Научные руководители: канд. мед. наук, доц. М.А. Сеньчукова, д-р биол. наук, проф. А.А. Стадников
Оренбургская государственная медицинская академия, г. Оренбург

Эта работа была опубликована в cборнике материалов I Всероссийской научной студенческой конференции с международным участием «МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ: ДОСТИЖЕНИЯ И ПЕРСПЕКТИВЫ», под редакцией проф., д-ра мед. наук С.И. Карася (г. Томск, 10-11 ноября 2011 года). 

Введение. Возникновение метастазов является основной причиной смерти от злокачественных новообразований. В связи с этим идентификация маркеров, связанных с метастатическим потенциалом опухоли, важно как для планирования терапии, так и для прогнозирования результатов лечения онкологических больных.
В настоящее время в ряде исследований показано, что воспалительная инфильтрация стромы опухоли и неоангиогенез являются важными факторами опухолевой прогрессии. Было установлено, что плотность микрососудов в строме опухоли при раке желудка коррелирует с наличием регионарных и отдаленных метастазов[1,4], показателями выживаемости больных. Характер воспалительной инфильтрации стромы опухоли также влиял на отдаленные результаты лечения больных раком желудка[2,3]. Следует отметить, что характер воспалительных изменений и неоангиогенез в основном изучались в строме опухоли. Роль нео-ангиогенеза и воспалительных изменений слизистой желудка на участках, прилежащих к опухоли изучены недостаточно.

Цель. Установить значение лимфоидной инфильтрации слизистой оболочки желудка и неоангиогенеза в прогрессии рака желудка.

Материал и методы. Исследовали гистологические препараты опухоли и ближайших к ней участков подслизистой основы слизистой оболочки желудка у 52 больных, радикально оперированных в Оренбургском областном клиническом онкологическом диспансере. Средний возраст больных равен 61,4+7,3 г. Материал для исследования (слизистая оболочка желудка на расстоянии 3-5 см и на границе с опухолью) забирали сразу после удаления операционного препарата и подвергали стандартной гистологической обработке. Срезы окрашивали гематоксилином Майера и эозином и по Ван-Гизону. Иммуногистохимические исследования с использованием антител к CD34 Ab-1(Clone QBEnd/10) проводили в соответствии с протоколом фирмы изготовителя (Thermo Scientific) на Autostainer 480 (Австрия). В качестве системы визуализации применялась UltraVision LP Detection System HRP Polymer & DAB Plus Chromogen. Препараты изучали с помощью микроскопа Optica B-350 с использованием видеокамеры Digital Camera for Microscope DCM500. В исследуемых препаратах измеряли относительную площадь сосудов в собственной пластинке и подслизистой основе слизистой оболочки желудка. В опухоли и слизистой оболочки желудка определяли наличие лимфатических фолликулов, степень метаплазии и выраженность атрофии, наличие сосудов микроциркуляторного русла в подслизистой основе слизистой оболочки желудка.
Полученные данные сопоставлены с клинико-морфологическими особенностями опухолевого процесса: стадией заболевания, гистологической структурой опухоли, размерами опухоли, наличием метастазов в регионарные лимфоузлы. Статистическая обработка результатов исследования проводилась стандартными методами. Достоверность различий измеряемых величин устанавливалась с использованием критерия Стьюдента и критерия z для сравнения долей.

Результаты. По стадиям больные распределялись следующим образом: T1-T2N0M0 - 34%; T3N0M0 - 21% ^юбоеМ^ - 45%. Высо-кодифференциированная аденокарцинома была диагностирована у 24% больных, Умереннодифференциированная аденокарцинома - 22 % больных, низкодифференциированная аденокарцинома - 24% больных и у 30 % был перстневидно-клеточный рак желудка.
При изучении сосудов слизистой оболочки желудка установлено, что только дилятированные сосуды, локализованные в подслизистой основе слизистой оболочки желудка, образованные одним слоем эндоте-лиальных клеток, ядра которых были овальной формы, округлые на поперечных срезах с нежно-сетчатой структурой хроматина, имеют прогностическое значение. Они достоверно чаще встречались с метастазами в регионарных лимфоузлах. Данные сосуды были выявлены у 35% больных со стадией T1 -2N0M0*, 20% - при стадии T3-4N0M0** и 75% при стадии T2-4N1-2M0*** (р*,**=0,05   и р*,***=0,05).
Площадь сосудов капиллярного типа в подслизистой основе слизистой оболочки желудка в группе больных со стадией T1-2N0M0 была достоверно ниже, чем при стадии T3-4N0M0 и стадии T2-4N1-2M0 (р*,**=0,0001 р*,***=0,002). Отмечено увеличение площади указанных сосудов с увеличением размеров опухоли: 0,013±0,01* при опухолях до 2 см, 0,08±0,02 при опухолях от 2 до 5 см и 0,12±0,02** при опухолях больше 5 см (р*,**=0,01).
Выраженная лимфоидная инфильтрация на границе с опухолью значительно чаще встречалась при наличии метастазов в регионарных лимфоузлах (T1-2N0M0*=32%, T3-4N0M0**=42%, T2-4N1-2M0***=70%, р*,***=0,04) и при размерах опухоли больше 5 см (до 2 см*=22%, 2-5 см**=42%, более 5 см***=68%, р*,***=0,04) . Характер лимфоидной инфильтрации в слизистой желудка зависел от локализации опухоли. При локализации в верхней трети* значительная инфильтрация отмечалась у 20%, в средней трети**-53%, в нижней трети***-67% больных. (р*,***=0,013). При подсчете количества клеток, экспрессирующих CD34 в лимфоидных фолликулах слизистой оболочки желудка на условную единицу площади было установлено, что их количество достоверно выше при диффузном типе рака желудка (1,33+0,23 и 1,0+0,39 при диффузном и кишечном типе рака желудка, соответственно, Р=0,003). При наличии метастазов в регионарные лимфоузлы количество клеток, экс-прессирующих CD34 в лимфоидных фолликулах слизистой оболочки желудка было несколько больше, чем при отсутствии.

Выводы.
1.    Патологический ангиогенез при раке желудка затрагивает не только ткань опухоли, но и ближайшие к опухоли участки слизистой оболочки желудка.
2.    Наличие дилятированных сосудов капиллярного типа, выстланных эндотелием с характерной для бластных клеток нежно-сетчатой структурой ядерного хроматина, свидетельствует об активных процессах неоан-гиогенеза и коррелирует с риском развития лимфогенных метастазов.
3.    Выраженная лимфоидная инфильтрация слизистой оболочки желудка на границе с опухолью и количество клеток, экспрессирующих CD34 в лимфоидных фолликулах, могут являться факторами, связанными с опухолевой прогрессией рака желудка.

Список литературы:
1.    Hong-Chuan Zhao, Rong Qin, Xiao-Xin Chen, Xia Sheng, Ji-Feng Wu, Dao-Bin Wang, Gui-Hua Chen Microvessel density is a prognostic marker of human gastric cancer // World J Gastroenterol. - 2006. - Vol. 47 (12) P. 7598-7603.
2.    Roxburgha C.S., Salmondb J.M., Horgana P.G., Oienb K.A., McMillana D.C. Tumour inflammatory infiltrate predicts survival following curative resection for node-negative colorectal cancer// Eur J of Cancer. - 2009. - Vol. 45 (12). - P. 2138-2145.
3.    Shen Z., Zhou S., Wang Y. et al. Higher intratumoral infiltrated Foxp3+ Treg numbers and Foxp3+/CD8+ ratio are associated with adverse prognosis in resectable gastric cancer. //J Cancer Res Clin Oncol. - 2010. - Vol. 136(10). - P. 1585-95.
4.    Yan-Dong Wang, Pei Wu, Jia-Ding Mao, He Huang, Fan Zhang. Relationship between vascular invasion and microvessel density and micrometastasis// World J Gastroenterol. - 2007. - Vol. 46 (13). - P. 6269-6273.