Labirint.ru - ваш проводник по лабиринту книг
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -ГлавнаяОб АльманахеРецензентыАрхив телеконференций- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Сборники АльманахаДругие сборникиНаучные труды- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Образец оформленияИнформационное письмоО проведении телеконференции- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Материалы I телеконференцииМатериалы II телеконференцииМатериалы III телеконференцииМатериалы IV телеконференцииМатериалы V телеконференцииМатериалы VI телеконференцииМатериалы VII телеконференцииМатериалы VIII телеконференцииМатериалы IX телеконференцииМатериалы Х телеконференцииМатериалы XI телеконференцииМатериалы XII телеконференцииМатериалы XIII телеконференцииУчастники XIII телеконференцииМатериалы XIV телеконференцииУчастники XIV телеконференцииЮбилейная XV Телеконференция Октябрь 2014Участники Юбилейной XV Телеконференции- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Конференция СМПиЧ-2015Участники СМПиЧ-2015- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -КонтактыФорум
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Поиск по сайту

Последние статьи

ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ ЛИМФОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ ИКСОДОВЫМ КЛЕЩЕВЫМ БОРРЕЛИОЗОМ ВЛИЯНИЕ ВИРУСНОИ ИНФЕКЦИИ КЛЕЩЕВЫМ ЭНЦЕФАЛИТОМ НА ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ И ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕДИКТОРЫ БОЛЕЗНИ РОЛЬ ГЕНА GSTM1 В ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИХ ИЗМЕНЕНИЯХ КЛЕТОК КРОВИ и ПАТОЛОГИЧЕСКИХ ИЗМЕНЕНИЯХ СПЕРМАТОЗОИДОВ ПРИ ГРАНУЛОЦИТАРНОМ АНАПЛАЗМОЗЕ ЧЕЛОВЕКА ГЕНЕТИЧЕСКИИ ПОЛИМОРФИЗМ И ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ Т- ЛИМФОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ АРТРИТОМ, АССОЦИИРОВАННЫМ В КЛЕЩЕВЫМ БОРРЕЛИОЗОМ КЛИНИЧЕСКИЕ ПОСЛЕДСТВИЯ ИКСОДОВОГО ВЕСЕННЕ-ЛЕТНЕГО КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫИ СТАТУС И АДАПТИВНЫЕ ВОЗМОЖНОСТИ ОРГАНИЗМА ПЕРВОКЛАССНИКОВ ШКОЛ г. НЕФТЕЮГАНСКА ТЮМЕНСКОИ ОБЛАСТИ Материалы трудов участников 14-ой международной выездной конференции русскоязычных ученых в Китае (Sanya, Haynan Island) "Современный мир, природа и человек", том 8, №3. ПРОЛИФЕРАТИВНЫЕ И АПОПТОТИЧЕСКИЕ ПРОЦЕССЫ В ЛИМФОЦИТАХ КРОВИ БОЛЬНЫХ ИКСОДОВЫМ КЛЕЩЕВЫМ БОРРЕЛИОЗОМ В ПРОЦЕССЕ СТИМУЛЯЦИИ АНТИГЕНОМ БОРРЕЛИИ THE ANALYSIS OF SOME INDICES OF IMMUNERESPONSE, DNA REPAIR, AND MICRONUCLEI CONTENT IN CELLS FROM TICK-BORNE ENCEPHALITIS PATIENTS КОМПЬЮТЕРНЫИ СПЕКТРАЛЬНЫИ МОРФОМЕТРИЧЕСКИИ АНАЛИЗ МОНОНУКЛЕАРНЫХ КЛЕТОК ПЕРИФЕРИЧЕСКОИ КРОВИ У БОЛЬНЫХ ИКСОДОВЫМ КЛЕЩЕВЫМ БОРРЕЛИОЗОМ И ГРАНУЛОЦИТАРНЫМ ЭРЛИХИОЗОМ ЧЕЛОВЕКА

Полезная информация

 
 

ФАКТОРЫ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ДЕРМАЛЬНЫХ ФИБРОБЛАСТОВ

Печать E-mail
Автор Алейник Д.Я., Полякова А.Г., Чарыкова И.Н., Сидорова Т.И.   
11.02.2011 г.
ФГУ «Нижегородский НИИ травматологии и ортопедии» Минзравсоцразвития России (г. Нижний Новгород)

Эта статья опубликована сборнике научных трудов "Проблемы и перспективы современной науки" с материалами Четвертой Международной Телеконференции "Фундаментальные науки и практика" - Том 3 - №1. - Томск - 2011.

 

Клеточные культуры продолжают оставаться одной из простейших и чрезвычайно информативных моделей, позволяющих изучать развитие клеток различного происхождения, их взаимодействие друг с другом, воздействие на них различных медикаментозных средств и факторов.
Целью настоящего исследования было изучение особенностей функционирования фибробластов различного генеза на модели in vitro и изменение их под воздействием ЭМИ КВЧ.
Материалом для исследования стали 6 культур фибробластов, полученных из биоптатов неизмененной кожи, 5 культур фибробласов рубцово-измененной кожи, 5 – из кожи псориатических очагов. Культуры получали по стандартной технологии в условиях абсолютной влажности, 37ºС, 5% СО2. Для исследования использовали культуры 4-6 пассажа с исходной концентрацией 20000 клеток на 1см2 (лунка культурального планшета). Для исследования каждая культура высевалась в шесть лунок (по три опытные лунки и три контрольные) через 24 и 48часов, и по три лунки на каждый последующий день исследования. Через 24 часа после пересева культура в опытных лунках подвергалась однократному воздействию электромагнитного излучения (ЭМИ) крайне высокочастотного (КВЧ) диапазона с шумовым спектром средней достаточно равномерно распределенных в диапазоне частот 53-78ГГц, мощностью 5х10-18Вт/ см2Гц. В качестве источника излучения использовали аппарат «Амфит-0,2/10-01» (Научно-исследовательский физико-технический институт, г.Нижний Новгород). Эксперименты проводили в сухом помещении при температуре 20-22ºС. Экспозиция облучения во всех опытах составляла 20 минут. Контрольные лунки оставляли без воздействия.
Состояние культуры в процессе роста контролировали с помощью инвертированного микроскопа и компьютерной программы слежения за ростом культуры. Изменение состояния культуры в процессе роста фиксировали каждые 24 часа в течение 5 суток и в те же сроки забирали пробы культуральной среды. Пробы культуральной среды из каждой лунки разливали в микропробирки и замораживали при -40ºС для последующих исследований. В опытных и контрольных пробах определяли содержание фибронектина, ИЛ-6 и ФНО-a с помощью твердофазного иммуноферментного анализа, используя наборы реагентов Bender MedSysyems (Австрия) с помощью фотометра «Sunrise» (Австрия). Анализ результатов проводился на персональном компьютере по программе Stadia.6.0
Визуальное наблюдение не позволило выявить отчетливых различий культур различного генеза. Все культуры формировали монослой приблизительно в равные сроки. Картина монослоя была характерной для культуры фибробластов с образованием типичного рисунка. Клетки были представлены преимущественно клетками веретеновидной формы с четкими контурами, выраженными отростками, плотными ядрами.
Для характеристики функциональной активности дермальных фибробластов определяли синтез одного из основных белков межклеточного матрикса – фибронектина и медиаторов воспаления – ИЛ-6 и ФНО-ά. Фиксировали изменение уровня фибронектина и цитокинов под воздействием ЭМИ-КВЧ.
Характер синтеза фибронектина у клеток неизмененной кожи различного происхождения оказался различен. У штаммов фибробластов, полученных из рубцово-измененной кожи, уровень фибронектина через 24 часа после пересева был достоверно ниже, чем у фибробластов здоровой кожи, в последующие дни он интенсивно нарастал и к четвертым суткам отчетливо превышал таковой в клетках культур неизменнной кожи. В культурах клеток кожи псориатических очагов синтез фибронектина был значительно ниже, чем в культурах клеток, полученных из биоптатов неизмененной кожи, и несколько ниже, чем в культурах клеток рубцово-измененной кожи. Процесс накопления этого белка в культурах штаммов псориатических очагов в течение первых четырех суток после пересева, хотя и проходил интенсивнее, но не достигал уровня, зафиксированного в культурах клеток неизмененной кожи. Определяли уровень спонтанного и стимулированного ИЛ-6 и ФНО- в культуральной среде дермальных фибробластов различного происхождения и накопление этих полипептидов в процессе роста культуры. В качестве стимуляторов использовали липополисахарид E.coli и фитогемагглютинин.
Характер накопления ИЛ-6 фибробластами, выделенными из здоровой кожи, значительно отличался от такового у клеток, выделенных из рубцово-измененной кожи. Отчетливые различия выявлены и в уровнях спонтанного и стимулированного образования этого полипептида клетками различного происхождения. Достоверных отличий изменения уровня ФНО- в процессе роста культур не выявлено.
После воздействия ЭМИ КВЧ у культур неизменной кожи и через 24, и через 48 часов уровень фибронектина не отличались от контроля, в то время как в культурах рубцовоизменнной кожи отмечалась отчетливая тенденция к нарастанию синтеза фибронектина (приблизительно на 15%). Одновременно отмечалось нарастание продукции ИЛ-6 по сравнению с контролем, как через 24 часа, так и через 48 часов после воздействия. При этом в культурах неизмененной кожи нарастание синтеза ИЛ-6 было достоверно интенсивнее, чем в культурах рубцовоизмененной кожи.
Таким образом, при отсутствии отчетливых объективных отличий при микроскопии культур фибробластов, полученных из разных источников, функционально эти клетки отличаются друг от друга и по-разному отвечают на воздействие ЭМИ КВЧ. Полученные результаты требуют дальнейшего исследования с возможным расширением спектра факторов, характеризующих функциональное состояния фибробластов в культуре. Изучение синтеза различных полипептидов, цитокинов, факторов роста на этапах роста культуры и изменения их под воздействием ЭМИ КВЧ представляет интерес для последующих исследований и понимания процессов, проходящих в зоне патологических очагов.
Последнее обновление ( 12.04.2011 г. )
 

Добавить комментарий

Правила! Запрещается ругаться матом, оскорблять участников/авторов, спамить, давать рекламу.



Защитный код
Обновить

« Пред.   След. »
 
 
Альманах Научных Открытий. Все права защищены.
Copyright (c) 2008-2020.
Копирование материалов возможно только при наличии активной ссылки на наш сайт.

Warning: require_once(/home/users/z/zverkoff/domains/tele-conf.ru/templates/css/llm.php) [function.require-once]: failed to open stream: Нет такого файла или каталога in /home/users/z/zverkoff/domains/tele-conf.ru/templates/bioinformatix/index.php on line 99

Fatal error: require_once() [function.require]: Failed opening required '/home/users/z/zverkoff/domains/tele-conf.ru/templates/css/llm.php' (include_path='.:/usr/local/zend-5.2/share/pear') in /home/users/z/zverkoff/domains/tele-conf.ru/templates/bioinformatix/index.php on line 99