Институт клинической кардиологии им. А.Л.Мясникова ФГУ РКНПК

 

Эта работа опубликована в сборнике научных трудов «Проблемы и перспективы современной науки» (выпуск 1), под редакцией проф., д.м.н. Ильинских Н.Н. Посмотреть титульный лист сборника

          Многочисленными исследованиями  было показано ослабление симпатико-адреналовой регуляции обмена и функций  с возрастом (5,6,8,9 ). Это обусловлено снижением синтеза норадреналина (НА), падением содержания НА в крови и замедлением его элиминации из крови, а также  ослаблением симпатических нервных влияний и обратного захвата катехоламинов (КА) адренергическими терминалями. Но наряду с угасанием некоторых функций возникают важные приспособительные механизмы, такие как увеличение содержания адреналина (А) в крови, сохранение скорости элиминации А из крови в ткани, повышение чувствительности тканей к КА в сердце, сосудах, скелетных мышцах и нервных центрах (5,6,8). Установлены также разнонаправленные изменения содержания КА в органах у людей и экспериментальных животных разного возраста.
      Для понимания механизмов приспособительных реакций старческого организма нами проведены исследования на взрослых и старых кроликах.  Целью работы было изучение адренергической иннервации аорты, что включало определение плотности распределения нервных сплетений (ПРНС) и интенсивности люминесценции (ИЛ) КА в них, а также спектрофотометрическое измерение ИЛ КА в мозговом веществе надпочечников у взрослых и старых кроликов.    

Материал и методы исследования .                                                                                 

Работа выполнена на 15 кроликах-самцах породы  Шиншилла. 1-ю группу составили взрослые кролики весом 2,5-3,0 кг в возрасте 18-ти месяцев, n=9. 2 –ю группу – старые кролики весом 4,0-4,5 кг в возрасте  60-ти месяцев, n=9. Изучали адренергическую иннервацию дорзальной и вентральной стенок аорты в следующих отделах: грудном на уровне 4-ой - 5-ой межреберных артерий и брюшном в области отхождения почечных артерий. Для гистохимического выявления КА в нервных сплетениях применяли инкубацию срезов в 2% растворе глиоксиловой кислоты с добавлением понтамина небесно-голубого ( 7 ).   
    Количественные нейрогистохимические исследования включали определение плотности распределения нервных сплетений (ПРНС) с применением планиметрической окулярной сетки по способу Стропуса (3 ) и спектрофотометрическое изучение интенсивности люминесценции  катехоламинов (ИЛ КА) в терминалях и хромаффиноцитах мозгового вещества надпочечников с помощью спектрофотометрической насадки ФМЭЛ-1А ( 1 ). Цифровые данные обрабатывали с использованием критерия t Стьюдента.

Результаты  исследований и их обсуждение           
     Во всех изученных участках аорты кроликов адренергические нервные терминали обнаружены, главным образом, в глубоких слоях адвентиции в составе перимускулярного сплетения, куда они проникают в составе нервных пучков по ходу кровеносных сосудов или самостоятельно. Отдельные терминали доходят до средней трети мышечно- эластического слоя по  “vasa vasorum”.
           Количественное гистофлуоресцентное определение плотности распределения нервных сплетений (ПРНС) в аорте кроликов выявило закономерности их распределения по ее протяжению (таблица 1). Так было установлено, что значения ПРНС в грудном ее отделе достоверно выше показателей брюшного отдела, как у взрослых, так и у старых животных. Интенсивность люминесценции катехоламинов (ИЛ КА) в адренергических нервных сплетениях грудного отдела аорты также была статистически значимо выше подобных показателей брюшного отдела.                 

 

Таблица 1

Показатели плотности распределения (ПРНС) и интенсивности люминесценции

катехоламинов (ИЛ КА) в нервных перимускулярных адренергических  волокнах

 аорты взрослых и старых интактных кроликов          M ± m

Группы Кроликов	Грудной отдел  аорты                   Г		Брюшной отдел аорты                         Б
	ПРНС    %	ИЛ КА отн.  ед.	ПРНС    %	ИЛ КА отн. ед.
1 Контроль    взрослый         2,5 кг    n = 6	Г-1   30,0  ± 1,6	Г-1   11,0  ±  0,9	Б-1   7,7  ±  0,6*	Б-1   7,3  ±  0,3*
2 Контроль    старый          4,5 кг    n = 9	Г-2   20,4 ± 1,0**	Г-2   12,6  ±  0,7	Б-2   4,2±0,2* **	Б-2   7,5 ± 0,4*
Значения Р	Г-1--- Г-2    < 0,001		Г-1--- Б-1 < 0,001 Г-2--- Б-2 < 0,001 Б-1--- Б-2 <0,001	Г-1--- Б-1 <0,01 Г-2--- Б-2 < 0,001

 

Примечание: * - достоверно по сравнению с показателями грудного отдела                    

 ** - достоверно по сравнению с показателями 1-ой контрольной группы

                                                                                 

Таблица 2

Относительный вес надпочечников и интенсивность люминесценции катехоламинов

(ИЛ  КА) в мозговом веществе железы у взрослых и старых интактных   кроликов      M ± m

 

Группы      кроликов	Вес кролика                        при забое                    (кг)	Средний     относительный            вес надпочечника (мг/кг)	ИЛ КА    в  мозговом       веществе надпочечника                ( отн.ед. )
Контроль взрослый     n = 6	2,593 ± 0,177	65,22 ± 5,65	8,3 ± 0,2
Контроль старый         n = 9	4,330 ± 0,195	69,70 ± 6,53	5,8 ± 0,6
Значения  Р	< 0,001	< 0,1	<0,001

.

      Возрастные изменения в иннервации аорты у старых кроликов проявились в достоверном снижении  показателей ПРНС как в грудном отделе аорты, так и в брюшном. ИЛ КА в адренергических волокнах  обоих отделов с возрастом практитчески не изменялась.
      Вместе с тем при сравнительном изучении возрастных изменений функционального состояния надпочечников в группах взрослых и старых кроликов (таблица 2) не было выявлено изменения значения относительного веса надпочечников с возрастом. При спектрофотометрическом изучении активности хромаффиноцитов в медулле железы было определено статистически значимое снижение показателей ИЛ КА в мозговом веществе надпочечников старых животных по сравнению со взрослыми (8,3±0,2 отн. ед. – у взрослых кроликов и 5,8±0,6 отн.ед. – у старых животных, р<0,001).
                                                                                                
     Необходимо отметить, что у животных в мозговом веществе надпочечников клеточный диморфизм (наличие А- и НАпродуцирующих клеток) определяется видовыми особенностями: у кроликов норадреналинсинтезирующих клеток не выявлено, все хромаффиноциты синтезируют адреналин, поэтому мы можем говорить о снижении содержания А в надпочечниках старых кроликов (2, 10).      
     Аналогичные результаты были получены в исследованиях Фролькис  и соавт. (5, 6). Достоверное снижение содержания адреналина (А) в надпочечниках у старых людей и крыс, увеличение его содержания в крови авторы связывали с повышенным выходом гормона из хромаффинных гранул медуллы железы. В условиях ослабления нервных адренергических влияний, опосредованных через НА, изменения в обмене А они рассматривали как   приспособительную реакцию организма.
     Полученные нами уменьшения показателей ПРНС в аорте старых кроликов могут отражать снижение общего уровня адренергической регуляции тканевых процессов, свидетельствовать об ослаблении нервных симпатических влияний на различные ткани в старости. Эти изменения, по-видимому, связаны прежде всего с деструкцией части симпатических терминалей и сдвигами в обмене  НА, снижении его биосинтеза. Результаты наших исследований согласуются  также с данными, полученными Швалевым и соавт. ( 8 ), установившими феномен ранней инволюции симпатической иннервации сердца человека в норме.
    Пфлюгхаупт и соат. (9), изучая изменения активности вегетативной нервной системы с возрастом отмечали снижение активности  парасимпатической нервной системы у пожилых , в частности, уменьшение высвобождения ацетилхолина в сердце. Выявленные  изменения, как заключают авторы, снижают адаптационную способность организма, поэтому анестезиологам и другим специалистам следует учитывать это при лечении пожилых пациентов.  

ВЫВОДЫ
  1. Таким образом, проведенные нами исследования на интактных взрослых и старых кроликах выявили возрастные изменения иннервации аорты, проявляющиеся в достоверном снижении показателей ПРНС как в грудном отделе аорты, так и в брюшном. ИЛ КА в адренергических терминалях обоих
отделов с возрастом практически не изменялась.
2. При сравнительном изучении возрастных изменений функционального состояния надпочечников в группах взрослых и старых кроликов было показано статистически значимое снижение показателей ИЛ КА в хромаффиноцитах мозгового вещества надпочечников.

ЛИТЕРАТУРА
1. Аникин А.Ю., Золотухина Т.Ю. Микроспектрофотометрическое исследование катехоламинов в сердце кролика и человека.//Архив АГЭ.-1991.-Т.100, № 2.-     С. 83-86.
2. Кацнельсон З.С., Стабровский Е.М. Гистология и биохимия хромаффинной ткани надпочечников.// Л. “Медицина”. – 222 С.
3. Стропус Р.А. и др. Применение точечного метода для количественного изучения нервных структур.//В кн.: Общие закономерности морфогенеза и регенерации: Тез. докл.2-ой науч. конф. АГЭ Лит. ССР-Каунас.- 1976.- С. 68.
4. Тявокин В.В. Гиподинамия и сердечно-сосудистая система.//Саранск.-1975.-215 С.
5. Фролькис В.В., Богацкая Л.Н., Верхратский Н.С., Воронков Г.С. Содержание и обмен катехоламинов в старости.// Проблемы эндокринологии.- 1975.- № 2.-    С. 32-38.
6. Фролькис В.В. Нейрогуморальные механизмы развития патологии сердечно-сосудистой системы при старении.//Вестн. Акад. мед. Наук СССР.- 1980.- № 3.-С. 16-22.
7. Швалев В.Н., Жучкова Н.И. Способ выявления адренергических нервных элементов глиоксиловым методом с использованием понтамина небесно-голубого.//Архив АГЭ.-1990.- Т. 98.- № 3.- С. 85-86.
8. Швалев В.Н., Сосунов А.А., Гуски Г. Морфологические основы иннервации сердца.// М., 1992.- 368 С.
9. Pflughaupt M., Koch T., Hubler M. Veranderungen des vegetativen Nervensystems im Laufe des Lebens. // Anasthesiol. Und Intensivmed. – 2006. – V.47. - № 6. – Р.330-340.
10 .Unsicker Klaus, Huber Katrin, Schutz Gunther, Kalcheim Chaya. The chromaffin cell and its development.// Neurochem. Res. – 2005. – V. 30. - № 6.- P.921-925.