Эта работа опубликована в сборнике научных трудов «Актуальные проблемы биологии, медицины и экологии» (2004 год, выпуск 1), под редакцией проф., д.м.н. Ильинских Н.Н. Посмотреть титульный лист сборника

Одним из перспективных направлений современной экспериментальной иммунологии и гематологии является изучение влияния различных эндогенных и экзогенных полипептидов, а также их синтетических аналогов на функционирование иммунокомпетентных клеток, в том числе на стволовые кроветворные клетки (СКК). Перспективность этого не вызывает сомнений, поскольку вопрос об ингибиции пролиферативной активности СКК актуален при состояниях, связанных с повышением уровня гуморального иммунного ответа, например, при аутоиммунных заболеваниях, причиной раз¬вития которых является выработка аутоантител против тканей собс¬твенного организма. Известно, что выработка аутоантител наблюда¬ется в норме и увеличивается при старении организма
В последние годы были описаны ингибиторы гемопоэза пептидной природы – это синтетические продукты, эффективные в минимальных дозах, среди которых ингибитор пролиферации СКК - тетрапептид Ацетил–Сер-Асп-Лиз-Про (acetil-N-Ser-Asp-Lys-Pro, AcSDKP, который впервые был получен из фетальной печени и костного мозга телят Тетрапептид (ТП) обнаруживается  в кроветворных тканях (костный мозг, селезенка) и может быть синтезирован искусственно. Известно, что ТП избирательно ингибирует только пролиферативную активность СКК (КОЕс) и не влияет на остальных предшественников гемопоэза: тетрапептид снижает пролиферативную активность и клоногенность CD34+HLA-DR клеток, а также более примитивных HPP-CFC клеток . Механизм действия прямой и обратимый реализуется in vivo через ингибицию вступления КОЕс в S-фазу (переход G1-S), не влияя на уже находящиеся в цикле клетки. Таким образом, фактически удерживая СКК в G0, предохраняет их от воздействия циклозависимых цитостатиков. Воздействует на мышиные и человеческие стволовые клетки в G0, раннем G0 или G0-S периодах, блокируя действие стимуляторов пролиферации гемопоэтических предшественников.
Целью настоящего исследования было изучение гуморального иммунного ответа на фоне супрессии пролиферативной активности СКК с помощью синтетического ТП.
МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ. Эксперименты проводили на мышах (CBA/C57Bl/6)F1 (самцы и самки) в возрасте 2,5 месяца и мыши СВА 1,5 года, полу¬ченных из питомника РАМН «Столбовая», а также из размноженных в экспериментально-биологической клинике животных ИКИ СО РАМН племенных ядер, полученных из питомника «Столбовая». Тетрапептид Ацетил–Сер-Асп-Лиз-Про был синтезирован в НПО «Вектор» (г.Новосибирск) в соответствии с биохимическим описанием тетрапептида – ингибитора, описанного в оригинальных работах. Тетрапептид в/б водили мышам, начиная с 2-х недельного возраста, ежедневно 12 раз. На 13-е сутки после последнего введения ТП в/в вводили 5% ЭБ (2х108 в 0,5мл забуференного физраствора). Число антителообразующих клеток (АОК) к ЭБ определяли через 72ч. после иммунизации по количеству ло¬кальных зон гемолиза в полужидкой среде модифицированным мето¬дом. Подсчитывали абсолютное число АОК во всей селезенке и их относительное число на 106 ядросодержащих клеток селезенки. Облучение  животных проводилось на аппарате РУМ-25 в дозе 5,5 Гр соответствии  с индивидуальной радиочувствительностью животных используемых линий. при мощности дозы 0,5 Гр/мин, напряжении 130 кВ, силе тока 10 мА, фильтре А1-3. Контрольную группу составляли интактные мыши. Проведено 4 эксперимента, в которых каждая группа содержала по 20 мышей. Полученные данные обработаны статистически с использованием критерия Стьюдента (при р<0,05; р<0,01) и с помощью непараметрического критерия U Вилкоксона¬-Манна-Уитни.
РЕЗУЛЬТАТЫ. В наших исследованиях особенностей иммунопоэза в условиях блокады СКК были использованы экспериментальные подходы, основанные на следующих моментах: ТП селективно ингибирует пролиферацию СКК; уровень пролиферации СКК у мышей повышается в 3-4 раза после сублетального облучения в дозе 5 Гр; гемопоэз у старых мышей отличается увеличе¬нием пролиферативной активности КОЕс в костном мозге; дифференцировка СКК в иммунокомпетентные клетки занимает около 2-х недель. Эти факты обусловили выбор моделей повышенной пролиферации СКК (старые и сублетально облученные мыши), а также – схему введения: ТП в дозе 200нг/мышь вводили 12-ти кратно с целью ингибиции пролиферации СКК – общего предшественника Т- и В-лимфоцитов, что могло привести к уменьшению количества зрелых Т- и В-лимфоцитов. У старых мышей CBA (1,5 года) наблюдали уменьшение числа АОК в 1,7 раза (р<0,01): число АОК в контрольной группе составило 249,68±14,94, в опытной 143,79±10,4. Проведено 5 экспериментов, в которых каждая группа содержала 5 мышей.
    При 15-ти кратном введении ТП в дозе 200нг/мышь после сублетального облучения мышей (CBAxC57B1/6)F1 в возрасте 2,5 мес. наблюдали снижение уровня гуморального иммунного ответа к ЭБ в 2,2 раза: число АОК в контроле составило 155,19±21,38, в опыте 72,5±7,62. Количество АОК к ЭБ определяли на 16-е сутки после облучения. Проведено 3 эксперимента, в которых каждая группа содержала 5 животных.     
    Из полученных данных следует, что у мышей с повышенной пролиферативной активностью СКК (старых и сублетально облученных) тетрапептид ингибирует пролиферацию стволовых клеток, что ведет к снижению уровня продукции ИКК и, как следствие этого, происходит супрессия развития гуморального иммунного ответа к ЭБ, что может использоваться в основе коррекции иммунных нарушений, в частности, повышенного гуморального иммунного ответа при аутоиммунной патологии.