Пензенский Государственный Университет

 

 Эта работа опубликована в сборнике научных трудов «Проблемы и перспективы современной науки» (выпуск 1), под редакцией проф., д.м.н. Ильинских Н.Н. Посмотреть титульный лист сборника

 

Успехи лучевой терапии (ЛТ), значительно продлевающей и в некоторых случаях даже излечивающей пациентов, ограничены миелотоксичностью данного вида лечения (1). Повреждение гемопоэза проявляется в том числе и снижением числа эффекторных клеток в периферической крови. Наибольшую опасность при миелодепрессии имеет нейтропения (2). Уменьшение тяжести нейтропении является актуальной задачей, решение которой позволит использовать соответствующие схемы и дозы не только лучевой, но и цитостатической терапии (3).
В качестве корректора нейтропении использовалось соединение с антиоксидантной активностью этилметилгидроксипиридина гемисукцинат (ЭГС) – новое производное 3-оксипиридина, близкое по химической структуре к мексидолу. Препарат синтезирован профессором   Л.Д.Смирновым    (институт биохимической физики им. Н.М. Эммануэля Российской Академии Наук).

Цель работы: изучение возможностей коррекции ЭГС изменений нейтрофильного состава периферической крови кроликов при моделировании курса лучевой терапии.

Материалы и методы. Эксперименты выполнены на половозрелых кроликах-самцах породы «шиншилла» массой 3-3,5 кг, содержащихся на стандартном рационе вивария при свободном доступе к воде и пище. Животных 1-ой серии (контроль, n=10) облучали с помощью аппарата АГАТ-«С» разовой очаговой дозой 5 Гр в течение 960 с при мощности дозы 0,0055 Гр/с. Расстояние от источника ионизации до ионизируемой поверхности составляло 90 см. При этом процентная доза равнялась 94%, а максимальная доза ионизации составила 5,31 Гр. Животным 2-ой серии (кролики, n=10) курс ЛТ дополняли одновременным внутривенным введением ЭГС в дозе 5 мг/кг, 1 раз в день, через день в течение 4 недель. Интактным животным (кролики, n=10) по той же схеме вводили 0,85% раствор хлорида натрия. В периферической крови до начала эксперимента, на 8-е, 15-е, 22-е и 29-е сутки определяли общее количество лейкоцитов, абсолютное и относительное количество миелоцитов, метамиелоцитов, палочко- и сегментоядерных нейтрофилов по унифицированным методикам, рассчитывали индекс ядерного сдвига. Кровь для гематологического анализа брали из ушной краевой вены животных.
Статистическую обработку полученных результатов проводили с помощью пакета статистических программ: русифицированная версия программы  STATISTICA (StatSoft – Russia,1999), BIOSTATISTICA (S.A. Glantz, McGraw Hill, перевод на русский язык – «Практика, 1998). Достоверность различий средних арифметических оценивалась с помощью t-критерия Стьюдента Р<0,05 по отношению к исходному результату, Р1<0,05 к результатам контрольной серии.

Результаты и обсуждение. После проведения облучения у животных контрольной серии со стороны лейкоцитов венозной крови регистрировалась глубокая алейкия до 0,66±0,07х103/мкл (Р<0,001) и 0,80±0,10х103/мкл (Р<0,001) на 8-й и 15-й день соответственно после облучения. В последующие 2 недели, вслед за первичным падением, наблюдалось заметное увеличение показателя. В конце опыта 1 мкл крови содержал 3800,00±400,00 лейкоцитов, что было ниже исходных цифр на 33% (Р<0,001).
Через 1 неделю после облучения у животных отмечалась абсолютная нейтропения 0,25±0,06х103/мкл (Р<0,001), что в 9 раз меньше исходных данных), с 6-ти кратным (от 0,13±0,001 до 0,69±0,001(Р<0,001)) увеличением индекса ядерного сдвига. Такое омоложение нейтрофильного состава венозной крови сохранялось и на 15-е сутки опыта. В конце наблюдения было отмечено накопление в крови палочко- и сегментоядерных нейтрофилов до 0,36±0,03х103/мкл (Р<0,001) и 1,77±0,04х103/мкл соответственно (Р<0,001). При наличии тенденции к уменьшению в периферической крови сохранялись миело- и метамиелоциты (0,50±0,17% (Р<0,001) и 3,5±0,27% (Р<0,001) соответственно).
Дополнительное введение ЭГС достоверно не изменяло общее количество лейкоцитов в первые 2 недели после лучевого удара по отношению к контрольной группе - их уровень не превышал 0,85±0,05х103/мкл (Р<0,001), затем на 22-е сутки опыта произошло резкое увеличение до 10,50±0,14х103/мкл (Р<0,001, Р1<0,05), а к концу эксперимента -снижение показателя до исходных цифр (5,84±0,07х103/мкл (Р>0,05)). В серии с применением ЭГС на протяжении всего постлучевого периода в мазках крови присутствовали миелоциты. Численность миелоцитов варьировала в зависимости от этапа эксперимента. В первые 14 дней 1 мкл крови содержал до 18,00±3,00 (Р<0,01) миелоцитов; в период транзиторного подъема и повторного снижения общего количества лейкоцитов синхронно изменялось и абсолютное количество миелоцитов – соответственно, 126,00±13,00 (Р<0,01) (эта величина достоверно превышала уровень миелоцитов контрольной серии) 59,00±15,00 в 1 мкл (Р<0,01). Процентное содержание данных клеток составляло 1,20±0,13% и 1,00±0,26 % соответственно. У животных, получавших ЭГС, в крови также определялись метамиелоциты. Динамика их абсолютного и относительного количества полностью повторяла динамику изменения количества миелоцитов.

*Достоверность отличия с данными интактной группы (Р<0,05).
 На фоне дополнительного ведения ЭГС в первые 14 суток после воздействия радиации в крови животных отмечалась абсолютная палочкоядерная нейтропения с максимальной глубиной 0,053±0,01х103/мкл (в 5 раз меньше первоначального количества, Р<0,001), которая через неделю сменилась абсолютным палочкоядерным нейтрофилезом (1,99±0,06х103/мкл (Р<0,001)). На 29-е сутки в 1 мкл крови определялось до 761,00±30,00 палочкоядерных нейтрофилов (Р<0,001, Р1<0,05). В серии без коррекции отмечался менее выраженный абортивный подъем показателя и большие потери во время повторного снижения численности данных клеток. Содержание сегментоядерных нейтрофилов в венозной крови также уменьшалось после повреждения. Минимальное их количество определялось на 15-е сутки и было почти в 9 раз меньше первоначальной величины (Р<0,001). В конце 3-й недели эксперимента показатель вдвое превысил исходный уровень (Р<0,001, Р1<0,05), еще через 7 дней на 29-е сутки был равен 2,39±0,04 х103/мкл (рис.1). В лейкоцитарной формуле процентное содержание сегментоядерных нейтрофилов на протяжении опыта оставалось достаточно стабильным – не менее 29,00±0,41% и не более 41,00±0,47%. В контрольной серии прослеживалась аналогичная динамика. Индекс ядерного сдвига постоянно повышался и в конце опыта составил 0,39±0,015 (у интактных кроликов 0,13±0,001(Р<0,001)).

Таким образом, соединение ЭГС на фоне моделирования курса ЛТ не вызывает улучшения нейтрофильного состава лейкоцитов в первые две недели после лучевого воздействия и способствует увеличению уровня палочко- и сегментоядерных нейтрофилов в последующие две недели введения соединения, восстанавливает общее количество лейкоцитов через 4 недели после лучевого воздействия. Полученные данные дополняют информацию о фармакодинамических свойствах производных 3-оксипиридина и требуют дальнейшего изучения.

Литература

1. Клиническая онкогематология: Рук-во для врачей // Под. Ред. М.А. Волковой. – М., 2001.
2. Птушкин В.В. // Поддерживающая терапия у онкологических больных: Европейская школа по онкологии. – М., 1996.- с. 45-58.
3. Сакаева Д.Д. // Гематол. и трансфузиол. – 2003. - №5. – 41-49.