|
Омский государственный педагогический университет Эта работа опубликована в сборнике научных трудов «Актуальные проблемы биологии, медицины и экологии» (2004 год, выпуск 1), под редакцией проф., д.м.н. Ильинских Н.Н. Посмотреть титульный лист сборника
В эксперименте на крысах после создания модели пренатальной хронической алкогольной интоксикации выявляли количественные характеристики нефронов. Обнаружено увеличение площади почечных телец всех генераций. Протективное влияние установлено при использовании комплекса аминокислот в качестве антиоксидантов.
Патологические изменения почек представляют собой довольно частое явление, особенно при воздействии токсических веществ и их метаболитов. К наиболее агрессивным факторам, оказывающим отрицательное воздействие на мочеполовую систему, относится этанол. Существуют многочисленные исследования, доказывающие его выраженный нефротоксический эффект [1,2]. Кроме того, известно, что этанол оказывает повреждающее действие на эмбрион и плод, при попадании в организм беременной женщины [3,4,5].
Однако в изучении морфологических изменений почек при хронической алкогольной интоксикации допускаются противоречивые суждения. Кроме того, проблема действия на организм плода этанола с позиций гисто - и органогенеза ещё не получила достаточного освещения в литературе.
В связи с этим целью настоящей работы явилось изучение повреждающего влияния этанола на почечные тельца нефронов разных генераций с позиций закономерностей нефроногенеза и возможного протективного действия некоторых антиоксидантов.
Материалы и методы исследования: в экспериментальном исследовании были использованы белые лабораторные крысы самки и 57 их потомков. Крысят забивали на 30–й день постнатального онтогенеза. С целью решения поставленной задачи взрослых самок крыс массой 160-180г. подвергали хронической алкогольной интоксикации путем введения в желудок 40 % водного раствора этанола в дозе 4 г/кг массы с помощью специального металлического зонда ежедневно, на протяжении всего срока беременности. Все животные были поделены на 4 группы: 1-ю группу составили контрольные животные, которым интрагастрально вводили физиологический раствор; 2-я группа получала этанол в указанной дозировке; 3-я группа – этанол плюс комплекс аминокислот (глутамат натрия – 50 мг/100 г веса животного; метионин – 70 мг/кг; глицин – 1мг/кг); 4-я – этанол плюс комплекс витаминов (альфа – токоферол – 80 мг/кг; ретинол – 1 мг/кг; аскорбиновую кислоту – 200 мг/кг). Перед забоем животных взвешивали. Крысят умерщвляли при помощи декапитации. Почки взвешивали и фиксировали в 10% нейтральном формалине. Поперечно-срединные парафиновые срезы почки окрашивали гематоксилином Майера и эозином. На парафиновых срезах определяли площадь почечных телец, сосудистых клубочков и мочевого пространства суперфициальной, интракортикальной и юкстамедуллярной зон. Морфометрию почечных телец проводили с помощью окуляр - микрометра МОВ – 1–16 x . Площадь почечных телец и сосудистых клубочков определяли по формуле эллипса: S= (П*А*B)/4, где А – большой диаметр в мкм; В– малый диаметр в мкм. Величину площади мочевого пространства определяли как разность площади почечного тельца и площади сосудистого клубочка. Исходя из однородности исследуемых объектов, в каждой зоне почек измерялся диаметр 50 почечных телец и сосудистых клубочков. Кроме того, высчитывалась относительная масса почек. Статистическая обработка результатов проводилась по общепринятой методике. Оценка достоверности различий между средними величинами проводилась с использованием t-критерия Стьюдента.
Результаты и их обсуждение: анализ изменений массы тела и массы почек животных показал, что пренатальная алкогольная интоксикация приводит к снижению относительной массы почек по отношению к контролю (1.01 ±0.09 и 1.06 ±0.12 соответственно) (табл.1). Несмотря на применение протекторных веществ ( аминокислот и витаминов ) снижение относительной массы почек достоверно нарастает и достигает 0.92 ±0.16 ( Р ≤ 0.05) и 0.92 ±0.12 ( Р ≤ 0.01) соответственно.
Анализ изменений площади почечных телец в 1-й группе показал увеличение этого показателя по направлению к юкстамедуллярной зоне.
При изучении площади почечных телец по сравнению с 1-й группой установлено недостоверное снижение этого показателя во 2-й и 4-й группах и достоверное увеличение его (Р ≤ 0.01) в 3-й группе. Причем этот показатель превышал таковой в контроле во всех зонах (2617.9 ± 193.6; 2717.4 ±90.0; 4067.3 ±233.2 в 3-й группе против 2556.4 ±286.3; 2735.1 ±245.3; 3475.0 ±205.7 в 1-й группе).
Для выявления протективного действия аминокислот и витаминов проводили сравнение площади почечных телец с этим показателем во 2-й группе. Анализ полученных данных показал повышение площади почечных телец в 3-й группе во всех зонах (2617.9 ± 193.6; 2717.4 ±90.0; 4067.3 ±233.2 против 2268.7 ±299.8; 2445.5 ±249.4; 3180.8±229.6). Величина почечных телец увеличивалось в направлении от суперфициальной к юкстамедуллярной зоне, что соответствует нормальному кортико-юкстамедуллярному возрастающему градиенту в нефрогенезе.
Таблица 1 Динамика изменений массы тела и почек у контрольных и опытных крыс X±m | Показатели | Масса тела (г) | Относительная масса почек (%) | | 1-я группа | 44.8±18.03 | 1.06 ±0.12 | | 2-я группа | 58.0 ±9.50 | 1.01±0.09 | | 3-я группа | 61.45±15.00* | 0.92±0.16* | | 4-я группа | 47.30±10.90* | 0.92±0.12** | *–Р ≤ 0.05 **– Р ≤ 0.01
Анализ изменения площади сосудистых клубочков выявил недостоверное уменьшение их в суперфициальной зоне по отношению к контролю во всех вариантах и увеличение этого показателя в интракортикальной зоне. В юкстамедуллярной зоне наблюдалось уменьшение этого показателя после пренатальной алкогольной интоксикации и увеличение его при применении протекторных веществ – аминокислот и витаминов.
По сравнению со 2-й группой выявлено увеличение площади сосудистых клубочков в 3-й и снижение данного показателя в 4-й группе в суперфициальной и интракортикальной и увеличение его в юкстамедуллярной зоне.
В целом отмечается увеличение данного показателя в 3-й группе.
Динамика изменений площади мочевого пространства включает в себя следующие тенденции: достоверное снижение данного показателя по сравнению с контролем во всех зонах в 2-й и 4-й группах ( 571.4 ±67.7; 460.5 ±185.4 (Р ≤ 0.05); 619.0± 130.5 (Р ≤ 0.01); 751.8 ±93.0 (Р ≤ 0.05) соответственно против 762.7± 132.8; 734.6 ±122.2; 979.2 ±129.0) и недостоверное увеличение этого показателя в суперфициальной и юкстамедуллярной зоне в 3-й группе.
Кроме того, изучение защитного действия аминокислот и витаминов установило недостоверное уменьшение площади мочевого пространства в суперфициальной и интракортикальной зонах в 4-й группе и увеличение данного показателя в 3-й группе во всех зонах по сравнению со 2-й ( 848.6 ±33.05 (Р ≤ 0.001); 647.8 ± 166.9 ; 1103.6 ± 120.0 (Р ≤ 0.01) против 571.4 ± 67.7; 460.5 ±185.4; 619.0 ± 130.5).
Таким образом, совокупность количественных изменений площади почечных телец и сосудистых клубочков у нефронов различных генераций показывает, что хроническая пренатальная алкогольная интоксикация у 30-дневных крыс выявляет нарушение закономерностей нефроногенеза. Использование аминокислот оказывает более выраженное защитное действие, чем использование витаминов. Различия в количественных изменениях клубочкового аппарата нефронов разных генераций может быть связано с гетерохронией их развития.
Список использованной литературы:
1. Гукасян А.Т. Хронический алкоголизм и состояние внутренних органов / А.Т Гукасян.-М.: –1968, 321с.
2. Наточин Ю.В. Основы физиологии почки / Ю.В. Наточин.– Ленинград Медицина, 1982.– 208с.
3. Кирющенков А.П. Алкогольный синдром плода / А.П. Кирющенков// Акушерство гинекология .- 1986.- №8.- С.5-7.
4. Лазюк Г.И. Тератология человека/ Г.И Лазюк. М.: Медицина, 1979. С.30-39.
5. Скосырева А.М. Влияние злоупотребления алкоголем на состояние здоровья женщин и их потомства / А.М. Скосырева //Акушерство и гинекология . – 1993.-№2.- С. 48-51.
|
