Воронежский государственный университет

Эта работа опубликована в сборнике научных трудов «Естествознание и гуманизм» (2006 год, Том 3, выпуск 2), под редакцией проф., д.б.н. Ильинских Н.Н. Посмотреть титульный лист сборника

Определен уровень клеток с микроядрами в плоском эпителии, полученном методом соскоба с шейки матки женщин детородного возраста при различных физиоло-гических состояниях: 1 и 2 стадии менструального цикла (до и после овуляции), в период ношения внутриматочных контрацептивов, при беременности и кормлении грудью, нарушениях менструального цикла. Уровень клеток с микроядрами у женщин на фоне воспаления оказался достоверно повышенным в сравнении с таковым при отсутствии воспаления. Предлагается использовать показатель встречаемости клеток с микроядрами в качестве дополнительного критерия для диагностики воспа-лительных процессов в шейке матки.
Ключевые слова: микроядерный тест, плоский эпителий, менструальный цикл, беременность, кормление грудью, внутриматочный контрацептив, воспаление.
Женский организм представляет собой сложную многогранную систему, живущую по определенным законам. Под действием эндогенных и экзогенных факторов в этой системе часто происходят сбои, ведущие к функциональным расстройствам и, как следствие, к возникновению заболеваний. Обязательным условием эффективной терапии заболеваний гинекологической сферы является раннее их выявление. В настоящее время для профилактического обследования применяется цитологический анализ клеток плоского эпителия, полученных методом соскоба с шейки матки (Хмельницкий, 1994). Плоский эпителий, выстилающий поверхность влагалища и влага-лищную часть шейки матки, наиболее быстро реагирует на изменившиеся условия внешней и внутренней среды, которые могут приводить к изменению ядерных струк-тур и образованию микроядер. Эффективным методом анализа такого рода изменений является микроядерный тест, что обусловлено простотой и доступностью полу-чения материала для исследований, а также легкостью выполнения микроядерного теста в техническом отношении.  Крупные размеры клеток плоского эпителия, имеющих обширную цитоплазму, обеспечивают хорошую просматриваемость и точность определения микроядер. Микроядра в эксфолиативных клетках здорового организма встречаются в количестве 0 – 0,3 % (Нерсесян, 1996) и образуются в следующих случаях: 1) в поздней телофазе из ацентрических фрагментов и целых от-ставших хромосом; 2) при многополюсном митозе, когда ядерный материал неравномерно распределяется между дочерними клетками; 3) в первой стадии апоптоза клеток (кариорексисе) (Ильинских и др., 1992). Все перечисленные механизмы присутствуют в клетках здорового организма. При патологических состояниях в ткани их количество увеличивается, поэтому возрастает уровень клеток с микроядрами.
В данной работе проведено изучение уровня клеток с микроядрами при некоторых физиологических состояниях организма женщин (в 1 и 2 стадиях менструального цикла (до и после овуляции), при нарушении менструального цикла, в период ношения внутриматочных контрацептивов (ВМК), при беременности и кормлении гру-дью) в норме и при наличии признаков воспаления.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ
Сбор материала плоского эпителия, полученного методом соскоба с шейки матки женщин детородного возраста при различных функциональных состояниях орга-низма, осуществляли на базе МУЗ «Городская поликлиника № 4» Коминтерновского района г. Воронежа. В каждой категории (в 1 и 2 стадиях менструального цикла (до и после овуляции), при нарушении менструального цикла, в период ношения ВМК, при беременности и кормлении грудью) обследованные женщины были разбиты на 2 группы, исходя из отсутствия или наличия цитологических признаков воспаления в мазках. Диагностику воспаления проводили согласно рекомендациям, изло-женным в работе Мельника (1983) и Шиллер-Волковой с соавторами (1994). Материал собирали у замужних женщин в возрасте 20 – 25 лет, с отсутствием сопутствую-щих наследственных и хронических заболеваний женской половой сферы и острых заболеваний как местного, так общего характера, с I группой крови   (система АВ0), резус-положительных, с отсутствием вредных привычек (алкоголизм, табакокурение, наркомания), количество беременностей – не более 2-х, имеющих 1 ребенка, не принимающих гормональные препараты. Обследованные женщины проживают на территории Северного микрорайона г. Воронежа, где отсутствуют крупные промыш-ленные предприятия и другие источники загрязнения, поэтому можно говорить, что цитогенетические эффекты обусловлены  эндогенными причинами, а не загрязне-нием окружающей среды. Отделяемое шейки матки, полученное методом соскоба при гинекологическом осмотре, окрашенное азур-эозином после фиксации по Лейш-ману просматривали на микроскопе Axiostar plus (Carl Zeiss, Jena), при увеличении 100х2,5х10. Методика фиксации и окраски изложены в работе Шиллер-Волковой с соавторами (1994). На каждом препарате анализировали не менее 1000 клеток. Пригодными для исследования считали участки с монослоем клеток, что обеспечивало хорошую просматриваемость цитоплазмы изучаемых клеток. Микроядра идентифицировали как округлые тельца, расположенные в цитоплазме клетки с целой оболоч-кой, в одном оптическом поле зрения с ядром, одинаковые с ним по цвету и структуре хроматина, с четко очерченными границами и полностью отделенные от ядра.
Статистическую обработку данных проводили на ПЭВМ с помощью пакета статистических программ «Stadia». Процедура группировки данных и их обработка изло-жены в работе Кулаичева (1996). Сравнение выборок по частоте встречаемости клеток с микроядрами в плоском эпителии осуществляли по непараметрическому Х-критерию рангов Ван-дер-Вардена. Так как частота встречаемости клеток с микроядрами – признак, для которого характерно ненормальное распределение, то выборки сравнивали не по абсолютным значениям, а по медианам, которые в данном случае являются более точным показателем выборки.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Частота встречаемости клеток с микроядрами в плоском эпителии шейки матки обследованных групп женщин и 95 % доверительный интервал исследуемого цитоге-нетического показателя, который оценивает пределы варьирования критерия при изученных физиологических состояниях, представлены в таблице.

Таблица

Встречаемость клеток с микроядрами в клетках плоского эпителия отделяемого шейки матки женщин детородного возраста при различных физиологических состояниях и на фоне воспаления

Обозначения:

* - различия с группой женщин с воспалением достоверны (P<0,05);

** - различия с группой женщин с воспалением достоверны (P<0,01);

*** - различия с группой женщин с воспалением достоверны (P<0,001).

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1.    Ильинских Н.Н., Новицкий В.В., Ванчугова Н.Н. и др.  Микроядерный анализ и цитогенетическая нестабильность . Томск: Изд – во Томского университета, 1992   .
2.    Кулаичев А.П. Методы и средства анализа данных в операционной среде Windows. Stadia 6.0.  М.: Информатика и компьютеры, 1996.
3.    Мельник А.Н. Цитологическая диагностика опухолей. Киев: Здоровье, 1983.
4.    Нерсесян А.Н. // Цитология и генетика. 1996. Т. 30, № 5. С. 91 – 95.
5.    Хмельницкий Патоморфологическая диагностика гинекологических заболеваний. Руководство. СПб.: Сотис, 1994. С. 51 – 71.
6.    Шиллер-Волкова Н.Н., Никитина Н.Н., Агамова К.А. и др. Цитологическая диагностика злокачественных новообразований. Атлас. М.: Медицина, 1994. С. 9 – 10, 21 – 22, 63 – 67.