Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск
Кафедра биохимии и молекулярной биологии

Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам Международной 69-й научной итоговой студенческой конференции, посвященной 200-летию со дня рождения Н.И. Пирогова (г.Томск, 11-13 мая, 2010 год); под реакцией академика РАМН В.В. Новицкого, член. корр. РАМН Л.М. Огородовой

Посмотреть титульный лист сборника

Скачать сборник целиком (1,4 мб)

 

Актуальность. Хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ) - самостоятельное заболевание легких с преимущественным поражением дистальных отделов дыхательных путей и паренхимы.[1] В основе патогенеза - активация протеолиза и дисбаланс системы оксиданты-антиоксиданты.[2] Как результат – развитие оксидативного стресса. Увеличение количества свободных радикалов приводит к быстрому разрушению клеточных структур, нарушению стромы альвеол и  усилению мукоциллиарного клиренса с изменением свойств мокроты. Согласно GOLD от 2007г. препаратами выбора являются длительно действующие бронхолитические средства. Одним из современных эффективных бронходилататоров является тиотропия бромид (спирива). На поздних стадиях показано применение глюкокортикостероидов, а также их комбинацией с бронходилататорами (серетид).[3]
Цель работы. Целью исследования являлась оценка уровня свободных радикалов непосредственно в очаге воспаления (мокроте) и функциональных возможностей антиоксидантных систем мокроты больных, получавших разное лечение.
Материал и методы. В исследовании приняло участие 20 больных ХОБЛ 2-3 стадий в стадии ремиссии, без сопутствующей соматической патологии, мужчины, средний возраст - 54 года. Первую группу составили 10 больных, ранее не получавших базисную терапию. Данные больные ежедневно получали тиотропий бромид на протяжении 3-х месяцев, в дозе 18 мкг, однократно. Вторая группа состояла из  10 больных, получавших ранее назначенную терапию комбинированным препаратом (иГКС/В2-агонист) на протяжении не менее 6-ти месяцев. Далее эти больные получали тиотропий бромид также в течение  3-х месяцев в аналогичной дозировке.
 Свободнорадикальные процессы в мокроте и ее антиоксидантную активность определяли методом люминолзависимой хемилюминесценции. Исследования проводились на хемилюминометре Lumat LB9507 (Berthold Technologies), работающем в режиме счета фотонов. Величину люминесценции выражали в относительных единицах света (RLU/мл*с). Абсолютное содержание радикалов определяли в мокроте на нулевой и на первой минуте, оценивали также антиоксидантную активность мокроты методом ингибирования пробой люминолзависимой хемилюминесценции в присутствии ионов железа и перекиси водорода. Регистрация уровня свободных радикалов в этом опыте проводилась в течение первых 5 минут, с интервалом в 1 минуту. Интенсивность процессов ПОЛ в мокроте оценивалась на экспериментальной модели с липопротеинами куриного желтка. Для этого оценивалось содержание МДА в исходной пробе и при активации процесса окисления ионами железа.
Результаты. Анализ данных показал неоднозначность изменений исследуемых показателей. Так в первой группе больных, получавших только спириву, у 40% наблюдается рост антиоксидантной активности с 4556 до 5008 RLU/мл*с (р<0,05) и снижение уровня МДА, причем как в исходной пробе, так и после индукции процессов ПОЛ с 1,22 до 1,09мкмоль/мл мокроты (р<0,05). Это группа с благоприятным прогнозом, так как воспалительный процесс остановился (снизился уровень МДА) и есть резервные возможности для адекватного ответа на последующую «атаку» свободными радикалами. У 40% пациентов отмечено снижение содержания МДА с 1,09 со 0,72 мкмоль/мл мокроты (р<0,05) и падение антиоксидантной активности с 7755 до 3622 RLU/мл*с (р<0,05). Это может свидетельствовать о том, что лечение привело к подавлению воспалительного процесса, но резерв антиоксидантной системы снижен и она не может противостоять дополнительной нагрузке. Еще у 2 больных наблюдается одновременный рост уровня МДА с 0,92 до 1,17 мкмоль/мл мокроты (р<0,05) и падение антиоксидантной активности  мокроты с 11595 до 972 RLU/мл*с (р<0,05) после лечения. Это неблагоприятная ситуация. Лечение не только не остановило процесс ПОЛ, но и не восстановило антиоксидантный резерв. Во второй группе, получивших комбинированную терапию, у 75% наблюдался рост антиоксидантного показателя с 4307 до 6621 RLU/мл*с (р<0,05) и увеличение содержания МДА с 1,07 до 1,28мкмоль/мл мокроты. Такую ситуацию нельзя оценивать однозначно. Возможно, это плохой прогностический признак и на фоне полного истощение системы антиоксидантов лечение не приводит к остановке воспаления. С другой стороны, ферменты антиоксидантной системы индуцибельны, и их содержание увеличивается в ответ на появление перекисных продуктов. У 25% падение содержания МДА с 1,54 до 1,11мкмоль/мл мокроты (р<0,05) сочетается со снижением АОА с 10431 до 8524 RLU/мл*с (р<0,05), что говорит о подавлении воспаления, но и истощении всех систем.  Интересно, что разные способы лечения отличаются скоростью гашения свободных радикалов в мокроте, которая оценивалась по формуле:
СГ=RLU((0минута)-RLU(1минута))/RLU(0минута).
Так монотерапия спиривой приводит к увеличению скорости гашения с 0,785 до 0,89 (р<0,05), а комбинированное лечение ее снижало с 0,89 до 0,705 (р<0,05).
Выводы. Полученные данные свидетельствуют,  что монотерапия спиривой показана больным ХОБЛ, а по ряду параметров даже предпочтительнее комбинированного лечения.

Список литературы:
1. Айсонов З. Р. Хронические обструктивные болезни легких. Федеральные программы / З. Р. Айсонов, А. Н. Кокосов, С. И. Овчаренко, Н. Г. Хмелькова // Русский медицинский журнал. – 2001. - № 1. – С 9 - 32.
2. Infektion influence on induced sputum cell count at smoker and unsmokers with COPD exacerlation. Bucreeva E.V, Shilov B.V, Nesterovich S.V and other. Eur. Respir. Abstracts Glasgow. – 2004, vol. 124, suppl 48. - p. 2528 /  
3. Глобальная стратегия диагностики, лечения и профилактики хронической обструктивной болезни легких (пересмотр 2007 г.) / Пер. с англ. под ред. Чучалина А.Г. — М.: Издательский дом «Атмосфера», 2008. — 100 с.