Эта работа опубликована в сборнике статей с материалами трудов 2-ой
международной телеконференции "Проблемы и перспективы современной
медицины, биологии и экологии". Название сборника "Фундаментальные
науки и практика Том 1, №2"
Посмотреть обложку сборника
Скачать информацию о сборнике (в архиве: обложка, тит. лист, оглавление, список авторов)
Скачать сборник целиком или по частям можно ЗДЕСЬ
1Харьковский национальный университет им. В.Н.Каразина
2Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины
Холодовой шок эритроцитов человека имеет отличительную особенность явления гемолиза клеток при охлаждении до околонулевых температур - необходимость предварительной экспозиции эритроцитов в гипертонических растворах. Поэтому такой вид стресса эритроцитов человека ещё называют гипертоническим криогемолизом [1].
В условиях гипертонического криогемолиза происходит нарушение барьерной функции мембран, проявляющейся в утечке ионов и лизисе клеток [2]. Чувствительность клеток к подобным стрессовым воздействиям можно направленным образом модифицировать. В частности известно, что в результате предварительной частичной дегидратации устойчивость эритроцитов к гиперосмотическому шоку повышается [3,4]. Ранее полученные данные о способности фенотиазинов, в частности хлорпромазина (ХПР), повышать устойчивость к охлаждению [5] позволяет предположить, что данное соединение могло бы выступать в качестве дополнительного стабилизатора мембраны клеток в условиях гипертонического криогемолиза эритроцитов.
В связи с этим представляло интерес исследовать влияние предварительной дегидратации и ХПР на гипертонический криогемолиз эритроцитов человека. В наших экспериментах эритроциты человека инкубировали в гипертонических средах различного состава (0,15М NaCl+ 0 - 0,9М сахароза) при 37°С, содержащих ХПР (в эффективной концентрации 100мкМ), а затем подвергали действию гипертонического раствора 1,2М NaCl (37°С) и охлаждения до 0°С.
Изучение гипертонического криогемолиза эритроцитов при условии частичной предварительной дегидратации в присутствии хлорпромазина позволило обнаружить антигемолитическое действие данного вещества на клетки (рис.1).
Также обнаружено, что осмолярность среды предобработки является важным параметром в исходе охлаждения. Наименьшие показатели гемолиза наблюдаются при предварительной инкубации эритроцитов, в среде содержащей 0,15М NaCl, 0,3 М сахарозу. Повреждение клеток в этой среде на 10-20% ниже, чем в других средах. Следовательно, можно говорит о осмотически-индуцированной устойчивости эритроцитов к стрессу в данной среде. Механизм, лежащий в основе такого воздействия, возможно, связан с модификацией взаимодействия цитоскелета и липидного бислоя мембраны в области связей белок полосы 3 - анкирин - цитоскелет [6].
При действии гипертонических растворов и низких температур происходит перестройка цитоскелет-мембранного комплекса эритроцитов. Известно, что на характер взаимодействия периферических белков с мембраной могут оказать влияние катионные амфипаты [7]. Полученные данные позволяют предположить, что ХПР способен своеобразно пертурбировать эритроцитарную мембрану изменяя расположение компонентов мембраны и\или цитоскелета, тем самым, оказывая антигемолитическое воздействие в условиях гипертонического криогемолиза.
Список литературы
1. Morris G.J. Cold shock injury - a comprehensive bibliography / Morris G.J., Watson P.F. // Cryoletters. - 1984.- 5.- P.352-372.
2. ШпаковаН.М., Действие хлорпромазина на температурную и осмотическую чувствительность эритроцитов / ШпаковаН.М., БондаренкоВ.А. // Биохимия.-1991.- Т.56, №12.- С.2125-2130.
3. Поздняков В.В. Объёмный сдвиг как фактор, контролирующий осмотическую устойчивость эритроцитов в растворах низкомолекулярных криопротекторов / В.В. Поздняков, В.А. Бондаренко // Сборник научных трудов. Ак. наук Укр ССР Инст. пробл. криобиол. и криомед.– Харьков, 1990. - С.115-123.
4. Бондаренко В.А. Эффекты дегидратации в контроле холодовой и осмотической чувствительности клеток / В.А.Бондаренко, Т.П.Бондаренко, С.В.Руденко // Проблемы криобиологии. - 1992.- №4. - С.14-25.
5. Черницкий Е.А., Воробей А.Б. Структура и функция эритроцитарных мембран.- Минск: Наука и техника, 1981.- 213 с.
6. Рамазанов В.В. Влияние осмотического стресса и модификаторов цитоскелета на развитие холодового и гипертонического шока эритроцитов: Дис. ... канд. биол. наук. – Харьков, 1993. – 100c.
7. Manabu K. p-Chlormerkuribenzoate-induced dissociation of cytoskeletai proteins in red blood cells of rats / Manabu K., Keiko S. and Takashi M. // Biochim Biophys Acta 905(1987) P. 257-267.
