Авторы: Тупикин А.Е. (1), Смагулова Ф.О. (1), Трещенков Э.А. (2), Жабин С.Г. (2), Нагайцев В.М. (3), Бондарь А.А. (1), Морозов И.В. (1)

1. Новосибирский институт биоорганической химии СО РАН, г. Новосибирск; 2. Зональный перинатальный центр, г. Новокузнецк; 3. Сибирский институт репродукции и генетики человека, г. Барнаул

Эта работа опубликована в сборнике "НАУКИ О ЧЕЛОВЕКЕ" – Сборник статей молодых ученых и специалистов /Под ред. Л.М. Огородова, Л.В. Капилевич. – Томск, СГМУ.- 2002.-254 с.

Скачать сборник целиком

Проблема бесплодия встречается примерно у 15% супружеских пар, причем в 40-50% этих случаев бесплодие обусловлено тем, что у мужчин происходят количественные и/или качественные нарушения сперматогенеза. Среди генетических причин мужского бесплодия наиболее частыми являются аномалии кариотипа и микроделеции длинного плеча Y-хромосомы. Частота встречаемости микроделеций у бесплодных мужчин с азооспермией и тяжелой формой олигозооспермии по данным разных исследований варьирует от 1% до 55%. При помощи STS-маркеров в эухроматиновом участке длинного плеча Y-хромосомы (Yq11) картированы три неперекрыващихся локуса, ассоциированных с азооспермией (AZF): AZFa, AZFb и AZFc. В каждом из них идентифицирован ген, предположительно считающийся "фактором азооспермии" - DFFRY в AZFa, RBM в AZFb и DAZ в AZFc. Степень нарушения сперматогенеза зависит от положения и размера выявленных микроделеций, поэтому отсутствие или наличие микроделеций имеет прогностическое значение при лечении бесплодия методами вспомогательной репродуктивной технологии (ВРТ). Также информация о наличии микроделеций полезна для медико-генетического консультирования пациентов при планировании семьи, поскольку при использовании ВРТ известны случаи передачи микроделеций Y-хромосомы от отца к ребенку мужского пола.
Задачами настоящей работы является определение частоты встречаемости и характер микроделеций в локусах AZFa, AZFb и AZFc Y-хромосомы у мужчин с азоо- и олигозооспермией, а также выявление, по возможности, зависимости степени нарушения сперматогенеза от размера и положения делеций.
Для осуществления поиска микроделеций нами проводится создание банка ДНК бесплодных мужчин с необструктивной азооспермией и олигозооспермией различной степени тяжести, проживающих в азиатской части России (Кемеровская и Новосибирская области, Алтайский край), который насчитывает в данный момент около 40 образцов. В настоящее время самым простым и надежным методом детекции микроделеций является мультиплексная полимеразная цепная реакция с одновременным использованием в одной реакционной смеси праймеров для нескольких STS-маркеров, фланкирующих три локуса AZF. Для данной работы были выбраны следующие STS-маркеры: sY238(ген ZFY) и sY14(ген SRY) - контрольные маркеры (первый - для контроля присутствия в образце обеих половых хромосом X и Y, второй - короткого плеча Y-хромосомы); sY82 и sY85^ DFFRY) - локус AZFa; sY127 и sY134 - локус AZFb; sY254(ген DAZ) и sY255^ DAZ) - локус AZFc. К настоящему времени подобраны условия для одновременной детекции микроделеций в двух локусах AZFb и AZFc. Так, в результате анализа по этим локусам образцов ДНК 13 пациентов с необструктивной азооспермией Зонального перинатального центра (г. Новокузнецк) выяснилось, что один из них имеет делецию обоих локусов. Таким образом, частота микроделеций у бесплодных мужчин по предварительным данным составляет примерно 7-8%. В дальнейшем планируется: расширить коллекцию ДНК бесплодных мужчин, как по количеству образцов, так и по географии регионов; увеличить число используемых STS-маркеров; изучить молекулярно-биологические механизмы проявления бесплодия для каждого STS-маркера.