В последние годы внутрибольничные инфекции (ВБИ) остаются одной из острейших проблем здравоохранения. Спектр их возбудителей достаточно разнообразен, однако в настоящее время он существенно пополнился за счет увеличения доли плесневых и дрожжевых грибов, так по данным Национального комитета США по контролю за ВБИ (NNIS) плесени и дрожжи входят в десятку наиболее часто выявляемых возбудителей госпитальных инфекций [1,2]. Будучи одним из основных составляющих микробного аэрозоля плесневые и дрожжевые грибы создают  риски контаминации ими дыхательных путей и кожных покровов пациентов,  а так же медицинского   оборудования   и     инструментов. Возможность заражения человека в значительной степени зависит от состояния его организма, в связи с чем, грибковые инфекции представляют опасность преимущественно для иммунокомпрометированных пациентов. Такие пациенты могут находится в отделениях реанимации и интенсивной терапии, трансплантации костного мозга, химиотерапии лейкозов и других. В связи с чем, эти отделения могут быть отнесены к подразделениям высокого эпидемического риска, где требуется постоянное мониторирование концентрации плесневых грибов.  [3,4,5]. На законодательном уровне нормирование присутствия плесневых и дрожжевых грибов в воздухе закрытых помещений ЛПУ регламентировано СанПиН 2.1.3.1375-03 и предполагает полное их отсутствие, что практически не реально [6].
С целью отработки новых технологий уничтожения плесневых грибов в помещениях высокого риска грибковых  инфекций сотрудниками  кафедры эпидемиологии ГОУ ВПО УГМА, при поддержке предприятия «Растер», была проведена оценка эффективности различных препаратов и технических средств  и технологий противоплесневых обработок в ЛПУ.
Материалы и методы. Работа выполнена в 2005-2008 гг. в 17 муниципальных и частных медицинских учреждениях Екатеринбурга. В качестве методов использовали традиционную дезинфекцию поверхностей  с помощью растворов дезинфектантов и мелкодисперсное распыление в воздухе помещений ряда дезинфицирующих средств, обладающих фунгицидной активностью. В качестве распыливающей аппаратуры применяли различные модификации аэрозольных генераторов частиц ультрамалого диаметра с размером частиц, от 1 до 13 микрон. Для  поддержания достигнутого в процессе обработки эффекта использовали фотокаталитическое обеззараживание воздуха с помощью аппарата «Аэролайф». При  подготовке помещений к обработке проводили предварительную паспортизацию объекта, которая позволяла оценить последовательность и целесообразность дальнейших мероприятий. Она включала:  оценку состояния здания, в котором находилось помещение (год постройки, год проведения последнего капитального ремонта, наличие подвала и его состояния, эффективность работы системы вентиляции, наличие аварийных ситуаций на водопроводе и канализации) и характеристику самого помещения (его площадь, высота потолка, состояние стен, потолка и пола, наличие промерзающих или мокнущих поверхностей, вентиляционных отверстий, раковин, стояков, дату последнего косметического или капитального ремонта, изолированность этого помещения от других, оснащенность аппаратурой, приборами, наличие комнатных растений и т.д.).          
 После оценки состояния объекта проводили мероприятия по выявлению возможных источников плесени. Далее с помощью аппарата ПУ-1Б определяли фоновые концентрации плесневых грибов в воздухе, путем отбора проб не менее чем в 5 точках на каждые 20 кв.м. площади помещения. Воздух отбирали в критических точках, таких как подоконники, вентиляционные отверстия, раковины, канализационные и водопроводные трубы, цветы, у входной двери, на пути потоков воздуха и других участках помещения - в некритических точках. Отобранный материал засевали на чашки Петри со средой Сабуро. Эффективность фунгицидной обработки оценивали спустя  3 и 12 часов, так же по результатам отбора проб воздуха.
 Все лабораторные исследования проводили на базе бактериологических  лабораторий отдела особо опасных инфекций санэпидотряда ПУрВО МО РФ и ФГУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Свердловской области», аккредитованных на данный вид исследований. Для решения поставленных задач были использованы санитарно-гигиенические, микробиологические, инструментальные методы исследования. Экспериментальным путем были получены данные по времени допуска персонала в помещения после дезинфекционной обработки, при различных воздействующих факторах рассчитаны коэффициент (HQ) и индекс опасности (HY). Анализ  информации проведен в пакете статистического анализа Statistica 6.0 и специально разработанных программных продуктов , сопряженных с приложением dis-Offis. При анализе полученных данных использовали общепринятые статистические приемы, с определением средне - арифметической  (М), стандартной ошибки (m) и среднего стандартного отклонения  (g). Достоверность различий рассматривали по t-критерию Стюдента. Различия считали достоверными при р<0,05. Наличие связи между явлениями определяли с помощью коэффициента линейной корреляции и регрессии.
      Результаты и обсуждение. Изучение фонового видового состава дрожжевых и плесневых грибов в воздухе отдельных помещений показало, что наибольшую долю (80-85 %) составляли грибы рода Aspergillum, далее, примерно с одинаковой частотой обнаруживали Penicillium и Mucor  (6-12%), другие виды грибов (Phizomucor, Rhizopus) - суммарно не превышали 3-4 %. Структура  выделяемых плесневых грибов зависела от  функционального назначения помещения, времени года, температуры воздуха, влажности, освещенности и повторяемости технологических процессов. Технологию уничтожения плесневых грибов, до уровней регламентированных СанПиН 2.1.3.1375-03   выполняли  в несколько этапов.Первоначально снижение концентрации плесневых грибов оценивали после  проведения генеральной уборки помещения. В отличие от традиционной последовательности операций  при ее проведении «влажная уборка—дезинфекция», наибольшую эффективность показала иная последовательность технологических процессов, а именно введение перед «влажной уборкой» дополнительного этапа «предварительной дезинфекции». Еще более обнадеживающие результаты были получены при дезинфекции путем мелкодисперсного распыливания дезинфицирующих средств в воздухе помещений с помощью аэрозольных генераторов. В процессе исследования было установлено, что чем меньше был размер генерируемых частиц аэрозоля, тем выше эффективность фунгицидной обработки. Используемые нами распылители позволяли создавать мелкодисперсный аэрозоль, способный проникать в труднодоступные для обычной обработки поры поверхностей. По нашим расчетам, преобразование раствора дезинфектанта в мельчайшую аэрозоль, частиц с размером от 12-13 микрон до 1-2 микрон приводило к увеличению площади контакта средства с мицелием и спорами грибов в 10 раз, что в последствии позволяло снизить дозу дезинфицирующих средств до 1-2 мл/м3, при неизменной эффективности обработки. При таких технологических режимах удавалось получить снижение концентрации плесневых грибов  в 30-50 раз по сравнению с исходным уровнем или до единичных колоний (КОЕ) в метре кубическом (м3).
 Для сохранения достигнутого эффекта фунгицидных обработок мы применяли анализ санитарно-микробиологических показателей на объектах, где использовалась такая последовательность технологических процессов, как комбинация мелкодисперсного распыливания средства с последующим применением фотокаталитического очистителя воздуха, который позволял получить высокую эффективность не  только такой обработки,  но и возможность долговременного сохранения достигнутого результата на уровне  до 20 КОЕ/ м3. Для оценки безопасности применяемого при фунгицидной обработке мелкодисперсного распыления средства на основе перекиси водорода, мы с помощью фотометрического метода  определяли концентрации в воздухе перекисных соединений в в различные интервалы времени  после фунгицидной обработки. Экспериментальным путем было установлено время, в течение которого происходило снижение концентрации перекиси водорода в воздухе  до величины ПДК в воздухе рабочей зоны и величины ПДК в атмосферном воздухе. Опытным путем было подтверждено, что при проведении фунгицидных обработок с использованием препаратов на основе перекиси водорода через 2,5 часа концентрация перекиси водорода в воздухе помещений достигает ПДК для воздуха рабочей зоны (0,3 мг/м3), а через 3,5 часа – она снижается до уровня ПДК для атмосферного воздуха (0,1мг/м3). Таким образом, уже через 2,5 часа после обработки персонал может входить в помещение без применения средств индивидуальной защиты органов дыхания. 
 Таким образом, добиться снижения концентрации плесневых грибов и сохранить полученные  результаты  на нормируемом  уровне, удавалось только при комплексном подходе к уничтожению плесневых грибов в закрытых помещениях, который включал три последовательных этапа  проведения обработки:
•    первый  – генеральная уборка помещения;
•     второй – обработка воздуха и поверхностей средствами, обладающими фунгицидной активностью, с обязательным использованием современной аппаратуры, позволяющей создавать мелкодисперсный аэрозоль;
•    третий – пролонгирование фунгицидного эффекта обработки с помощью фотокаталитического обеззараживателя и очистителя воздуха.
       Следовательно, учитывая выше изложенное, можно констатировать, что в настоящее время мы можем предложить практическому здравоохранению технологию, которая позволяет достичь регламентируемые действующими санитарными правилами концентрации плесневых и дрожжевых грибов в воздухе закрытых помещений лечебных учреждений.