Ивановская государственная медицинская академия

Эта работа опубликована в сборнике научных трудов «Актуальные проблемы биологии, медицины и экологии» (2004 год, выпуск 1), под редакцией проф., д.м.н. Ильинских Н.Н. Посмотреть титульный лист сборника

АКТУАЛЬНОСТЬ
В сложной регуляции процессов жизнедеятельности организма важная роль принадлежит щитовидной железе. В последнее время возрастает число заболеваний, связанных с нарушением функций щитовидной железы. По данным эндокринологического научного центра РАМН и ВОЗ распространенность, например, эндемического зоба у детей и подростков в центральной части России составляет 15-25%, а по отдельным районам достигает 40% [3,5,6]. Около 1% населения города Иванова ежегодно госпитализируется по поводу патологии щитовидной железы, из них 51,5% подвергаются оперативному лечению с резекцией данного органа [7].
Среди заболеваний эндокринной системы значительный вес имеет гипотиреоз (врожденный или развивающийся в результате перенесенных заболеваний, а также как последствие хирургического вмешательства на щитовидной железе) [1, 3, 5, 6, 12].
Традиционным методом лечения гипотиреоза является заместительная гормонотерапия [1, 3, 5, 6], которая направлена на кратковременную компенсацию отсутствия или недостаточной функции щитовидной железы. Наиболее физиологичным методом лечения гипотиреоза является трансплантация щитовидной железы, которая по данным многих авторов [12, 13, 14] дает быстрый терапевтический эффект.
Экспериментальная аутотрансплантация служит хорошей моделью гипотиреоза и пересадки, при которой исключается резкий иммунологический конфликт, закономерно возникающий при аллогенных трансплантациях [8, 9, 12].
Целью и задачей настоящего исследования явилось морфометрическое изучение аутотрансплантата щитовидной железы после частичной тиреоидэктомии (2/3).
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Работа выполнена на 64 крысах-самцах линии Август (массой 150-180 граммов). Аутотрансплантацию щитовидной железы осуществляли под нембуталовым наркозом (40мг/кг) небольшими фрагментами (2-3 мм) в мышцы бедра в условиях одномоментной частичной тиреоидэктомии (2/3) по методу Ю.В. Погорелова [9]. Сроки эксперимента составили 1, 3, 7, 14, 21, 30, 60, 90 суток. Забой животных проводили путем введения смертельной дозы нембутала (100мг/кг). Щитовидную железу и её трансплантат фиксировали 9% раствором формалина и подвергали парафиновой проводке. Срезы толщиной 4-6 мкм окрашивали гематоксилин-эозином. Морфометрические исследования проводили с помощью автоматического анализатора изображений ИСТА ВИДЕО ТЕСТ. Используя программу ВИДЕО ТЕСТ МАСТЕР, измеряли среднюю высоту тироцитов (h), средние наружные (Dнар) и внутренние (Dвн) диаметры фолликулов. На основе полученных данных вычисляли индексы накопления коллоида (ИНК) Г.Г Автандилова (Dвн/2h) и А.А. Брауна (Dвн/h) [10, 11]. Радиоиммунологически определяли в сыворотке крови животных количество тиреотропного гормона (ТТГ), тироксина (Т4) и трийодтиронина (Т3), используя установку "Наркотест". Статистическая обработка материала проводилась по интерпрограмме Microsoft Excel (1997) и программе "Биостат"(1999).
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
На 1 сутки после операции в трансплантате отмечаются выраженные признаки деструкции и дезинтеграции органных структур. Наблюдается острый воспалительный процесс. Тироциты вакуолизированы, имеют крупные набухшие гипохромные ядра. Коллоид разжижается и усиленно эвакуируется. Идёт инфильтрация трансплантата полиморфноядерными лейкоцитами. Крупные и средние фолликулы разрушаются. Наиболее интенсивные деструктивные процессы идут в центральной части трансплантата. Выражено полнокровие сосудов в мышечной ткани, окружающей трансплантат.
Через 3 суток воспалительный процесс начинает уменьшаться. Количество полиморфноядерых лейкоцитов в трансплантате снижается. Начинается макрофагическая реакция. В трансплантат входят моноциты, преобразующиеся в макрофаги. Происходит постепенное рассасывание клеточного детрита, активизация фибробластов. За счёт клеток эпителия, ранее утративших дифференцировку, происходит постепенное восстановление фолликулярного аппарата, формируются микрофолликулы. Со стороны мышечного окружения трансплантата отмечено уменьшение отёчности. Скопления лейкоцитов замечены в прослойках соединительной ткани между мышечными волокнами.
Через 1 неделю после пересадки в трансплантате продолжаются процессы репарации. Диаметр фолликулов (Dнар=43,34+-2,61 мкм) значительно ниже. Преобладают мелкие фолликулы. Имеют место скопления тироцитов без четкой фолликулярной организации, особенно в центре трансплантата. Клетки высокопризматические (h=8,57+-0,4 мкм). Коллоид бледно окрашен, в некоторых случаях содержит дескваматы эпителия. Отмечено образование микрофолликулов. Индекс накопления коллоида  снижен (Dвн/h=3,21+-0,24).
По истечении 2 недель наблюдается уменьшение высоты тироцитов до уровня, близкого к контрольному (h=7,73+-0,33 мкм). Ядра тироцитов неправильной формы, расположены эксцентрично. Имеет место увеличение средних размеров фолликулов. Встречаются крупные деформированные фолликулы с густым коллоидом и плоским эпителием. Индекс накопления коллоида выше, чем в предыдущий срок. Продолжается образование микрофолликулов. Улучшается васкуляризация трансплантата.
Данные исследования трансплантата на 3 неделе после пересадки говорят о его максимальной функциональной активности. Наружный диаметр фолликулов (Dнар=52,52+-2,09 мкм) продолжает увеличиваться. Внутренний диаметр фолликула несколько снижен по сравнению с предыдущим сроком. Возрастает высота тироцитов (h=10,48+-0,36 мкм), их цитоплазма зерниста, и они активно резорбируют коллоид. Индекс накопления коллоида имеет минимальные значения (Dвн/h=2,67+-0,22).
К 1 месяцу фолликулы продолжают увеличиваться и достигают средних размеров (Dнар=60,52+-3,99 мкм). Коллоид становится оптически более плотным и  равномерно окрашенным. Размер фолликулов на периферии трансплантата больше, чем в центральной зоне. Тироциты имеют меньшую высоту (h=9,66 +-1,08 мкм), чем в 3 недели, цитоплазма оксифильная и зернистая. Индекс накопления коллоида повышается (Dвн/h=6,04+-0,64).
В 2 месяца высота тироцитов минимальна (7,35+-0,32 мкм). Размер фолликулов увеличивается. Зафиксировано достоверное увеличение их внутреннего диаметра (Dвн=54,11+-5,56 мкм), что свидетельствует о накоплении в полости коллоида, который во многих фолликулах уплотнен. Индекс накопления коллоида достигает высоких значений (Dвн/h=7,72+-0,83).
К окончанию эксперимента (3 месяца) отмечено увеличение толщины фолликулярного эпителия. Продолжается новообразование фолликулов, репаративные процессы. Тироциты имеют высоту 11,67+-0,5 мкм. Вновь усиливается резорбция коллоида, он становится более прозрачным. Размер фолликулов достигает больших величин (Dнар=71,96+-4,06 мкм), чем за все предыдущие сроки. Сохраняется значительное количество клеток интерфолликулярных островков. Вместе с тем имеется тенденция к развитию склеротических изменений в строме трансплантата. Индекс накопления коллоида Dвн/h=4,53+-0,37.
Важным для понимания механизмов морфофункциональной интеграции аутотрансплантата и оставшейся части щитовидной железы является ранговый корреляционный анализ [2]. Из 105 введённых в компьютер ранговых корреляционных зависимостей выявлено 46 достоверных связи. Наиболее тесная корреляция отмечена между преобразованиями наружных и внутренних диаметров фолликулов в трансплантате; между индексами накопления коллоида в периферической зоне щитовидной железы и трансплантате. Достоверная отрицательная связь зафиксирована для изменений высоты тироцитов и индекса накопления коллоида (ИНК) в трансплантате. Отрицательная корреляция отмечена также между концентрацией ТТГ и размерами фолликулов в трансплантате. Изменение высоты тироцитов и содержание в крови тиреоидных гормонов характеризуются положительным коэффициентом корреляции.
Таким образом, в результате частичной тиреоидэктомии (2/3 щитовидной железы) происходит снижение массы её рабочей паренхимы, и, как следствие, снижается количество тироксина и трийодтиронина в организме. В результате происходит активация гипофиза и усиливается выработка тиреотропного гормона. Оставшаяся часть железы и трансплантат ощущают на себе значительные гуморальные влияния, направленные на стабилизацию гормонального фона [4].
Изменения в строении трансплантата свидетельствуют о структурных перестройках, отражающих адаптацию тиреоидной паренхимы к новым условиям работы (изменение места расположения, утрата связей с окружающими органами за счёт денервации и деваскуляриации и т. д.). Кроме того, на эти адаптивные преобразования накладывает отпечаток воспалительный процесс, наблюдающийся на 1 – 3 сутки после пересадки [9]. В это время идёт разрушение крупных и средних фолликулов, т. к. они являются наиболее дифференцированными и не могут приспособиться к новым условиям. Особенно интенсивно деструкция идёт в центральной части трансплантата. В результате в ранние сроки после пересадки трансплантат представляет собой перерождённую ткань, почти не содержащую фолликулов. Позже происходит восстановление органных структур за счёт дедифференцовавшихся тироцитов фолликулов и клеток интерфолликулярной ткани (30-60 сутки). Улучшается кровоснабжение трансплантата благодаря прорастанию в него сосудов из окружающих мышц. В течение всего эксперимента наблюдается рост фолликулов, стабилизация функционирования паренхимы. К 60-90 суткам за счёт гипертрофии щитовидной железы и работы трансплантата уровень тироксина в крови стабилизируется в области контрольных значений.
Таким образом, проведённые исследования позволяют сделать следующей вывод:
При пересадке в мышечную ткань аутотрансплантат щитовидной железы подвергается морфофункциональным преобразованиям. На начальных этапах преобладают деструктивные процессы, в результате основная часть фолликулов разрушается. Начиная с 7 суток, в паренхиме трансплантата появляются микрофолликулы, которые постепенно (14-60 сутки) увеличиваются и к 90 суткам достигают крупных размеров.

Список литературы.
1.    Брейдо И.С. Хирургическое лечение заболеваний щитовидной железы.- СПб: Гиппократ,1998.- 319с.
2.    Виноградов С.Ю., Погорелов Ю.В. Функциональная морфология нейромедиторного биоаминового обеспечения щитовидной железы в условиях адаптации.// Вестник Ивановской медицинской академии. 1997.- Т2, №3- С.6-14.
3.    Герасимов Г.А., Свириденко Н.Ю.  Йоддефицитные заболевания. Диагностика, методы профилактики и лечения (обзор) // Терапевтический архив.- 1997.- т.69, №10, С.1-3.
4.    Глумова В.А. Щитовидная железа.// В кн.: Структурные основы адаптации и компенсации нарушенных функций. - М.:Медицина, 1987., - С.320 - 328.
5.    Дедов И.И., Петеркова В.А., Безлепкина О.Б. Врождённый гипотиреоз у детей. - М.: Берлин-Хеми А.Г., 1999.- 24с.
6.    Дедов И.И., Трошина Е.А., Александрова Г.В.  Диагностика, лечение и профилактика узловых форм заболеваний щитовидной железы.- М.: Берлин-Хеми А.Г., 1999.- 48с.
7.    Качер В.В., Березин А.Н.  Характеристика заболеваний щитовидной железы по данным Ивановского городского эндокринологического центра. //Медико-биологические, клинические и социальные вопросы здоровья и патологии человека: Сб.науч.тр.- Иваново, 1997.- С.47-51
8.    Орлов С.Б., Мухина Н.А., Титова М.А.  Морфофункциональная характеристика аутотрансплантата щитовидной железы.// Морфологические основы гистогенеза и регенерации тканей: Сб.науч тр. - СПб, 2001.- С.63
9.    Погорелов Ю.В.  Гистологические аспекты компенсаторных процессов щитовидной железы в условиях экспериментальной трансплантации. // Морфология компенсаторных процессов: Сб.науч.тр. - Иваново, 1991.-С.4-6.
10.    Третьяк С.И.  Комплексная морфометрическая оценка аллотрансплантатов щитовидной железы после пересадки в правое предсердие // Количественная морфология развивающегося организма: Сб науч.тр. - Минск,1998 - С.65-71.
11.    Хмельницкий О.К., Третьякова М.С.  Щитовидная железа как объект морфометрического исследования.// Архив патологии- 1998.- Т60.,№4-С.47-49.
12.    Чуйко В.А., Исмаилов С.И., Туракулов Я.Х.  Консервация и трансплантация щитовидной железы. - Т.: Медицина, 1989.- 126с.
13.    Шумаков В.И.  Трансплантация: Руководство.- Тула: Медицина, 1995.- 391с
14.    Yuxin C., Fangqi L., Xiaoping W., Yulin M. Parathyroid – Thyroid Transplantation Without Flushing or Perfusion.// Transplantation Proc.,30, 1998.- P.2931-2932.