Государственная полярная академия (г.Санкт-Петербург)

Эта статья опубликована сборнике научных трудов "Проблемы и перспективы современной науки" с материалами Четвертой Международной Телеконференции "Фундаментальные науки и практика" - Том 3 - №1. - Томск - 2011.

Определено состояние микробиоценоза кишечника у 89 больных с патологией желчевыводящих путей. Дисбиотические нарушения различной степени выявлены у 96, 6% обследованных лиц. Обнаружены высокие показатели обсемененности  простейшими B. hominis (73,7%) у пациентов. Высокая частота встречаемости дисбиоза толстой кишки и наличие способности к инактивации факторов естественной резистентности хозяина у различных представителей кишечной микрофлоры рассматриваются как причина развития и поддержания воспалительных процессов  желчевыводящих путей.

ВВЕДЕНИЕ
В последние годы выявлены высокие показатели обсемененности B.hominis у лиц различных групп населения. На протяжении последних лет ведется изучение биологии паразита, патогенез этого заболевания. Установлено, что находясь в кишечнике, бластоцисты участвуют в формировании микробиоценоза данного биотопа [F.F. Reinthaler et al., 1988]. Показано, что у 73,7% обследуемых нами лиц выявлялись данные простейшие. Описаны случаи выявления бластоцист у людей со сниженным иммунитетом.
Показана встречаемость условно-патогенных микроорганизмов у больных кишечными инфекциями в условиях колонизации кишечника простейшими Blastocystis hominis. Факторы персистенции условно патогенных бактерий и простейших Blastocystis hominis определяют их селективные преимущества в колонизации биотопов, что имеет важное значение в развитии заболеваний микробной этиологии в инфекционной клинике [О.В. Бухарин, 1994; О.В. Бухарин, Б.Я. Усвяцов, 2001], например, в патологии желчевыводящих путей [С.А. Швецов, 1994].
Учитывая значительную роль кишечной микрофлоры в эндогенном инфицировании, интересным представляется изучение состояния микробиоценоза толстой кишки при различных заболеваниях.
Ранее было показано [А.В. Валышев, Ф.Г. Гильмутдинова, 1998] широкое распространение «антилизоцимного», «антикомплементарного» и «антиинтерферонового» признаков персистенции как  у энтеробактеий [Ф.Г. Гильмутдинова, А.А. Третьяков, 1996], так и у простейших бластоцист, выделенных от пациентов с патологией кишечника и желчевыводящих путей [Н.В. Бугеро, Н.И. Потатуркина-Нестерова, 2009].
В данной работе представлены результаты определения состояния микробиоценоза кишечника и роль персистирующей условно патогенной бактериальной микрофлоры в ассоциациях с простейшими Blastocystis hominis у больных с заболеваниями гепато-билиарной системы.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Обследованы 89 больных, у 37 из них был хронический калькулезный холецистит, у 33 – холедохолитиаз, механическая желтуха, у 19 - хронический резидуальный холангит после реконструктивных операций на желчных путях. Возраст больных от 19 до 84 лет.
 Для получения культур простейших Blastocystis hominis использовали среду Suresh. Выявление бластоцист в препаратах проводили микроскопическими и культуральными методами.
Состояние микробиоценоза кишечника оценивали методом серийных разведений с последующим высевом на соответствующие питательные среды [С.А. Швецов, 1994]. Идентификацию штаммов проводили с помощью коммерческих тест-систем («Lachema, Чехия). Видовую принадлежность устанавливали с использованием компьютерной программы «SECOND 2.11».
Статистическую обработку результатов проводили с использование критерия Стьюдента [И.П. Ашмарин, А.А.Воробьев, 1989].

РЕЗУЛЬТАТЫ
Нарушения нормального микробиоценоза кишечника различной степени выявлены у 86 (96,6%) больных. В группе пациентов с хроническим калькулезным холециститом I степень дисбиоза была отмечена у 35,1 % людей, II  - у 35,1%, III – у 18,9%, VI – у 10,9%. Дисбиотические изменения у 35,1% больных характеризовались снижением содержания бифидобактерий, у 16,2% - изменением количества эшерихий, у 24,3% - повышением содержания условно-патогенных энтеробактерий.
Более значительные отклонения в качественном и количественном составе кишечной микрофлоры обнаружены у 33 больных с холедохолитиазом, механической желтухой. Дисбиотические нарушения I степени выявлены у 3,0 % пациентов, II – у 12,1%, III – 39,4%, VI – у 45,5%. Дефицит бифидобактерий отмечен у 57,6% больных, увеличение общего количества кишечной палочки – у 66,7%, повышение содержания условно патогенной энтеробактерий – у 27,3%.
Наиболее выраженный дисбиоз кишечника был отмечен у пациентов с хроническим резидуальным холангитом после реконструктивных операций на желчных путях: III степень дисбиоза выявлена у 52,6% больных, VI – у 46,4. У 13 больных из 19 (68,4%), многократно оперированных на желчных путях, выявлен бифидодефицитный  дисбиоз. Содержание условно патогенных энтеробактерий в количестве >5 (lg КОЕ/г) наблюдалось у 57,9%.
В ходе проведенных исследований обнаружены высокие показатели обсемененности  простейшими B. hominis (73,7%) обследуемых лиц с различными заболеваниями гепато-билиарной системы. Установлено, что у обследуемых нами лиц встречаемость простейших Blastocystis hominis в монокультуре обнаруживалась лишь в 12-25% случаях. И, напротив, выявлена более высокая частота встречаемости ассоциаций простейших  бластоцист с энтеробактериями (стафилококками, клебсиеллами, кишечной палочкой и др.).
В ходе проделанной работы отмечено 48,7% обследуемых, в кишечнике которых, встречаются бластоцисты, в ассоциации с другими бактериями толстой кишки. Установлено, что степень выраженности дисбиотических нарушений резко возрастает в группах у пациентов, в кишечнике которых обнаружены бластоцисты в ассоциациях с другими энтеробактериями. Наши исследования подтвердили, что избыточная колонизация кишечника простейшими бластоцистами наблюдается обычно при снижении колонизационной резистентности микроорганизмов (прежде всего, при уменьшении количества бифидобактерий и лактобацилл).

ОБСУЖДЕНИЕ
Некоторые анатомические области человеческого тела являются практически стерильными, хотя и находятся в тесном анатомическом контакте с органами, густо заселенными микрофлорой (например, кишечник – печень, ротоглотка – легкое) [С.А. Швецов, 1994]. Стерильность желчных путей связана, во-многом, с барьерной функцией сфинктера Одди, бактерицидными свойствами желчных кислот, секрецией лизоцима, комплемента крови, интерферона [D.E. Jolles, C.L. Bevins, 1993]. Вполне понятно, что для колонизации таких биотопов микроорганизмы должны располагать набором факторов, способствующих инактивации антимикробных субстанций хозяина, т.е факторами персистенции. Подтверждением этому служат данные о наличии персистентных свойств у эшерихий, стафилококков, клебсиелл, простейших  Blastocystis hominis, выделенных из желчных путей больных с острым и хроническим калькулезным холециститом, холангитом, и др.
Снижение колонизационной резистентности и барьерной функции кишечника способствует контаминации микрофлорой толстой кишки верхних отделов желудочно-кишечного тракта и проникновении факультативных микроорганизмов из просвета кишечника во внутренние органы. Наличие факторов персистенции у изолированных штаммов бактерий и простейших бластоцист при дисбиозе кишечника, по-видимому, подтверждают ведущую роль кишечного микробиоценоза в возникновении воспалительных процессов желчевыводящих путей. Вполне правильно считать, что персистирующая дисбиозная условно патогенная микрофлора является источником эндогенного инфицирования внутренних органов.   

ЛИТЕРАТУРА
1.    Ашмарин И.П., Воробьев А.а. Статистические методы в бактериологических исследованиях. – Л., 1989.
2.    Бугеро Н.В., Потатуркина-Нестерова Н.И. Факторы персистенции простейших фекальной флоры при дисбиозе кишечника.//Журн. Вестник нов. мед. технологий. – 2010. - №5. – С. 56-62.
3.    Бухарин О.В. // Журн. Микробиол. – 1994. – Приложение. – С.4-13.
4.    Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я. Бактерионасительство (медико-экологический аспект). – Екатеринбург, 2001.
5.    Валышев А.В., Гильмутдинова Ф.Г.//Журн. Микробиол. – 1998. - №3. – С.96-98.
6.    Гильмутдинова Ф.Г., Третьяков А.А., Валышев А.В.// Актуальные вопросы хирургии.Сб.науч. работ факультетской  хирургической клиники. – Челябинск, 1996. – С. 36-40.
7.    Швецов С.А. Клиническое значение персистентных характеристик характеристик аэробной условно патогенной микрофлоры у больных холециститом. Автореф.дисс. канд. Мед. наук – Пермь, 1994.    
8.    Jolles D.E. Bevins C.L. //J. Biol. Chem. – 1993. – Vol.315, No. 2. – P.187-192.
9.    Reinthaler F.F. et al. Вlastocystis.hominis – intestinal parasit or commensal // Wien.Мed.Wochenschr. – 1988. – V15. – P. 545-552.