Эта статья опубликована в сборнике статей по материалам XII Российского конгресса молодых  ученых  с  международным  участием "Науки о человеке"  (Томск, 26-27 мая 2011 г.) / под ред.   Л.М. Огородовой, Л.В. Капилевича. – Томск: СибГМУ. – 2011. – 104 с. 

Скачать сборник целиком (PDF, 1,6 MB)

Разработка гибридных магнитоуправляемых наноконструкций, в которых белковая молекула иммобилизована на поверхности наночастицы, представляет значительный интерес для создания вы-сокоэффективных терапевтических и диагностических систем [1].

Целью данной работы было провести иммобилизацию молекулы фермента на поверхности су-перпарамагнитной наночастицы и исследовать его функциональную активность. В качестве ядра конструкции использовали покрытые углеродом наночастицы железа [2], поверхность которых была модифицирована оригинальной солью диазония (4-карбоксибензолдиазоний тозилатом) несущей карбоксильную группу [3]. В качестве модельного белка использовали фермент - пероксидазу хрена. Формирования ковалентной связи с белком проводили методом карбодиимидной активации. Полученные конструкции осаждали, используя постоянный магнит, и промывали (не менее 4 раз) последовательно фосфатным буфером и водой.

Формирование комплекса белок-наночастица было подтверждено методом ИК-спектрометрии. В ИК-спектре наноконструкции выявляли характерные полосы поглощения пероксидазы при 1640 см-1 и 1537 см^-1 (амид I и амид II) и наночастиц при 550 см^-1. По данным спектрофотометрии установлено, что 1 грамм частиц связывает 0,24 мкмоль фермента. Показано, что пероксидаза, иммобилизованная на частицах, сохраняла способность катализировать окисление ортофенилендиамина в присутствии H₂0₂.

Таким образом, разработан подход к иммобилизации на поверхности наночастиц белковых молекул, без нарушения их функциональной активности.