Читинская государственная медицинская академия (г. Чита)

Бруцеллез - самая распространенная зоонозная болезнь во всем мире с более чем 500000 новых случаев заболевания человека ежегодно. [16]Патогенными для человека являются Brucellamelitensis,  B.abortus, B.suis, B.canis.

К факторам патогенности бруцелл относят  секреторную систему бактерий[см. на примере источника 18], антиоксиданты (способствующие внутриклеточному паразитизму), липазу, гиалуронидазу, нейраминидазу, ЛПС (липополисахарид).Бруцеллы являются факультативными (т.е. сами в клетки проходить не способны) внутриклеточ-ными патогенами, вызывающими хроническую изнурительную инфекцию.На разных стадиях заболевания в патологический процесс вовлекаются практически все органы и системы человека.  Органные поражения носят стойкий характер; под влиянием раз-личных провоцирующих факторов возникают частые рецидивы бо¬лезни. [2]

При хроническом бруцеллезе превалируют воспалительные измене¬ния пролифератив-но-гранулематозного характера. [2, 15]Воспа¬ление завершается развитием склеротиче-ской ткани. [3, 4]Гранулемы формируются в соединительнотканных прослой¬ках паренхиматозных органов, суставах, позвоночнике,мышцах и других тканях.  Центр гранулемы состоит из пораженных бруцелламимакрофагов (клетках с МНСIи MHCIIклассов); описано присутствие CD4+ клеток (Т-хелперов - Th), а ближе к периферии  в меньшем числе  CD8+ (Тс), тучных клеток ифибробластов.

Гранулемы, формирующиеся «на пике» развития бруцеллеза (в модели бруцеллеза мышей),ограничивают как распространение бактерий, так и повреждение тка-ней.Гранулемы в печени и селезенке мышей, инфицированных B.melitensis в основном состояли из  клеток фенотипа  CD11b+F4/80+MHCII+ (активированных макрофагов), экспрессирующихiNOS/NOS2   [молекулы F4/80 – маркеры клеток миелоидного ростка; iNOS–индуцированнаяNO-синтаза]. Часть клеток регистрировалась с маркером CD11cи была аналогична воспалительным дендритным клеткам (ДК). [12]Контроль роста  бруцеллДК-ми зависел от наличия молекул  MyD88, IL-12p35 и интерферона-гамма  (ИФ-гамма).  ДК с поверхностными молекулами CD11c и CD205 были резервуаром бруцелл. [12] 

Фагоцитоз.Мыши без нейтрофилов (линия Genista) быстрее избавляются от бруцелл. [10] Нейтрофилы, предположительно, конкурируют с ДК и макрофагами за поглощение антигенов, препятствуют созреванию моноцитарных ДК. [10]  У мышей без нейтрофи-лов активнее клеточный иммунный ответ (больше антигена), меньше бруцелл в организме, выше продукция ФНО-альфа (фактора некроза опухолей-альфа) и ИФ-гамма. [10]В моде¬ли бруцеллеза  мышей описано снижение активности нейтрофи-лов.[6]По данным [3]захватывающая способностьфагоцитов не страдает, а кисло-родзависимыйкиллинг даже усиливается. 

ЕКК(естественные клеткикиллеры; NK).У больных с острым бруцеллезом содержание CD16+ ЕКК  в крови соответствует норме; далее активность клеток снижаетсяи при перевесе Th2-зависимого (гуморального) иммунного ответа отмечаетсясупрессияNKклеток. [3]Согласно иным источникам количество  ЕКК резко растет  [8]; данный факт ориентировочно (поскольку активность клеток авторами работы не исследована) свидетельствует о повышении защиты: ЕКК помимо киллинго-вой активности (в отношении пораженных бруцеллами клеток/без HLAI/) являются и основным источникомИФ-гамма, также играющего защитную роль.

Иммунитет. Спонтанное выздоровление от бруцеллеза наблюдается очень ред¬ко. [3]У переболевших людей не только не формируется специфический иммунитет, но, напротив, повышается чувствительность организ¬ма к возбудителю и возможность ре- и суперинфекции. [2]

Антигены бруцелл можно разделить на две группы – ЛПС (липополисахариды) и белки. Белки менее иммуногенны, чем ЛПС.  но способны запускать Т-лимфоцит-опосредованный иммунный ответ. ЛПС бруцелл- сильный митоген для В-лимфоцитов (т.е. способствуют перевесу гуморального иммунитета, выгодному бактериям), хотя-общий уровень иммуноглобулинов (Ig) у больных в пределах нормы. [3]

Описан лимфоцитоз (от 37 до 55% при норме 20-35% по лейкоцитарной формуле). В модели на мышах по мере прогрессирования заболевания снижается содержание и  происходит  угнетение  функции Т-лимфоцитов, коррелирующее с тяжестью заболева-ния. [6]

Клеточный  иммунитет протективен [12]: Т-киллеры(TcиTh) убивают пораженные клетки (неэффективные макрофаги).[13] Активная работа клеточного иммунитета сопровождается ростом уровняTh1-цитокинов [ФНО-альфа, ИЛ-2, ИФ-гамма],  интер-лейкина-1 (ИЛ-1), ИЛ-6, ИЛ-12, М-КСФ (моноцитарного колониестимулирующего фактора), Г-КСФ (гранулоцитарногоколониестимулирующего фактора). Искусственное истощение ФНО-альфа отягощает состояние животных. У мышей с выключенными генами ИЛ-12 и ИФ-гамма (IL-12-/- и IFN-γ-/-) высокая восприимчивость к бруцеллезу. [12]  Стимуляциялейкоцитов интерфероном-гамма ведет к завершенности фагоцитоза, однако вирулентные штаммы бруцелл  все-же выживают и паразитируют в фагосомах макрофагов и ДК. [17] Основными факторами защиты считаются Th1 (продуценты ИФ-гамма) и ДК с iNOS. [12] Активация данных клеток возможна через Toll-подобные рецепторы (TLR) 4 и TLR9, ассоциированные с адаптерным MyD88 белком. [11] При сниженной активности Th1 ДК становятся резервуаром бруцелл. [12] 

Гуморальный иммунитет. Согласно классическим представлениям иммунологии IgA должны блокировать вход бактерий со стороны слизистых оболочек; молекулы данного класса фагоцитоз не опосредуют; IgM только в крови; опсоническиеIgGзапускают фагоцитоз бактерий нейтрофилами и макрофагами (нейтрофилы за счет мощного  радикалообразованиядолжны убивать бактерии; макрофаги /со слабым радикальным фоном/ чаще характеризуются незавершенным фагоцитозом). Протективна роль антител (IgA) только на слизистых оболочках (частично предотвращающих вход бруцелл).Присутствие IgM к антигенам бруцелл характеризует начальную и острую стадию заболевания; при хронической инфекции IgM часто отсутствуют. Протективная роль IgМ против ЛПС показана только при первичной инфекции [ЛПС - тимуснезави-симый антиген].  

Устойчиво сниженный уровень IgG к бруцеллам наблюдается при бруцеллезе без рецидивов; при рецидивах же уровень выше. [14]  IgG отсутствует у больных с резиду-альной[т.е. с остаточными явлениями] формой  бруцеллеза,  а также у лиц со стойким клиническим излечением. [2]  Обострение хронической формы заболевания характери-зуется ростом,  в основном, уровня специфических IgG и IgA. [5] У выздоравливающих специфические IgG отсутствуют [2] (вероятнее из-за появления неполных антител, выявляемых только в реакции Кумбса).Можно предположить, что в силу негативной роли IgG[опсонизация бактерий  антителами класса IgG приводит к более активному фагоцитозу, выгодному для бруцелл] плазматические клетки человека адаптивно, видимо через несколько лет (постепенно перестраиваясьэпигенетически /перебирая варианты/) начинают синте¬зировать неполные («моновалентные»)IgG, эффекторные функции которых резко снижены. Brucellaabortus имеют FcR[13] и возможно поэтому менее вирулентны для человека.

Описаны асимметричные IgG (асIgG), являющиеся антиген-блокирующими из-за наличия олигосахаридного остатка, богатого маннозой, в одном из Fab фрагментов молекулы. Такие антитела не способны запускать фагоцитоз /?/. ИЛ-6 усиливает синтез асIgG. [9]Выявляемый уровень циркулирующих иммунных комплексовбольше при подостром бруцеллезе (при остром не отличается от нормы). [3]

К типичным отклонениям в анализе крови относят повышенную СОЭ, лейкопению, моноцитоз, лимфоцитоз, появление атипичных лимфоцитов, рост трансаминаз (АЛТ, АСТ). Против диагноза свидетельствуют лейкоцитоз, эозинофилия, лимфопения.

Иммунная природа воспаления обусловливает системный характер морфопатогенети-ческих изменений. [4]ЛПС бруцелл стимулирует антителообразование. Доминирование Th2 (т.е. гуморального иммунного ответа) при бруцеллезе небла¬гоприятно для больно-го. [1]Бруцеллез трудно поддается лечению антибиотиками. Нет безопасных и эффек-тивных вакцин для профилактики заболевания. [12] Предлагаются вакцины с иммуно-супрессантами (для индукции толерантности) – т.н. толерантные вакцины. Вакцина  из штамма Br.abortus 82,  обладающая иммунодепрессивным эффектом, вызывает 100-кратное снижение проли¬феративной активности лимфоцитов). [7]Вероятно можно использовать в лечении  и антиидиотипические вакцины.

 

Литература

1. Игнатов П.Е.  Иммунитет и инфекция. - М.: Время, 2002.- 352 с.

2. Иммунология бактериальных инфекций. Руководство для врачей. / Под ред. В.И.Покровского, Д.А.Адамбекова, В.И.Литвинова: Т.1 - Москва, Бишкек,1994. - 356с.

3. Курманова Г.М., Дуйсенова А.К. и др. Оценка иммунного статуса при бруцеллезе // Методические рекомендации. Алматы, 2002. - 30 с.

4. Лучшев В.И. Бруцеллез // Российский медицинский журнал. - 2004. - N 1. - С. 42-46.

5. Магомедова Д.А. Патогенетическое и прогностическое значение клинико-иммунологических показателей при бруцеллезе. - Авт. ... к.м.н. - М., 1996. – 27 с.

6. Малецкая О.В. Влияние иммуномодулирующих препаратов на эффективность этиотропной терапии при экспериментальном хроническом бруцеллезе // Иммуно-логия.- 2003. - N 3. - С. 182-184.

7. Разумовская В.В. Иммунный ответ у крупного рогатого скота и овец на противо-бруцеллезные вакцины при экспериментальной инфекции ВЛКРС. - Авт. ... к.в.н. - Новосибирск, 1992. – 25 с. 

8. Тезисы  докладов  VIII Всерос.  форума с международнымучастием // Медицинская иммунология.  - 2004.  - Т. 6, N 3-5. - С. 299.

9. Apicella C., Custidiano A., Miranda S. et al. Differential macrophage modulation of asymmetric IgG antibody synthesis  by soluble or particulate stimuli // Immunol. Lett. – 2006. – V. 103, N 2. – P. 177-185.

10. Barquero-Calvo E., Martirosyan A., Ordoñez-Rueda  et al.  Neutrophilsexert a suppressive effect on Th1 responses to intracellular pathogen Brucellaabortus //PLoS pathogens. - 2013. - Т.9, № 2. - С. e1003167. [Электронный ресурс –  http://journals.plos.org/plospathogens/article?id=10.1371/journal.ppat.1003167 ]

11. Copin R., De Baetselier P., Carlier  et al. MyD88-dependent activation of B220− CD11b+ LY-6C+ dendritic cells during Brucellamelitensis infection // The Journal of immunology. - 2007. - Т.178, № 8.- С. 5182-5191.

12. Copin, R., Vitry, M. A., Mambres et al.  In situ microscopy analysis reveals local innate immune response developed around Brucella infected cells in resistant and susceptible mice // PLoS pathogens. - 2012. - Т.8, № 3. - С. e1002575.      http://journals.plos.org/plospathogens/article?id=10.1371/journal.ppat.1002575

13. Encyclopedia of Immunology.  - V. 1. - Academic Press, 1998. – 657 p.

14. Gazapo E., Gonzalez L.J., Subiza J.L.  et al.  Changes in IgM and IgG antibody concentra-tions in brucellosis over time: importance for diagnosis and follow-up //  J. Infect. Dis. - 1989. - V.159, N 2. - P. 219-225.

15. Infectious Diseases.  – Philadelphia. - 2004. – 10000 p.

16. Pappas G., Papadimitriou P., Akritidis N. et al. The new global map of human brucellosis // The Lancet infectious diseases. – 2006. – Т. 6. – №. 2. – С. 91-99.

17. Roop M.R., Bellaire B.H., Valdera M.W. et al. Adaptation of the brucellae to their intracellular niche // Molecular Microbiology. – 2004. – V. 52, Issue 3, P. 621–630.