|
Кемеровский государственный университет, г.Кемерово
Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам пятого конгресса молодых ученых и специалистов «Науки о человеке» / Под ред. Л.М. Огородовой, Л.В. Капилевича.- Томск, СибГМУ.- 2004.- 413 с.
Скачать сборник целиком
Выявление ядрышка в интерфазном ядре основывается на окрашивании азотнокислым серебром негистоновых белков РНП [1]. Изучение числа ядрышек может давать ценную информацию об особенностях локализации акроцентрических хромосом, несущих районы ядрышковых организаторов. Большой интерес вызывают исследования, направленные на поиск таких особенностей в малых этнических группах, где вследствие значительной генетической изоляции популяции могут накапливаться специфические особенности функционирования и локализации генов.
Телеуты - одна из малочисленных народностей Сибири (3 тыс.человек), относящихся к группе сибирских татар. На территории Кемеровской области (Беловский район) проживает около 2,5 тысяч человек, остальные рассредоточены на Алтае.
В ходе комплексной экспедиции нами были обследованы 66 телеутов, компактно проживающих в селе Беково Беловского района. Контрольную группу составили 39 жителей г.Кемерова. У всех обследованных забирали в асептических условиях кровь, которую затем культивировали по стандартному полумикрометоду [2]. В стерильные флаконы для культивирования помещали по 6 мл питательной среды RPMI-1640, по.5 мл сыворотки крупного рогатого скота, 0.1мл ФГА и вносили по 0.5 мл крови. Все флаконы нумеровали и помещали в термостат 370С на 48 часов. За 2 часа до окончания сроков культивирования вносили колхицин в концентрации 0.5мкг/мл. По окончании срока культивирования клеточную взвесь подвергали гипотонической обработке 0.075М раствором КО при 370С в течение 20 минут. Затем материал трижды фиксировали охлажденным этанол-уксусным фиксатором в соотношении 3:1. Раскапывали на охлаждённые чистые предметные стёкла с последующим их высушиванием вблизи пламени спиртовки. Препараты шифровали цифровыми обозначениями. Затем проводили окрашивание азотнокислым серебром [3]. Анализировали по 100 клеток у каждого человека.
Проведенный нами анализ позволил установить, что среднее количество ядрышек на ядро у телеутов -2,56+0,07 (n=66), что весьма близко к значениям, полученным при обследовании русских жителей г.Кемерово -2,51+0,08 (n=35). Различий по возрасту и полу в сравниваемых группах не выявлено. Известно, что уровень хромосомных аберраций (ХА) у телеутов составляет, в среднем, 2,74+0,25%, что соответствует средним значениям уровня хромосомных нарушений для жителей сельских районов Кемеровской области -2,86+0,26% [4]. У телеутов с уровнем хромосомных аберраций до 3 % среднее количество ядрышек оказалось равным 2,28+0,06, а у лиц, с высоким уровнем аберраций (выше 3%) ядрышек достоверно больше - 2,93+0,14, что соответствует представлениям о влиянии ХА на пространственную организацию ядра.
В заключении отметим, что отсутствие различий в среднем количестве ядрышек у телеутов и русских отражает определенное сходство в топографии интерфазного ядра.
Список литературы
1. Goodpasture C., Bloom S. Visualization of nucleolar organizer regions in mammalian chromosomes using silver staining // Chromosoma. - 1975. - V. 53. -P.37-50.
2. Hungerford D.F. Leucocytes cultured from smoll inocula of whole blood hypotonic KCl // Stain Technol., 1965, V.40, P. 333-338.
3. Howell W.M., Black D.A. Controlled silver-staining of nucleolus rganizer regions with a protective colloidal developer: a 1-step method // Experienta, 1980, V. 36, P. 1014-1015.
4. Дружинин В.Г. и др. Оценка "груза" хромосомных мутаций в малых этнических группах населения Кузбасского промыщленного региона // Региональная национальная политика: исторический опыт и критерии оценки эффективности, Кемерово, 2003, С.112-114
|