Сибирский государственный медицинский университет
ГУ НИИ Медицинской генетики ТНЦ СО РАМН, г. Томск

Тетраплоидия у человека приводит к прерыванию беременности в 40% случаев на преимплантационных этапах и регистрируется у 3-6% спонтанных абортусов I триместра беременности [5]. Новорожденные с тетраплоидным хромосомным набором регистрируются в очень редких случаях и погибают, как правило, в течение первых дней или месяцев после рождения [2]. Чистые формы тетраплоидии среди ранних спонтанных абортусов человека диагностируется лишь в 2% случаев, и зачастую патологический кариотип представлен мозаичным диплоидно-тетраплоидным вариантом [1], что традиционно рассматривается как артефакт, возникающий в результате культивирования клеток в системе in vitro [3]. Однако молекулярно-цитогенетические доказательства данного феномена пока отсутствуют. Кроме того, известно, что полиплоидные клетки являются обязательным элементом плацентарных тканей человека, обеспечивая протекание отдельных этапов их дифференцировки. В связи с этим, особую актуальность приобретает проблема существования некоторого порога клеток с тетраплоидией, превышение которого может иметь летальный эффект. Однако остается не ясной и физиологическая роль полиплоидии. Предполагается, что увеличенная плоидность генома может являться защитой от генотоксических воздействий. С другой стороны, показано, что рост количества аномальных клеток имеет место при стрессе и старении как in vivo, так и in vitro [4], что подтверждает имеющуюся в литературе точку зрения о влиянии процесса культивирования на происхождение и выживание тетраплоидных клеток. Развитие молекулярно-цитогенетических технологий, а именно флюоресцентной in situ гибридизации (FISH), позволит исключить влияние процесса культивирования благодаря анализу интерфазных ядер нативных экстраэмбриональных тканей, то есть еще до введения их в долгосрочные культуры. При обобщении результатов цитогенетического скрининга спонтанных абортусов в Томской популяции, проводимого в лаборатории цитогенетики НИИ медицинской генетики ТНЦ СО РАМН с 1990 г, была зафиксирована необычно высокая частота тетраплоидии (21.7%), существенно превышающая все известные в литературе значения [1]. Одним из объяснений этого яления может быть увеличение количества полиплоидных клеток в ходе культивирования. В связи с этим, целью работы явилось определение закономерностей распространения и фенотипических эффектов тетраплоидных клеток в нативных экстраэмбриональных тканях зародышей человека в I триместре беременности с помощью двухцветного интерфазного FISH-анализа с использованием центромероспецифичных ДНК-зондов. Было проанализировано до 1000 интерфазных ядер цитотрофобласта хориона и экстраэмбриональной мезодермы 14 медицинских абортусов с нормальным кариотипом и 25 спонтанных абортусов с тетраплоидным или диплоидно-тетраплоидным кариотипом, установленным цитогенетически. Спонтанные абортусы по тяжести нарушения эмбрионального развития были разделены на две группы: анэмбрионии и неразвивающиеся беременности. С помощью интерфазного FISH-анализа наличие тетраплоидных клеточных клонов было подтверждено только у 10 спонтанных абортусов (40%). Таким образом, действительно, в ряде случаев полиплоидные клетки появляются в ходе длительного культивирования экстраэмбриональных тканей. У некоторых эмбрионов были выявлены межтканевые отличия по локализации тетраплоидных клеток с преобладанием их в экстраэмбриональной мезодерме. Для 70% абортусов наличие тетраплоидии было подтверждено в обоих типах тканей, что, вероятно, свидетельствует о происхождении аномалии еще на доимплантационном этапе. Преобладание тетраплоидии в экстраэмбриональной мезодерме, по сравнению с цитотрофобластом хориона, в 67% случаев было ассоциировано с анэмбрионией, наиболее тяжелой формой нарушения эмбрионального развития.

Список литературы:
1. Суханова, Н.Н. Структура хромосомных нарушений у 552 спонтанных абортусов Томской популяции / Н.Н. Суханова, И.Н. Лебедев, Т.В. Никитина и др // Медицинская генетика. – 2002. – Т.1, №6. – C.271-276.
2. Gus-Scekic, M. Tetraploidy in 26-month-old girl (cytogenetic and molecular studies) / M. Gus-Scekic, J. Milasin, M. Stevanovic et al. // Clin Genet. – 2002. – Vol.61. – P.62-65.
3. Hunt, P.A. In vitro growth and chromosome constitution of placental cells / P.A. Hunt, P.A. Jacobs // Cytogenet. Cell Genet. – 1985. – Vol.39. – P.1-6.
4. Storchova, Z. From polyploidy to aneuploidy, genome instability and cancer / Z. Storchova, D. Pellman // Nature reviews / Molecular cell biology. – 2004. – Vol.5. – P.45-54.
5. Toth, A. Tetraploidy in human placenta / A. Toth, G. Arato, J. Szepesi et al. // Gynecol Obstet Invest. – 1992. – Vol.33. – P.153-156.