СГУ, Саратов

Эта работа опубликована в сборнике "НАУКИ О ЧЕЛОВЕКЕ" – Сборник статей молодых ученых и специалистов /Под ред. Л.М. Огородова, Л.В. Капилевич. – Томск, СГМУ.- 2002.-254 с.

Скачать сборник целиком

Процесс фагоцитоза является одним из важнейших защитных механизмов макроорганизма против различных патогенных бактерий. От степени его завершенности зависит исход инфекционного процесса [1]. Актуальность эффективности данного способа защиты связана, в частности, с широким распространением возбудителей внутрибольничных инфекций с множественной лекарственной устойчивостью.
В отечественной и зарубежной литературе имеются противоречивые данные о влия-нии низко¬интенсивного лазерного излучения (НИЛИ) на активность клеток иммунной системы [2]. В связи с этим целью данной работы было изучение влияния НИЛИ на активность процесса фагоцитоза макрофагами клинических штаммов стафилококка.

Материалы и методы

Макрофаги выделяли из перитонеального экссудата белых мышей, отмывали в среде 199, определяли % жизнеспособности и помещали в пробирки с покровными стеклами.
В качестве объекта фагоцитоза использовали суточную культуру клинического штамма Staphylococcus aureus-9 c выраженной лекарственной устойчивостью. Микробные клетки добавляли во взвесь макрофагов в соотношении 50:1 и инкубировали при 37°С.
Для изучения влияния НИЛИ на процесс фагоцитоза нами была собрана установка на базе микроскопа МБР-13 со встроенными лазерными излучателями. Воздействие осуществляли инфракрасными лучами в диапазоне 810-840 нм и лучами красной области спектра в диапазоне 665-667 нм на макрофаги в стадии адгезии и фаголизосомы в течение 1 и 30 секунд. Через 2 и 6 часов последующей инкубации обработанных НИЛИ клеток покровные стекла с адсорбированными фагоцитирующими макрофагами фиксировали в смеси Никифорова, окрашивали по методу Романовского-Гимза, микроскопировали и определяли число активных макрофагов на разных стадиях фагоцитоза. Рассчитывали фагоцитарный индекс (ФИ), а также индекс завершенности фагоцитоза (ИЗФ) [3].

Результаты и обсуждение

Детальное микроскопирование фагоцитирующих макрофагов позволило установить, что инфракрасное излучение при воздействии в течение 30 секунд усиливает стадию адгезии макрофагов (эффект "облепленных бактериями макрофагов"). Значения ФИ были достоверно выше контрольных значений. Это может быть связано с усилением экспрессии специфических рецепторов на поверхности клеток.
При воздействии инфракрасного НИЛИ на стадии фаголизосомы значительно усиливался киллинг бактерий, так как в данном случае были самые высокие значения ИЗФ. Этот эффект можно объяснить тем, что в основе механизма действия НИЛИ лежит так называемый "кислородный взрыв" - одномоментное образование большого количества короткоживущего синглетного кислорода, являющегося активным радикалом [4]. Следовательно, в наших экспериментах, вероятно, усиливался кислородзависимый киллинг бактерий.
Значительных изменений в активности процесса фагоцитоза при воздействии лучами красной области спектра выявлено не было. Значения ФИ и ИЗФ, определенные в этих экспериментах, достоверно не отличались от контрольных значений.

Литература
1.    Кузник Б.И., Васильев Н.В., Цыбиков Н.Н. Иммуногенез, гемостаз и неспецифическая резистентность организма. М.: Медицина, -1989, -280 с.
2.    Кузьмина В.Е., Варижников Ю.А. Биологическое действие лазерного излучения// Межвуз. сборник.
Куйбышев: КГУ, -1984. -С. 51-60.
3.    Практикум по иммунологии: Учебное пособие / Под редакцией И.А. Кондратьевой, В.Д.Самуилова. -М.:МГУ, -2001. - 224 с.
4.    Кульчавени Е.В. Лазеры против туберкулеза//Лазер-Информ.-1999.-№ 17-18 (176-177).