Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, Новосибирск

Эта работа опубликована в сборнике научных трудов «Естествознание и гуманизм» (2008 год, Том 5, выпуск 1), под редакцией проф., д.м.н. Ильинских Н.Н. Посмотреть титульный лист сборника

Наблюдение межклеточных взаимодействий in vitro дает возможность изучить особенности функционирования клеток [3; 4], и получить информацию, необходимую для решения ряда проблем в биологии и медицине. Подробно освещены вопросы взаимодействия между лимфоцитами и такими клетками, как фибробласты [1] и макрофаги [2]. Известно, что лимфоциты устанавливают непосредственный контакт с этими клетками, обеспечивающими их веществами, участвующими в энергетических и пластических процессах [1; 2].
Однако определенные аспекты, касающиеся индукции амитоза при таких межклеточных взаимодействиях не достаточно изучены. Необходимость в проведении такого исследования объясняется тем, что амитоз имеет значение для адекватного функционирования клеток [5]. Изучение взаимодействий лимфоцитов с макрофагами и фибробластами (являющимися донорами энергетических и питательных субстратов), позволит уточнить роль межклеточных отношений в процессах активизации амитоза.
Цель исследования заключалась в выявлении различий в активности течения амитоза в клетках-донорах (в макрофагах и фибробластах) в зависимости от их типа и генетической принадлежности.
Перитонеальные клетки выделяли из брюшной полости мышей линий BALB/c, CBA и C57BL/6. Концентрация посадки составляла 1000 тыс. клеток в 1 мл взвеси. Начальная концентрация посадки в контрольных культурах фибробластов мыши соответствовала 100 тыс. клеток в 1 мл взвеси. Аналогичным образом формировали и экспериментальную группу, с той разницей, что через 24 часа после посадки клеток дополнительно вносили по 0,3 мл взвеси лимфоцитов селезенки, полученных от мышей линии BALB/c. Результаты оценивали на 48 часов инкубации. Подсчитывали относительное количество клеток-доноров (макрофагов и фибробластов), имевших признаки амитотического деления ядра.
В культурах фибробластов, инкубируемых совместно с лимфоцитами селезенки, не наблюдали достоверных различий в количестве контактирующих (клеток-доноров) и не контактирующих с лимфоцитами фибробластов, имеющих признаки амитотического деления ядра (без цитотомии).
Наиболее часто признаки амитотического деления ядра в макрофагах отмечали в культурах группы BALB/c, что не зависело от их контакта с лимфоцитами. Суммарные показатели численности клеток с признаками амитоза в культурах группы BALB/c превосходили параметры групп СВА и С57BL/6 в 1,7 раза. В культурах группы BALB/c частота встречаемости не контактирующих с лимфоцитами клеток в состоянии амитоза была выше, чем в культурах групп СВА и С57BL/6 в 3,3 и в 2,5 раза, соответственно. Количество клеток-доноров, имеющих признаки амитотического деления ядра в культурах группы BALB/c превышало таковое в культурах групп СВА и С57BL/6 в 1,4 раза.
Отмечали отсутствие достоверных межгрупповых различий по показателю частоты встречаемости клеток-доноров в состоянии амитоза в культурах групп СВА и С57BL/6. В культурах групп СВА и С57BL/6 в клетках-донорах признаки амитоза встречались чаще, чем в клетках не контактирующих с лимфоцитами в 4 и в 3 раза, соответственно.
Таким образом, были выявлены определенные генетически детерминированные различия в частоте встречаемости перитонеальных макрофагов с признаками амитотического деления ядра. Данные клетки встречались преимущественно в культурах группы BALB/c. В культурах групп СВА и С57BL/6 численность клеток-доноров (макрофагов, контактирующих с лимфоцитами) в состоянии амитоза превышало количество подверженных амитозу фагоцитов, не контактирующих с лимфоцитами.
При инкубации фибробластов совместно с лимфоцитами селезенки не отмечали, что наличие контактов между данными клетками приводило бы к увеличению частоты встречаемости фибробластов в состоянии амитоза, по сравнению с не контактирующими клетками. Численность макрофагов-доноров в состоянии амитоза (не зависимо от генетической принадлежности) многократно превосходила количество фибробластов-доноров с указанным признаком. Однако поскольку данная тенденция наблюдалась и при сравнении клеток, не контактирующих с лимфоцитами, то следует предположить, что фибробласты более резистентны, чем макрофаги. Полученные результаты целесообразно использовать при дальнейшей разработки экспериментальных моделей по изучению спонтанного и индуцированного амитоза.

Список литературы:
1. Лурия Е.А. Кроветворная и лимфоидная ткань в культурах // Медицина – Москва, 1972. – 176 с.
2. Gurlo T., von Grafenstein H. Antigen-independent cross-talk between macrophages and CD8+ T cells facilitates their cooperation during target destruction // Int. Immunol. – 2003. – №  9. – P. 1063–1071.
3. Kovanen P.T. Mast cell granule-mediated uptake of low density lipoproteins by macrophages: a novel carrier mechanism leading to the formation of foam cells // Ann. Med. – 1991. – № 5. – P. 551–559.
4. Ma H., Kovanen P.T. IgE-dependent generation of foam cells: an immune mechanism involving degranulation of sensitized mast cells with resultant uptake of LDL by macrophages // Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. – 1995. – № 6. – P. 811–819.
5. Tang N., Li C., Xu J. Experimental study on regenerative capacity and form of corneal