Проблема острых гнойных неспецифических и специфических воспалительных заболеваний органов женской половой сферы, вызываемых микроорганизмами и простейшими, в частности, Trichomonas vaginalis, устойчивыми к действию антибиотиков и производных имидазола, на протяжении многих лет остается одной из наиболее актуальных в клинической медицине [1]. Наиболее часто данные процессы характеризуются длительным, прогрессирующим течением, наклонностью к рецидивам, высокой частотой полиорганных осложнений, являющихся основной причиной инвалидизации и гибели женщин. Кроме того, при использовании указанных препаратов часто отмечаются побочные эффекты со стороны ЦНС, желудочно-кишечного тракта, дисбактериозы различной степени тяжести, селекция устойчивых штаммов, а так же отсутствие противовоспалительного эффекта при их воздействии [2]. Поэтому, по мнению ряда исследователей, на современном этапе в местной этиотропной терапии все большее распространение получают средства растительного происхождения, сочетающие в себе потенциалы антибактериального, антипротозойного и противовоспалительного эффектов за счет содержания комплекса биологически активных веществ [3].
Перспективными в этом отношении являются растения рода Saussurea DC. Раннее проведенные нами исследования показали, что экстракт соссюреи солончаковой обладает выраженной противолямблиозной активностью [4]. Соединения, обуславливающие биологическую активность, являются присутствующие в экстрактах сесквитерпеновые лактоны [5]. Целью данного исследования явилось изучение действия экстракта соссюреи солончаковой Saussurea salsa (Pall.) Spreng. (ЭСС) на неспецифические (антибактериальные) и трихомонадные заболевания женской половой сферы для дальнейшего использования в качестве средства для местного лечения воспалительных бактериальных и трихомонадных инфекций мочеполовых путей.

Материалы и методы.
Эксперимент по изучению антибактериального и противовоспалительного действия ЭСС in vivo проводился на белых беспородных половозрелых крысах-самках, массой 180-200 грамм, разделенных на 4 группы по 6 животных в каждой. В основной группе животным во влагалище вводились свечи с ЭСС (действующее вещество составляло 15 мг) на основе масла какао, в группе сравнения использовали свечи "Клион Д" по 125 мг каждая, в контрольной группе 1 вводили свечи плацебо (масло какао), а контрольная группа 2 - животные без лечения. Все лекарственные средства вводили ежедневно 1 раз в день в течение 7 дней. Предварительно все животные были подготовлены путем создания модели острого неспецифического гнойного воспаления. Для этого половозрелой крысе-самке с нормальным овуляторным циклом под эфирным наркозом вводили под слизистую влагалища 0,3 мл очищенного скипидара, после чего преддверие влагалища зашивали наглухо, через 30 часов острыми ножницами нитки разрезали. Гнойное содержимое, истекающее из влагалища, помещали в стерильную пробирку и немедленно засевали на плотные питательные среды (кровяной агар, агар для лактобактерий, Сабуро - агар) секторным методом по Гоулди и газонам по 0,1 мл. Чашки с посевами инкубировали в термостате при температуре 37оС в течение 48 часов, после чего подсчитывали количество выросших колоний в каждом секторе. Идентификацию микроорганизмов осуществляли по культуральным, морфологическим, тинкториальным и биохимическим признакам. Бактериальный посев производился: у интактных животных для определения нормальной микрофлоры, после воспроизведения модели, и на 7 сутки при окончании эксперимента.
О характере и степени выраженности воспалительной реакции судили по следующим характеристикам: макроскопической оценке половых органов с использованием бинокулярной лупы МБС-9 и гистологическим изменениям в тканях матки, маточных труб и влагалища. Для морфологического изучения на 1, 3, 5 и 7 сутки забивалось по одному животному из каждой группы с последующим взятием влагалища и матки.
Противотрихомонадная активность ЭСС in vivo изучена на модели трихомонадного абсцесса белых мышей. Эксперимент проведен на 40 белых беспородных мышах обоего пола, средней массой 25-30 г. Для создания модели трихомонадного абсцесса на спинке животного выбривали шерсть на участке, размером 0,5 х 0,5 см, затем подкожно тонкой иглой вводили 0,3 мл суспензии штаммов Trichomonas vaginalis, содержащей по 1-3 х 304 простейших в 1 мл. Через 4-5 дней животных с развившимся трихомонадным абсцессом разбивали на 4 группы по 10 особей в каждой. Первой группе крыс вводился ЭСС в дозе 0,1 мг/кг (в качестве растворителя использован 3 % водно-спиртовый раствор), второй группе - стандартный препарат метронидазол в стандартной дозе 25 мг/кг; третьей - 3 % водно-спиртовый раствор; четвертую группу составлял контроль, без лечения. Введение препаратов осуществлялось 1 раз в сутки, внутрижелудочно, через зонд в течение 7 дней. О течении трихомонадного абсцесса судили визуально по системе баллов "0-4" ("0" - отсутствие изменений на месте инокулята; "1"- отечность подкожной клетчатки, крепитация или рубец на месте абсцесса; "2" -инфильтрат в подкожной клетчатке; "3"- абсцесс возвышается над поверхностью кожи; "4"- некроз кожи над поверхностью абсцесса). Оценку репаративных процессов проводили путем гистологического изучения кожи и подкожной клетчатки в месте абсцесса. На 1, 3, 5, 7 дни по 3 животных из каждой группы забивали декапитацией под эфирным наркозом. Предварительно из абсцесса брали содержимое на предметное стекло в каплю изотонического раствора NaCl на наличие или отсутствие простейших.
При проведении всех экспериментов лабораторные животные содержались на обычном рационе вивария со свободным доступом к воде и пище. Органы и участки кожи с абсцессами, взятые для гистологического исследования, фиксировали в 10% нейтральном формалине, проводили в спиртах возрастающей крепости и заливали в воск-парафин. Срезы толщиной 5-7 мкм окрашивали гематоксилином и эозином. Все гистопрепараты исследовались на микроскопе МБИ-15 на всех режимах увеличения (от 70 до 1000 крат).

Результаты и обсуждение.
В начале эксперимента при изучении противовоспалительной и антибактериальной активности in vivo бактериологически: в анализе гнойного содержимого наблюдалось уменьшение Lactobacillus spp. до 10² КОЕ/г (у интактных крыс до начала эксперимента-7.63-10⁵ КОЕ/г), определялось увеличение количества микроорганизмов Staphylococcus spp., Enterobacteriaceae spp. до 5-10⁹ КОЕ/г в сравнении с микрофлорой интактных животных Staphylococcus spp 3.1 -10² КОЕ/г, Enterobacteriaceae spp до 10² КОЕ/г. Так же высеваются микроорганизмы рода Enterococcus spp. до 103 КОЕ/г, не наблюдавшиеся в нормальной микрофлоре половых органов крыс. В процессе лечения установлено, что при воздействии ЭСС происходит уменьшение количества микроорганизмов рода Enterobacteriaceae spp. до 10² КОЕ/г, Staphylococcus spp. до 5.5-10² КОЕ/г, Enterococcus spp. не высевается; количество Lactobacillus spp. после применения ЭСС возвращается к норме 5.72-10⁵ КОЕ/г. При воздействии препарата сравнения "Клион Д" количество Enterobacteriaceae spp уменьшалось только до 10⁴ КОЕ/г, Staphylococcus spp. до 9.5-10³ КОЕ/г, Enterococcus spp. до 10² КОЕ/г , Lactobacillus spp. 10⁵ КОЕ/г. В контрольных группах количество микроорганизмов практически не изменялось по сравнению с бактериальным посевом после воспроизводства модели.
Проведенное морфологическое исследование показало, что что при введении свечей с ЭСС лабораторным животным, уже на 5 сутки определяется положительная динамика в сравнении с препаратом "Клион Д"; на 7 сутки в опытной группе признаки воспаления не определяются.

Согласно результатам эксперимента, ЭСС обладает выраженным антимикробным и противовоспалительным действием, и по эффективности превосходит препарат сравнения "Клион Д".
При исследовании действия ЭСС на противотрихомонадную активность in vivo во всех группах до введения испытуемых веществ развитие трихомонадного абсцесса мышей на начало эксперимента оценивали по 4-х бальной системе на "4-3" балла. В процессе эксперимента выявили, что на 3 сутки состояние абсцессов в группе животных, которым вводили ЭСС и метронидазол, оценивали на "3-2" балла, в группе с водно-спиртовым раствором - на "4-3" балла, без лечения - на "4" балла. На 5 сутки эксперимента при введении ЭСС выявлена положительная динамика: развитие трихомонадного абсцесса соответствовало "1" баллу, при применении метронидазола - "2" баллам, в группе с водно-спиртовым раствором и без лечения - "3" баллам. При окончании лечения на 7 сутки в группе животных, которые получали ЭСС, наблюдается полное заживление абсцесса (0 баллов), в группе с препаратом сравнения заживление оценили как 1 балл; в контрольных группах без лечения и при введении 3% этанола наблюдается вялая динамика, полного заживления абсцесса на 7 сутки не наблюдается.
Сравнительное гистологическое исследование абсцессов подтвердило данные визуального осмотра.
При бактериологическом исследовании после введения ЭСС отсутствие трихомонад наблюдалось на 5 день введения; после введения препарата метронидазол - на 7 сутки; в контрольной группе и при введении водно-спиртового раствора трихомонады обнаруживались в течение всего эксперимента.

Значит, экстракт соссюреи солончаковой в эксперименте на противотрихомонадное действие in vivo проявил также более выраженные противотрихомонадные свойства, чем препарат сравнения метронидазол.
В экспериментах in vivo при исследовании воздействия на неспецифические и специфические острые воспалительные заболевания женских половых органов экстракта соссюреи солончаковой Saussurea salsa (Pall.) Spreng. выявлено, что он проявил выраженные антибактериальные, противотрихомонадные и противовоспалительные свойства.

Литература:
1. А.Н.Стрижанов, Н.М.Подзолкова Гнойные воспалительные заболевания придатков матки // М.: Медицина. - 1996. - С.9-16.
2. А.А.Воробьев, А.С.Селезнев, Л.А.Павлова и др. Оценка антибактериальной активности масляного экстракта мякоти томатов в эксперименте // Микробиология. - 1998. - № 6. - С.8-11.