Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, Новосибирск

Эта работа опубликована в сборнике научных трудов «Естествознание и гуманизм» (2008 год, Том 5, выпуск 1), под редакцией проф., д.м.н. Ильинских Н.Н. Посмотреть титульный лист сборника

Известно, что амитоз представляет собой внутриклеточную регуляторную реакцию, направленную на установление определенных ядерно-цитоплазматических отношений [1]. Необходимость включения данного процесса часто возникает при неблагоприятных условиях [3]. Участие многоядерных клеток в развитии патологических процессов считается доказанным [2], хотя роль амитоза в их образовании не всегда отражается в современной литературе. Амитоз, в частности, имеет значение и для формирования многоядерных фибробластов [3], являющихся важной составляющей соединительной ткани, однако некоторые аспекты образования этих клеток в зависимости от условий их существования не достаточно изучены.
Целью исследования являлось определение активности процесса амитотического деления ядер в многоядерных фибробластах в зависимости от условий инкубации.
Концентрация посадки клеток в контрольных культурах составляла 100 тыс. фибробластов мыши в 1 мл взвеси. Аналогичным образом формировали и экспериментальные группы, с той разницей, что через 24 часа после посадки клеток дополнительно вносили по 0,3 мл взвеси лимфоцитов селезенки, или по 0,3 мл взвеси перитонеальных клеток, полученных от мышей линии BALB/c. Либо в указанном объеме добавляли кондиционную среду, полученную в результате инкубации (в течение 24 часов) лимфоцитов селезенки или перитонеальных клеток, выделенных от животных этой же линии. Культуры клеток инкубировали при температуре 37 С. Определяли частоту встречаемости многоядерных и одноядерных фибробластов с ядрами, делящимися путем амитоза. Результаты оценивали через 48 часов от начала инкубации.
Совместная инкубация фибробластов с лимфоцитами селезенки или с перитонеальными клетками не вызывала достоверного изменения частоты встречаемости многоядерных фибробластов в состоянии амитоза по сравнению с контрольным показателем. Аналогичная тенденция была отмечена и в отношении одноядерных клеток. Однако во всех группах культур наиболее часто признаки амитоза регистрировали в многоядерных фибробластах. Не зависимо от групповой принадлежности культур в одноядерных фибробластах амитоз регистрировали только в единичных клетках. В многоядерных клетках процесс амитотического деления затрагивал главным образом одно из ядер. В одноядерных и в многоядерных фибробластах образующиеся в результате амитоза фрагменты ядер различались по объему.
Следует отметить, что добавление в культуры фибробластов кондиционной среды, полученной в результате инкубации перитонеальных макрофагов или лимфоцитов селезенки не вызывало достоверного изменения частоты встречаемости одноядерных фибробластов с признаками амитотического деления ядра. По сравнению с контрольным показателем численность многоядерных фибробластов с указанным признаком снижалась в 2,9 раза в группе культур, инкубируемых с кондиционной средой полученной при культивировании перитонеальных клеток.
Таким образом, признаки амитоза отмечали, как правило, только в одном из ядер в многоядерных фибробластах. Добавление в культуры кондиционной среды, полученной при культивировании перитонеальных клеток, приводило к снижению численности многоядерных фибробластов с признаками амитотического деления ядра. Активность амитотического процесса в одноядерных клетках не имела межгрупповых различий.
Снижение численности многоядерных фибробластов с признаками амитоза при добавлении кондиционной среды, полученной при культивировании перитонеальных клеток, следует объяснить наличием в ней ряда регуляторных факторов, контролирующих функционирование фибробластов, и включающих механизмы направленные на оптимизацию внутриклеточных процессов. Многоядерные клетки, вероятно, являются более чувствительными по отношению к воздействию регуляторных факторов, чем одноядерные. Полученные результаты целесообразно использовать при создании моделей для изучения особенностей функционирования и формообразования многоядерных клеток соединительной ткани в зависимости от условий инкубации.

Список литературы:
1. Клишов А.А. Краткий цитологический словарь. - Медицина- 1968. - 118 с.
2. Hernandez-Pando R., Bornstein Q.L., Aguilar L.D., Orozco E.H., Madrigal V.K., Martinez C.E. Inflammatory cytokine production by immunological and foreign body multinucleated giant cells // Immunology. – 2000. – V. 100. – № 3. – Р. 352–358.
3. Walen K.H. Budded karyoplasts from multinucleated fibroblast cells contain centrosomes and change their morphology to mitotic cells // Cell. Biol. Int. – 2005. – V.29. – №12. P.1057–1065.