|
ГУ НИИ кардиологии ТНЦ СО РАМН, ГОУ ВПО СибГМУ Росздрава (г. Томск)
Эта работа опубликована в сборнике "Науки о человеке": материалы VIII конгресса молодых ученых и специалистов / Под ред. Л.М. Огородовой, Л.В. Капилевича. – Томск: СибГМУ. – 2007. – 273 с.
Скачать сборник целиком
Введение. Хроническая ишемия сердечной мышцы индуцирует запуск каскада патологических реакций, обуславливающих процесс ремоделирования миокарда. В его основе лежат фиброз, гипертрофия и гибель кардиомиоцитов (представленная некрозом или апоптозом). В отличие от некроза апоптоз является упорядоченным и регулируемым процессом. Это дает возможность рассматривать механизм программированной клеточной гибели в качестве потенциальной терапевтической "мишени" при лечении ишемической болезни сердца. Ключевыми белками-регуляторами апоптоза кардиомиоцитов являются индуктор апоптоза Вах и его ингибитор - Bcl-2. Дисбаланс соотношения концентраций Вах и Bcl-2 (Bax/Bcl-2) свидетельствует о готовности кардиомиоцитов к запуску программы апоптоза в условиях ишемии. Целью настоящего исследования явилась оценка синтеза белков-регуляторов апоптоза Вах и Bcl-2 при различных степенях выраженности ишемического ремоделирования миокарда.
Материалы и методы. Объектом исследования являлись 50 пациентов, страдающих ишемической болезнью сердца, у которых в условиях фармакохолодовой кардиоплегии были получены биоптаты миокарда левого желудочка. Все пациенты в зависимости от наличия аневризмы левого желудочка были разделены на две группы. Первую группу составили пациенты без эхокардиографических признаков аневризмы (группа I), среди которых на основании величин конечно-диастолического объема были выделены три подгруппы: КДО менее 120 мл, КДО от 120 мл до 150 мл и КДО более 150 мл. Подобным образом были выделены три подгруппы среди пациентов с эхокардиографическими признаками аневризмы (группа II).
Оценка коронарной перфузии производилась на основании данных коронаровентрикуло-графии путем подсчета коронарного индекса (КИ) [1], отражающего степень коронарной окклюзии и значимость окклюзированной артерии в кровоснабжении миокарда. Определение экспрессии белков-регуляторов апоптоза Bcl-2 и Вах кардиомиоцитами производилось при помощи двухэтапного авидин-биотинового метода с демаскировкой антигена (высокотемпературной обработкой ткани) на парафиновых срезах с использованием моно-клональных антител и визуализирующей системы фирмы "Dako Cytomation" по методике, предложенной фирмой-производителем. Результаты иммуногистохимической реакции оценивались в световом микроскопе как процент прореагировавших клеток к их общему количеству в 10 полях зрения. При этом предполагалось, что одно ядро соответствует одной клетке [2].
Определение морфологических признаков кардиосклероза осуществлялось в световом микроскопе после окраски срезов пикрофуксином по Ван-Гизону по стандартной методике. Оценка интенсивности кардиосклероза осуществлялась на основании вычисления склеротического индекса (СИ) [2]. Статистическая обработка данных проводилась с использованием пакета программ статистического анализа «Statistica for Windows» (критерии Колмогорова-Смирнова, Манна-Уитни).
Результаты. Иммуногистохимическое исследование биоптатов сердечной мышцы показало наличие схожих изменений интенсивности синтеза белков-регуляторов апоптоза у обследованных пациентов. Так, значения отношения количества Вах-клеток к количеству Bcl-2+-клеток (Bax/Bcl-2) были достоверно выше у пациентов с КДО менее 120 мл, тогда как по мере увеличения КДО величина соответствующего отношения уменьшалась. Значения коронарного и склеротического индексов увеличивались по мере увеличения величины КДО уменьшения значения отношения Bax/Bcl-2 (Табл.).
|
Таблица 1.
Зависимость склеротического и коронарного индексов от отношения Bax/Bcl-2 (X ± m)
|
| Клиническая
группа |
Коронарный индекс, усл. |
Склеротический индекс, усл. ед. |
Bax/Bcl-2 |
| I: КДО<120 мл |
3,96±2,13, р<0,05 |
9,53±5,43, р<0,05 |
19,50±13,46, р<0,05 |
| I: КДО 120-150 мл |
5,14±4,62, р<0,05 |
12,26±8,17, р<0,05 |
14,45±9,83, р<0,05 |
| I: КДО>150 мл |
7,85±6,08, р<0,05 |
15,58±9,08, р<0,05 |
11,31±5,76, р<0,05 |
| II: КДО<120 мл |
2,70±2,61, р<0,05 |
15,57±3,85, р<0,05 |
17,79±7,54, р<0,05 |
| II: КДО 120-150 мл |
4,00±2,67, р<0,05 |
17,7±8,67, р<0,05 |
6,1±1,53, р<0,05 |
| II: КДО>150 мл |
8,32±6,09, р<0,05 |
26,32±15,9, р<0,05 |
4,3±1,16, р<0,05 |
Заключение. Проведенное нами исследование позволяет утверждать, что готовность кар-диомиоцитов к активации программы апоптоза характерна для ранних этапов ишемического ремоделирования миокарда. В последующих стадиях ремоделирования, ассоциированных с ухудшением коронарного кровотока и усилением кардиосклероза, роль апоптоза кардиомио-цитов в патогенезе ишемического ремоделирования миокарда снижена. Полученные данные могут способствовать разработке новых направлений терапии ИБС.
Список литературы:
1. Белов Ю. В., Вараксин В. А. Постинфарктное ремоделирование левого желудочка сердца. От концепции к хирургическому лечению. - М.: ДеНово, 2002.
2. Ye V.Z. Early myocardial fibrosis is associated with depletion of vasoactive intestinal peptide in rat heart / V.Z. Ye, G. Hodge, J.L. Yong et al. // Exp. Physiol. - 2002. - Vol. 87. - P. 539-546.
|
