
Эта работа опубликована в сборнике "Науки о человеке": материалы VI конгресса молодых ученых и специалистов / Под ред. Л.М. Огородовой, Л.В. Капилевича. – Томск: СибГМУ. – 2005. – 120 с.
Скачать сборник целиком
У здоровых доноров варьирование осмолярности среды инкубации эритроцитов сопровождается изменением калиевой проницаемости мембраны этих клеток, индуцированной кальциевым ионофором А23187 и редокс-агентами (искусственная электронно-донорная система аскорбат-феназинметосульфат) [2]. Кроме того, известно, что Са2+-активируемые калиевые каналы (К+(Са2+)-каналы) эритроцитов регулируются белком мембранного каркаса спектрином [2,3].
Цель работы. Изучить изменение объема эритроцитов при варьировании осмолярности среды инкубации клеток и во время активации К+(Са2+)-каналов.
Материал и метоы. В работе использовалась кровь практически здоровых доноров. Получение суспензии эритроцитов проводили традиционным способом [3]. Изменение объема клеток оценивали спектрофотометрическим методом при длине волны 800 нм.
Результаты. Снижение осмолярности среды инкубации до 220 мосм осуществлялось за счет уменьшения концентрации NaCl, повышение осмолярности до 420 и 520 мосм достигалось добавлением соответствующих концентраций сахарозы к изоосмотическому раствору (320 мосм). Инкубация клеток в гипоосмотической среде приводила к набуханию эритроцитов. Повышение осмолярности среды сопровождалось сжатием эритроцитов.
Стимуляция К+(Са2+)-проницаемости мембраны эритроцитов путем добавления кальциевого ионофора А23187 (0,5 мкМ) или редокс-агентов (искусственная электронно-донорная система аскорбат-феназинметосульфат) [1,2,3]. в обоих случаях сопровождалась уменьшением объема клеток. Причиной этого может быть выход воды из эритроцитов вслед за калием. Следует заметить, что добавление к суспензии эритроцитов 3 мкМ клотримазола (блокатора К+(Са2+)-каналов) не приводит к А23187- индуцированному снижению объема клеток, что указывает на участие К+(Са2+)-каналов в изменениии объема эритроцитов.
Для выяснения роли спектрина в регуляции К+(Са2+)-каналов проводили необратимую тепловую денатурацию спектрина путем инкубации клеток при 50°С в течение 10 мин. При этом добавление кальциевого ионофора А23187 к суспензии эритроцитов также сопровождалось сжатием клеток. Однако как в изоосмотических, так и в гипо- и гиперосмотических условиях сжатие клеток, обусловленное добавлением ионофора, было более выражено по сравнению с таковым у клеток не подвергавшихся тепловой обработке. Это может свидетельствовать об участии спектрина в процессах стабилизации объема эритроцитов.
Литература:
1. Гюльханданян А. В. Са2+- зависимый выход К+ из эритроцитов, индуцированный окислительными процессами / А. В. Гюльханданян,
Г. М. Геокчакян // Биофизика. - 1991. - Т. 36, № 1. - C. 169 - 171.
2. Изучение объем-зависимой регуляции Са2+-активируемых калиевых каналов эритроцитов в норме и у больных сахарным диабетом 2 типа в сочетании с артериальной гипертензией / Кремено С. В., Петрова И. В., Ситожевский А. В. и др. // Бюлл. эксперим. биологии и медицины. - 2004. - Т. 137, № 1. - С. 31-34.
3. Са2+-активируемые калиевые каналы эритроцитов, исследованные методом регистрации Са2+-индуцированных изменений мембранного потенциала / С. Н. Орлов, И. В. Петрова, Н. И. Покудин и др. // Биол. мембраны. - 1992. - Т. 9, № 9. - С. 885 - 903.
|
