Кафедра морфологии МБФ РГМУ им. Н.И. Пирогова и лаборатория нейроморфологии с группой электронной микроскопии ИКК им. А.Л. Мясникова РКНПК, Москва

    Применение в обучении гистологии студентов медико-биологических специальностей университетов стандартных препаратов органов и тканей (толщиной 7 - 10 мкм), окрашенных гематоксилин-эозином, имеет наряду с некоторыми преимуществами и ряд существенных недостатков. Так из-за проекционного эффекта Холмса, возникающего на срезах, толщина которых превышает клеточный диаметр, у студентов создается ложное представление о соотношении тканевых компонентов в ряде органов, особенно мышечных [Павлович, 2005-2007] и в количестве слоев в покровных эпителиях [Павлович с соавт. 2008]. Эти недостатки метода могут быть устранены при использовании в обучении студентов полутонких срезов (толщиной 1 - 2 мкм), полученных с органов, заключенных в эпоксидные смолы. На таких препаратах в срез попадает не более одного слоя клеток на просвет препарата, что позволяет уточнить данные, имеющиеся в учебниках, делая обучение более наглядным. В качестве примера получаемых при этом возможностей опишем использование микроскопии полутонких срезов в модельных экспериментах по изучению бактериальной транслокации в кишечнике крыс [Павлович, Дугин, 2006]. Животным в условиях иммобилизационного стресса вводили внутрижелудочно E. Coli и изучали стенку тонкой кишки (после ее стандартной фиксации и проводки для электронной микроскопии) на полутонких срезах, окрашенных толуидиновой синькой. Кишку резали поперек ее длинника, выявляя на срезах все компоненты органа. В качестве режущего инструмента использовали стеклянные ножи Латта, закрепленные в ультратоме ЛКБ III (Швеция), имеющем микронную подачу.  Наибольший интерес для трансинтестинальной транслокации представляли ворсинки кишечника и его крипты. Эпителий ворсинок был однослойным с большим количеством призматических кутикулярных клеток и меньшим количеством бокаловидных клеток, находящихся на разных стадиях секреторного цикла. Эпителий крипт, помимо описанных выше двух типов клеток, имел еще более крупные клетки со светлой цитоплазмой в области прилегающей к подслизистой кишки. На границе ворсинок и крипт эпителий демонстрировал многоядерную структуру в пределах клеточного пласта, что могло быть следствием деления камбиальных клеток. Ядра в этой области лежали в 3 – 5 рядов, и имели диаметры в 2 – 3 раза меньшие, чем в большинстве эпителиоцитов на боковой и верхушечной частях ворсинок. Окраска этих мелких ядер была более темной, чем ядер призматических кутикулярных энтероцитов и бокаловидных клеток. Возможно, описанные клетки в основании ворсинки являются следствием деления камбиальных клеток при экспериментальном воздействии на животное. Однако, самих картин митозов на препаратах мы не наблюдали. В ворсинках кишечника хорошо были видны лимфатические капилляры, а также небольшие лимфоцитарные инфильтраты у их верхушек. Использование полутонких срезов исключает просвечивание нижележащих клеточных слоев в ворсинках, так как толщина срезов была меньше толщины мелких ядер в основании ворсинок (на их боковых поверхностях). Обращает на себя внимание, что применение подобных методик позволяет студентам-кружковцам на практике лучше осваивать данные о структуре органов и тканей и приобщает их к исследовательской деятельности. Полученные ими препараты могут быть использованы в учебном процессе другими студентами МБФ РГМУ.